翻转课堂与答辩应用于环境卫生实验课的初探

目的为培养预防医学专业本科生的科研思维和科研能力,提出建立将翻转课堂与答辩结合的《环境卫生学》实验教学模式。方法选择中国医科大学五年制预防医学生,分为实验班和对照班。实验班实施翻转课堂并结合答辩的教学模式,对照班应用传统教学模式。结果实验班学生的科研能力高于对照班。结论翻转课堂结合答辩的环境卫生学实验教学模式能够提高学生的科研能力,提高学生的实验动手能力及团队协作能力。

新型汽油添加剂MMT的环境污染及其特征

新型汽油添加剂三羟基甲基戊基锰(methylcyclopentadisnyl manganese tricarbonyl,MMT)在机动车内燃烧后,其中有30%的锰从汽车排气管排入到大气中,大量排放的含锰废气,使环境空气受到锰的严重污染,带给人类的健康效应越来越受到广大学者关注。现在进行的实验和调查显示了MMT所致环境污染:它能污染路边空气、土壤、植物、动物,不过暴露水平都低于国际标准安全值。学者们的研究工作大部分集中于评价燃烧MMT所致的锰的环境污染、MMT的毒作用和人群暴露,本文将分别加以叙述。

锰对大鼠脑线粒体能量代谢及氧化损伤影响

目的通过N-乙酰半胱氨酸(NAC)干预研究锰对大鼠脑纹状体和皮质线粒体能量代谢和氧化损伤的影响。方法Wistar大鼠24只,按体重随机分成3组:对照组、MnCl2组、NAC预处理组,连续染毒21 d。取大鼠脑纹状体和皮质,梯度离心获得线粒体,测量顺乌头酸酶、线粒体复合体I活性,丙二醛(MDA)、还原型谷胱甘肽(GSH)含量和线粒体膜电位。结果与对照组比较,MnCl2组顺乌头酸酶〔(18.64 nmol/(min.mg pro)〕线粒体复合体I〔(48.92nmol/(min.mg pro)〕的活性显著降低;MDA含量〔37.98nmol/(g pro)〕显著升高,GSH含量〔3.99μmol/(g pro)〕显著降低;线粒体膜电位(荧光强度为25.54)显著降低(P<0.05)。与MnCl2组比较,NAC预处理组顺乌头酸酶〔(22.95nmol/(min.mg pro)〕、线粒体复合体I〔(66.89nmol/(min.mg pro)〕的活性显著升高;MDA含量〔(31.44 nmol/(g pro)〕显著降低,GSH含量〔5.56μmol(g pro)〕显著升高;线粒体膜电位(荧光强度为37.71)显著升高(P<0.05)。结论锰可导致大鼠脑线粒体能量代谢障碍和氧化损伤;NAC预处理能有效预防锰所致大鼠脑线粒体能量代谢障碍和氧化损伤。

沙棘油和亚硒酸钠对汞诱导的大鼠肝肾氧化损伤的影响

目的通过汞诱导大鼠肝肾氧化损伤,观察沙棘油(Sea Buckthorn Oil,SBO)和亚硒酸钠(Na2SeO3)干预效应。方法Wister大鼠随机分成对照组、单纯染汞组、SBO和Na2SeO3处理组。测定肝、肾及尿中汞含量,肝、肾中GSH、MDA、蛋白含量和SOD、GSH-PX活力。结果与单纯染汞组相比,SBO处理组尿汞含量增加(P<0.05),肝GSH-PX活力升高(P<0.01);Na2SeO3处理组肝汞增加,肾和尿汞含量下降,肝GSH-PX活力、GSH含量均升高(P<0.01),肝SOD活力和肾GSH-PX活力均增加(P<0.05),肾MDA含量下降(P<0.05)。结论沙棘油具有促进汞从肾脏排出的作用,对汞诱导的肝氧化损伤具有一定保护作用,对肾氧化损伤未表现出明显的保护作用。Na2SeO3可有效拮抗汞诱导的肝肾氧化损伤作用。

