sim基因的分子遗传学研究进展

sim基因编码一种核蛋白，具有转录因子家族的特点。研究表明sim基因参与神经系统发育的所有过程，包括神经元前体细胞的形成，神经元和神经胶质细胞的同步分化，对肌肉原始细胞的定位和发育也有影响。sim基因具有正性自动调节作用，对其它基因也有调节作用。sim基因深入研究对了解中枢神经系统的形成、功能及进化的过程具有重要意义。

中国北方人苯丙氨酸羟化酶基因外显子7内新突变的鉴定

应用ＰＣＲ－单链构象多态性分析及ＤＮＡ直接测序，对４５例中国北方苯丙酮尿症（ＰＫＵ）患者苯丙氨酸羟化酶（ＰＡＨ）基因外显子７内突变进行了鉴定。共检出６种错义突变及一种静止突变：Ｒ２４３Ｑ．Ｒ４１Ｈ，Ｇ２４７Ｖ．Ｌ２４９Ｈ．Ｐ２５４Ｉ．Ｇ２５７Ｖ和Ｖ２４５Ｖ。经与国际ＰＡＨ基因突变数据库比较，确认Ｇ２５７Ｖ．Ｐ２５４Ｉ和Ｌ２４９Ｈ为国际上首次发现的突变。结果揭示，中国人与其他种族及中国北方与南方人群ＰＡＨ突变特点不同。明确了中国北方人群中ＰＡＨ基因外显子７基因突变分布，有助于提高ＰＫＵ的基因诊断率，对基因的起源。

S100A4蛋白表达与胃癌侵袭转移关系的研究

目的 :探讨S10 0A4蛋白表达水平与胃癌侵袭转移的关系。方法 :应用免疫组织化学方法检测 6 2例胃癌患者的胃癌组织和 38例癌旁正常粘膜、2 3例淋巴结转移癌及胃癌细胞系MKN45、BGC82 3中S10 0A4蛋白表达 ,Boyden小室法检测胃癌细胞侵袭能力。结果 :胃癌组织S10 0A4表达阳性率 (70 .96 % )显著高于癌旁正常粘膜 (15 .79% ) (P<0 .0 1)。在弥漫生长、低分化及未分化型、浸透浆膜、淋巴结转移阳性及淋巴结多数转移 (>5个 )的胃癌中 ,S10 0A4表达阳性率增高更明显 (P <0 .0 1或P <0 .0 5 ) ,淋巴结转移癌中S10 0A4表达阳性率 (10 0 % )显著高于相应原发灶(73.91% ) (P <0 .0 5 ) ,MKN45细胞侵袭力显著高于BGC82 3细胞 ,其S10 0A4表达水平亦显著高于BGC82 3细胞 (P<0 .0 1)。结论 :胃癌组织、细胞中S10 0A4表达增强与胃癌侵袭转移有关。

肝癌的肿瘤抑制基因研究

肝癌的肿瘤抑制基因研究进展迅速。杂合性丢失分析资料显示,染色体8p、13q、16q和17p区域存在与肝癌发生和演进关系密切的肿瘤抑制基因。肝癌中常见TP53基因突变,且多为第249密码子第3碱基G→T颠换。TP53基因这种特异性点突变代表肝癌的特征,可能和黄曲霉素B1摄入有关,但在肝癌中并没有普遍性。肝癌中染色体13q缺失的最小重叠区域为13q14,在肝癌组织中还同时发现伴随等位基因丢失的存留RBl等位基因突变以及和RBl等位基因丢失高度相关的p110^(RBl)蛋白丢失。因此,RBl基因为肝癌的又一重要肿瘤抑制基因。

hSIM2 cDNA克隆及组织表达谱的研究

利用λ噬菌体噬斑原位杂交技术筛查人胎儿肾脏cDNA文库,首次克隆出包括全部编码区在内的人hSIM2基因cDNA,全长4754 bp,编码区2001 bp.hSIM2基因有11个外显子,编码667个氨基酸.hSIM2蛋白包括bHLH,PAS和HST等功能区,这些功能区与鼠和果蝇的相应功能区高度同源。RT-PCR和Northern Blot杂交结果表明,hSIM2基因是一个多器官、多系统表达的基因,在胎儿时期与脑、肾脏和肌肉的发育过程,在成人杏仁核、尾状核、朕胝体、海马、全脑组织、黑质和下丘脑核以及肾、前列腺和胃等部位均有表达,hSIM2基因在胎儿肾脏具有不同的转录本。