脉络丛对镉的屏护作用及其病理形态学改变

为研究脉络丛对镉的屏护作用及其病理形态学改变 ,给兔耳缘静脉注射CdCl2 1 0 ,2 0和 4 0mg/kg,4、2 4h处死兔 ,采集组织样品 ,分别测定血液、脑脊液、侧脑室脉络丛、大脑皮质、肝脏和肾皮质镉含量 ;脉络丛样品冲洗、固定后 ,制成组织切片 ,用光镜、电镜观察脉络丛的病理形态学改变。结果显示脉络丛镉明显高于血液、脑脊液、大脑皮质 ,高剂量组脑脊液镉含量明显高于其它组。光镜可见脉络丛上皮细胞变性、坏死 ,电镜可见脉络丛上皮鲁米那平面破损 ,纤毛缺失 ,核变性 ,胞质空泡 ,溶酶体增加 ,粗面内质网肿胀 ,细胞连接间隙变宽。提示脉络丛能浓缩和屏护镉 ,阻止镉从血液进入脑组织。当染镉达到一定剂量时 ,这种屏护作用减弱甚至消失 。

原花青素和褪黑素对镉致大鼠急性肝氧化损伤影响的实验研究

目的探讨原花青素(PC)和褪黑素(MLT)对镉致大鼠急性肝脏氧化损伤的影响。方法实验用Wistar大鼠32只,按体质量随机分为4组。第1组为对照组,第2组为单纯染镉组,第3组和第4组为PC和MLT预处理组,分别灌胃450 mg/kg PC和5 mg/kg MLT。3 h后第1组皮下注射0.9%生理氯化钠(NaCl),第2、3、4组分别皮下注射35μmol/kg氯化镉(CdCl2),注射容量均为5 ml/kg体质量。染毒24 h后腹主动脉取血并切取肝脏,测定血清中乳酸脱氢酶(LDH)、丙氨酸转氨酶(ALT)活力,测定肝组织中丙二醛(MDA)、谷胱甘肽(GSH)含量及谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)、超氧化物歧化酶(SOD)活力。结果与对照组比较,单纯染镉组大鼠血清LDH、ALT活力及肝GSH、MDA含量显著升高(分别为257.02、27.13 U/L和10.49μg/g、118.28 nmol/g),GSH-Px、SOD活力明显下降(0.22 U/mg、91.16 U/g)。与第2组比较,PC和MLT预处理组大鼠血清LDH和ALT活力显著降低(分别为181.93、158.15 U/L和12.12、21.08 U/L),肝GSH、MDA含量显著下降(8.74、7.90μg/g和69.99、99.27 nmol/g),GSH-Px、SOD活力明显升高(0.46×103、0.28×103U/g和114.14、106.52 U/g)。结论PC和MLT预处理对镉所致急性肝脏氧化损伤有一定的拮抗作用。

地卓西平和牛磺酸对染锰大鼠纹状体Glu-Gln环路的影响

目的观察MK-801和牛磺酸对锰引起的纹状体谷氨酰胺合成酶（GS）和谷氨酰胺酶（PAG）的活性变化和纹状体谷氨酸能神经元含量的影响。方法大鼠按体重随机分成4组,每组10只,第1组为对照组,皮下注射0.9%的氯化钠;第2组为单纯染锰组,皮下注射0.9%的氯化钠;第3、4组为预处理干预组,分别皮下注射0.3μmol/kg的MK-801和1mmol/kg的牛磺酸。皮下注射2h后,第1组腹腔注射0.9%的氯化钠,第2-4组腹腔注射200μmol/kg的氯化锰,染锰25天,MK-801和牛磺酸隔日注射一次,共预处理13次。最后一次染毒后24h,每组取4只,将大鼠用乙醚麻醉,经左心室灌流固定后采集脑组织,用SABC免疫组织化学法测定纹状体谷氨酸能神经元含量。将每组另外6只大鼠直接处死,切取脑纹状体,测定GS和PAG的活性。结果单纯染锰组与对照组比较,纹状体Aa（%）和IOD明显升高,P〈0.01;纹状体GS活性降低,PAG的活性升高;MK-801预处理干预组与单纯染锰组比较,纹状体Aa（%）和IOD明显降低,GS活性明显升高,PAG活性降低;牛磺酸预处理干预组纹状体Aa（%）和IOD降低,GS活性明显升高。结论MK-801和牛磺酸对锰致大鼠Glu-Gln环路紊乱均有不同程度的拮抗作用。

镉致大鼠肾脏毒性机制研究

目的研究镉对肾脏产生的毒性作用,并初步探讨镉的肾脏毒性机制。方法低、中、高剂量染镉组大鼠分别皮下注射3,5,7μmol CdCl2/(kg.bw)6周。测定尿镉、蛋白含量和尿N-乙酰-β-D氨基葡萄糖苷酶(NAG)、碱性磷酸酶(ALP)、乳酸脱氢酶(LDH)活性,测定肝脏和肾皮质丙二醛(MDA)和谷胱甘肽(GSH)含量。结果尿蛋白含量和尿NAG、ALP、LDH活性以及肝、肾皮质MDA和GSH含量随染镉剂量增加而升高。中剂量染镉组尿蛋白含量和尿NAG、LDH活性以及肾皮质MDA、GSH含量显著高于对照组和低剂量染镉组。高剂量染镉组尿蛋白含量、ALP活性、肝和肾皮质MDA显著高于对照组和低中剂量染镉组。且尿镉、蛋白含量、尿NAG、ALP、LDH活性与肾皮质MDA含量呈显著正相关。结论镉生物学效应随染毒剂量增加而增强,CdCl25μmol/(kg.bw)对肾脏产生一定损伤作用,CdCl27μmol/(kg.bw)时肾脏损伤加重。镉的肾毒性机制与其氧化损伤作用有关。

N-乙酰半胱氨酸和α-硫辛酸对汞氧化损伤的拮抗作用

目的:探讨N-乙酰半胱氨酸(NAC)和α-硫辛酸(LA)对汞急性毒性的影响。方法:W istar大鼠32只,随机分成4组:对照组、单纯染汞组、NAC干预组、LA干预组。注射48 h后,测定血清谷丙转氨酶(GPT)活性,肾皮质、肝脏中汞、丙二醛(MDA)和谷胱甘肽(GSH)含量及谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)、超氧化物歧化酶(SOD)活性。结果:与对照组比较,单纯染汞组肾皮质、肝脏汞含量增高,血清GPT活性升高;肾皮质、肝脏MDA含量显著升高,GSH含量和GSH-Px、SOD活性降低。与单纯染汞组比较,NAC干预组血清GPT活性,肾皮质、肝脏MDA含量显著降低;GSH含量、GSH-Px活性显著增高;肝脏SOD活性增高。LA干预组肾皮质汞含量升高,肝脏汞含量、血清GPT活性显著降低;肾皮质、肝脏MDA含量降低,GSH含量和GSH-Px活性增高;肝脏SOD活性增高。结论:NAC和LA预处理对汞所致急性肝肾氧化损伤有一定的保护作用。

锰致脑线粒体损伤机制的研究进展

锰是一种重要的环境和工业污染物,职业工人长期接触锰,可出现类似帕金森病的临床表现。锰的毒性机制现在还不太清楚,研究表明其很可能与线粒体的结构和功能异常有关,然而关于锰对线粒体功能影响的报道较少,本文将近年来探讨锰致脑线粒体损伤机制的研究综述如下。

胍丁胺和尼莫地平对锰致大鼠兴奋性毒性影响

目的研究胍丁胺和尼莫地平对锰引起的大鼠脑纹状体谷氨酰胺合成酶、磷酸激活的谷氨酰胺酶和脑皮质Na+-K+-ATP酶、Ca2+-ATP酶活性变化的影响。方法32只大鼠按体重随机分成4组,第1组为对照组;第2组为单纯染锰组,第3,4组分别为胍丁胺和尼莫地平预处理干预组,连续干预并染锰4周。最后1次染毒后24h,将每组大鼠直接处死,断头取脑,在冰浴下分离脑纹状体和皮质,应用比色法测定脑纹状体中谷氨酰胺合成酶、磷酸激活的谷氨酰胺酶和脑皮质中Na+-K+-ATP酶和Ca2+-ATP酶的活性。结果在单纯染200μmol/kg的氯化锰组中,谷氨酰胺合成酶〔(50.41±5.47)U/(min.g.pro)〕、Na+-K+-ATP酶(2.13±0.15)μmol/(h.mg)、Ca2+-ATP酶(0.56±0.28)μmol/(h.mg),3种酶与对照组比较活性明显降低(P<0.01),磷酸激活的谷氨酰胺酶(72.24±9.38)μmol/(min.g.pro),与对照组比较活性明显升高(P<0.01);而21.9μmol/kg的胍丁胺和2.4 mmol/kg的尼莫地平预处理干预组与单纯染锰组比较,谷氨酰胺合成酶、Na+-K+-ATP酶、Ca2+-ATP酶活性明显升高(P<0.01),磷酸激活的谷氨酰胺酶活性明显降低(P<0.01)。结论胍丁胺和尼莫地平对锰致大鼠兴奋性毒性有一定的保护作用。