散发性血友病A家系的分子遗传学研究

本文应有用Southern印迹杂交和PCR技术对6个散发性血友病A家系进行了限制性片段长度多态性分析,并结合凝血资料,确定了其中两个家系中的母亲和1名姐姐为女性携带者,另外4个家系亦与遗传具有相关性,这一结果为遗传咨询提供了信息。

应用聚合酶链式反应快速检测嗜肺军团杆菌

嗜肺军团杆菌(LP)所引起的肺炎病死率高,易暴发流行,早期病原诊断困难。本研究应用聚合酶链式反应技术对嗜肺军团杆菌血清1、3、5型中巨噬细胞感染潜能基因(mip基因)的部分编码区域进行特异性扩增,经琼脂糖凝胶电泳、溴乙锭染色检测扩增产物。结果3型LP均出现650bp特异性阳性条带。检测灵敏度为80ng,本研究结果对嗜肺军团杆菌肺炎的早期诊断、及时治疗、降低病死率及控制暴发流行有重要意义。

人肝癌中的抑癌基因

杂合性丢失分析资料显示，在肝癌的发生和演进过程中涉及多种抑癌基因失活。国内外研究表明，肝癌中存在抑癌基因ＴＰ５３突变失活，ＴＰ５３基因突变表现特异性和病因相关性。作者通过检查１５个高度多态的微卫星标记，进行染色体缺失精细定位，将肝癌中染色体１３ｑ缺失的最小重叠区域限定于１３ｑ１４，强烈提示ＲＢ１基因为染色体缺失的靶基因；进一步应用ＰＣＲ－ＳＳＣＰ分析和ＤＮＡ测序发现２例发生染色体１３ｑ臂内缺失的肝癌中有ＲＢ１基因微小缺失，其结果是无法编码有功能的蛋白产物，从而找到肝癌中ＲＢ１基因失活的可靠证据；免疫组织化学染色表明，５２％的肝癌组织中ｐ１１０ＲＢ１蛋白丢失且与染色体１３ｑ杂合性丢失高度相关。因此，确定ＲＢ１基因为肝癌的又一重要抑癌基因。

散发性血友病A家族的BclI位点RFLP连锁分析

本文应用 Southern 印迹杂交和 PCR 扩增技术对6个散发性血友病 A 家系进行了限制性片段长度多态性分析,并结合凝血资料,确定了其中二个家系中的母亲和一个姐姐为女性携带者,这一结果为遗传咨询和产前诊断提供了信息。

应用PCR-SSCP法检测人第ⅢⅤ因子内单个碱基置换

人第Ⅷ因子基因内含子18处BclⅠ多态由T→A单个碱基置换所致。BclⅠ(+)时含TGATCA,BcⅡ(-)时含TGAACA。通过聚合酶链反应扩增含有BClⅠ多态点的142bp DNA片段,变性后进行单链构象多态分析,BclⅠ(+)等位基因片段和BclⅠ(-)等位基因片段的单链带型明显不同。

PCR产物真核TA克隆法构建基因表达重组体

ＰＣＲ产物真核ＴＡ克隆法构建基因表达重组体金春元张学王筠孙开来用ＰＣＲ方法扩增目的基因并与载体ＤＮＡ连接是目前常用的ＤＮＡ克隆技术之一。一般多用限制性内切酶将ＰＣＲ产物与载体ＤＮＡ分子特异切割，重新连接，组装成一个重组体。此项技术要求对ＰＣＲ产物进行...