锰致大鼠脑线粒体氧化损伤及NAC干预的实验研究

目的通过线粒体孵育液染锰并用NAC干预研究锰致大鼠脑线粒体氧化损伤的影响。方法Wistar大鼠12只，麻醉后断头取脑，梯度离心得线粒体液。将所得线粒体液分为6组，第1组为对照组；第2～5组为不同剂量染锰组，分别加入5、50、500、1000umol／L MnCl2；第6组为NAC预处理组，线粒体液先用500umol／L NAC预处理1h后加500umol／L MnCl2。各组于培养箱内30℃孵育2h后测MDA和GSH含量及线粒体膜电位，每个指标重复测量6次。结果与对照组相比，50、500、1000mmol／l。染锰组MDA含量显著升高；500、1000umol／L染锰组GSH含量显著降低；50、500、1000mmol／L染锰组线粒体膜电位显著降低（P〈0．05）。且在一定范围内随着MnCl2剂量增加，MDA含量有升高趋势，GSH含量和线粒体膜电位有降低趋势。与单纯染锰组相比，NAC预处理组MDA含量显著降低，GSH含量和线粒体膜电位显著升高（P〈0．05）。结论锰可以剂量依赖性地诱导大鼠脑线粒体氧化损伤；NAC预处理能有效预防锰所致大鼠脑线粒体氧化损伤。

L-谷氨酸钠和右美沙芬对锰致大鼠兴奋性神经毒性的影响

目的观察L-谷氨酸钠和右美沙芬(DM)对锰致大鼠神经兴奋性毒性的影响。方法实验用Wistar大鼠24只,按体重随机分成4组,每组6只。第1组为对照组,第2组为单纯染锰组,第3、4组为L-谷氨酸钠和DM预处理组,分别皮下注射L-谷氨酸钠10mmol/kg和DM13.5μmol/kg;2h后,第1组腹腔注射0.9%氯化钠溶液,第2、3、4组腹腔注射200μmol/kg的氯化锰溶液,注射容量均为5ml/kg。连续染锰共25d,L-谷氨酸钠和DM隔日1次皮下注射,共13次,而后测定脑纹状体磷酸活化的谷氨酰胺酶(PAG)和谷氨酰胺合成酶(GS)活力和大脑皮质Na+-K+-ATP酶、Ca2+-ATP酶和琥珀酸脱氢酶(SDH)活力。结果连续染锰后,单纯染锰组大鼠PAG活力明显升高,而GS、Na+-K+-ATPase、Ca2+-ATPase和SDH活力明显下降;DM预处理组与单纯染锰组比较,PAG活力明显下降,而GS、Na+-K+-ATPase、Ca2+-ATPase和SDH活力均明显回升。结论亚急性染锰可使大鼠产生兴奋性神经毒性,并且DM能有效地拮抗锰的这种毒性。

α-硫辛酸和牛磺酸对急性镉氧化损伤影响的实验研究

目的探讨α硫辛酸(LA)和牛磺酸(Tau)对急性镉氧化损伤的影响。方法实验用Wistar大鼠32只,分为4组,第一组为对照组,第二组为单纯染镉组,两组均先腹腔注射生理盐水,2h后分别皮下注射生理盐水和35μmol/kgCdCl2溶液。第三组和第四组为LA和Tau预处理组,先分别腹腔注射175μmol/kg的LA溶液和4mmol/kg的Tau溶液,2h后皮下注射35μmol/kgCdCl2溶液。染毒24h后腹主动脉取血并取肝肾,测定血清乳酸脱氢酶(LDH)、丙氨酸氨基转移酶(ALT)活性,肝、肾皮质中Cd、丙二醛(MDA)、谷胱甘肽(GSH)含量及谷胱甘肽过氧化物酶(GSHPx)、超氧化物歧化酶(SOD)活性。结果与对照组比较,单纯染镉组的血清LDH、ALT活性及肝、肾皮质镉含量显著升高,SOD活性显著下降。肝GSH、MDA含量显著升高,GSHPx活性显著下降。与单纯染镉组比较,LA和Tau干预组的血清ALT和LDH活性及肝组织Cd含量显著降低,肝GSHPx活性显著增高。LA干预组的肝MDA含量显著降低,肝、肾皮质SOD活性显著升高。Tau干预组肝GSH含量、肾皮质镉含量显著降低。结论LA和Tau预处理对镉所致急性肝脏氧化损伤有一定拮抗作用。

N-乙酰半胱氨酸和α-硫辛酸对汞急性肾功能损伤的影响

为探讨N-乙酰半胱氨酸(NAC)和α-硫辛酸(LA)对汞急性肾功能损伤的影响,将32只Wistar大鼠随机分成4组:对照组、单纯染汞组、NAC干预组、LA干预组。单纯染汞组先腹腔注射生理盐水,2 h后,皮下注射HgCl2溶液9.2μmol/kg。NAC和LA干预组先分别腹腔注射NAC溶液2 mmol/kg及LA溶液0.35 mmol/kg,2 h后,皮下注射HgCl2溶液。对照组在相应时间内注射生理盐水。染毒后12 h将鼠移至代谢笼中收集12 h尿样,染毒后48 h腹主动脉取血并切取肾脏,测定尿碱性磷酸酶(ALP)、乳酸脱氢酶(LDH)、N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶(NAG)活性,尿蛋白、血清尿素氮(BUN)含量及尿和肾皮质中汞含量。与对照组比较,单纯染汞组尿汞、肾皮质汞含量,尿ALP、LDH、NAG活性,尿蛋白、BUN含量显著升高;NAC干预组尿汞、肾皮质汞含量及LA干预组肾皮质汞含量明显升高。与单纯染汞组比较,LA干预组尿汞含量显著降低,肾皮质汞含量明显升高;两干预组尿ALP、LDH、NAG活性及尿蛋白、BUN含量显著降低。说明NAC和LA预处理对汞急性肾功损伤有一定的保护作用,但对LA改变汞组织分布应进一步研究。

锰对大鼠脑线粒体能量代谢的影响

目的通过线粒体孵育液染锰并用NAC干预研究锰对大鼠线粒体能量代谢的影响及NAC的防护效果。方法Wistar大鼠12只，麻醉后断头取脑，梯度离心得线粒体液。将所得线粒体液分为6组，第1组为对照组；第2。5组为不同剂量染锰组，分别加入5、50、500、1000μmol／LMnCl2；第6组为NAC预处理组，线粒体液先用500μmol／LNAC预处理1h后加500μmol／LMnCl2。各组于培养箱内30℃孵育2h后测顺乌头酸酶、线粒体复合体Ⅰ的活性和线粒体膜电位，每个指标重复测量6次。结果与对照组相比，500、1000μmol／L染锰组顺乌头酸酶活性显著降低（P〈0．05），50、500、1000μmol／L染锰组线粒体复合体Ⅰ的活性和线粒体膜电位显著降低（P〈0．05），且在一定范围内随着MnCl2剂量增加，顺乌头酸酶、线粒体复合体Ⅰ的活性和线粒体膜电位有降低趋势。与单纯染锰组相比，NAC预处理组顺乌头酸酶、线粒体复合体Ⅰ的活性和线粒体膜电位显著升高（P〈0．05）。结论锰可以剂量依赖性地诱导大鼠脑线粒体能量代谢降低；NAC预处理能预防锰所致大鼠脑线粒体能量代谢降低。

沙棘油和亚硒酸钠对汞中毒大鼠的拮抗作用

目的探讨在体一次染毒条件下氯化汞对大鼠肝肾脏毒性作用并观察沙棘油和亚硒酸钠预处理对汞毒性的影响。方法将Wistar大鼠随机分成对照组、单纯染汞组、沙棘油和亚硒酸钠干预组。各组经染毒处理12 h后收集大鼠12 h尿液,采集血液、切取肝脏和肾皮质样品。测定肝脏、肾皮质和尿汞含量;尿N-乙酰--βD-氨基葡萄苷酶(NAG)、碱性磷酸酶(ALP)、乳酸脱氢酶(LDH)活性和尿蛋白、血清尿素氮(BUN)含量。结果沙棘油干预组肝汞、肾皮质汞、尿NAG、尿ALP活性和BUN含量显著低于单纯染汞组。亚硒酸钠干预组肝汞含量显著高于单纯染汞组。而肾皮质汞、尿汞含量和尿NAG、ALP、LDH活性、尿蛋白、BUN含量则显著低于单纯染汞组。结论沙棘油和亚硒酸钠对汞的肝、肾脏毒性具有一定拮抗作用。

沈阳市小学生紫外线个体暴露状况

目的了解沈阳市小学生四季紫外线个体暴露情况。方法采用个体紫外线监测仪对沈阳市小学生进行四季紫外线个体暴露剂量的测定,同时亦开展了环境紫外线剂量的监测。结果小学生个体紫外线暴露量春、秋高于冬、夏。冬季小学生个体紫外线暴露时间少于其他三季。上课日暴露量和暴露时间多于休息日。全年日平均暴露量和暴露时间在中午时段有明显集中趋势。小学生日平均暴露量占环境剂量的比例不超过8%。结论小学生个体紫外线暴露量日间分布基本对应于户外活动时间,其个体间差异主要是个体行为因素所致,季节对个体紫外线暴露有显著影响。个体紫外线暴露剂量只占当时环境剂量很小部分。

氯化锰致大鼠神经毒性机制的研究

为研究不同剂量的氯化锰对大鼠脑纹状体谷氨酰胺合成酶(GS)、磷酸激活的谷氨酰胺酶(PAG)和大脑皮质Na+-K+-ATPase和Ca2+-ATPase活力的影响,将32只SD大鼠,按体重随机分成4组。第1组为对照组,皮下注射生理盐水,第2～4组为不同剂量染锰组,分别皮下注射50、100和200μmol/kg的氯化锰溶液,每周注射5次,连续染毒4周。观察大鼠体重变化和一般表现。最后一次注射后24h处死大鼠,切取纹状体,测定GS和PAG的活力;切取大脑皮质,测定Ca2+-ATPase和Na+-K+-ATPase的活力。结果显示,随着染锰剂量的增加,脑纹状体GS活力降低,PAG活力升高,大脑皮质Ca2+-ATPase和Na+-K+-ATPase活力降低。与对照组比较,在50、100和200μmol/kg染锰组GS和Na+-K+-ATPase活力逐渐下降,差异有统计学意义;在100和200μmol/kg染锰组PAG的活力逐渐升高,Ca2+-ATPase活力逐渐下降,且差异有统计学意义。说明不同剂量氯化锰可引起大鼠脑纹状体GS活力降低,PAG活力升高;大脑皮质Na+-K+-ATPase和Ca2+-ATPase活力降低,由此可引起谷氨酸代谢失衡,产生神经毒性。

沙棘油和五味子乙素对镉致大鼠急性肝损伤的影响

将实验用Wistar大鼠32只,按体重随机分为4组,第1组为对照组,第2组为单纯染镉组,第3组和第4组为沙棘油(SBO)和五味子乙素(Sch B)预处理组,测定血清乳酸脱氢酶(LDH)、丙氨酸氨基转移酶(ALT)活性,肝丙二醛(MDA)、谷胱甘肽(GSH)含量及谷胱甘肽过氧化酶(GSH-Px)、超氧化物歧化酶(SOD)活性。与对照组比较,单纯染镉组的血清LDH、ALT活性及肝MDA、GSH含量显著升高,肝GSH-Px、SOD活性显著降低(P<0.01)。与单纯染镉组比较,SBO干预组的血清LDH、ALT活性、肝MDA、GSH含量显著降低,GSH-Px、SOD活性显著升高(P<0.01);Sch B干预组的血清LDH、ALT活性及肝MDA、GSH含量明显降低(P<0.01),GSH-Px活性升高,差异有统计学意义(P<0.05)。提示SBO和Sch B对镉急性肝氧化损伤具有一定的拮抗作用。