白藜芦醇在人牙髓干细胞成牙本质向分化中的调控机制研究

目的:探讨白藜芦醇是否通过上调沉默信息调节因子1(silent information regulator 1,SIRT1)的表达并激活β-catenin信号通路,从而促进人牙髓干细胞(DPSCs)成牙本质向分化。方法:不同浓度白藜芦醇(0、10、15、20、50μmol/L)作用于DPSCs 7天和14天后,利用CCK-8法检测细胞增殖活性。在15μmol/L白藜芦醇作用下,成牙本质向分化诱导培养DPSCs 7天后,检测碱性磷酸酶(ALP)活性;采用实时定量反转录PCR(qRT-PCR)检测Runt相关转录因子2(Runx2)、牙本质涎磷蛋白(DSPP)和牙本质基质蛋白1(DMP-1)的mRNA表达情况;采用蛋白质免疫印迹法(Western blot)检测DPSCs分化诱导不同时间(0、3、5、7、14天)后SIRT1的蛋白表达情况。15μmol/L白藜芦醇作用下分化诱导培养DPSCs 7天后,检测SIRT1和活化β连环蛋白(β-catenin)表达水平。采用GraphPad Prism 9软件包对数据进行统计学分析。结果:15μmol/L白藜芦醇对DPSCs 7天和14天的增殖活性无明显影响;15μmol/L白藜芦醇促进DPSCs的成牙本质向分化,上调Runx2、DSPP和DMP-1的mRNA表达。DPSCs分化诱导7天时,SIRT1蛋白表达量最大;15μmol/L白藜芦醇作用下分化诱导DPSCs 7天时,SIRT1及活化β-catenin蛋白表达显著增加。结论:白藜芦醇通过上调SIRT1蛋白表达并激活β-catenin信号通路,促进人DPSCs成牙本质向分化。

动态导航引导下的下颌第一磨牙根尖手术1例

对于根管治疗后仍持续存在的根尖周炎症,当非手术再治疗不可行时,显微根尖手术(Endodontic microsurgery,EMS)是一种可靠的治疗方法[1]。而当患牙颊侧皮质骨较厚时,精准定位根尖以获得尽可能微创的入路成为困扰临床医生的一大难题[2]。

牙髓卟啉单胞菌内毒素对成骨细胞分化的抑制作用

目的 :研究牙髓卟啉单胞菌脂多糖(P.e-LPS)对成骨细胞分化的影响,探讨P.e-LPS在根尖周骨吸收疾病中的致病机制。方法:厌氧条件下培养P.e,应用热酚水法提取P.e-LPS,采用凝胶鲎试剂法对所提取的LPS进行定性分析。应用成骨细胞分化培养基(50μg/mL抗坏血酸、6 mmol/Lβ甘油磷酸钠)诱导前成骨细胞系MC3T3-E1向成骨细胞分化。实时定量PCR(RT-PCR)检测成骨分化基因Distal-less homeobox 5(DLX5)、Runt-related transcription factor2(Runx2)、Osterix、骨涎蛋白(bone sialoprotein,BSP)、骨钙素(osteocalcin,OCN)以及胶原(Collagen)的表达。碱性磷酸酶(ALP)活性测定、茜素红染色以及Von Kossa染色检测成骨细胞的矿化水平。应用siRNA转染,沉默P.e-LPS的受体Toll-like receptor-4(TLR-4)在成骨细胞中的表达。采用SPSS 11.0软件包对数据进行统计学分析。结果 :P.e-LPS(10μg/mL)作用于MC3T3-E1细胞3 d,与对照组相比,成骨分化基因DLX5、Runx2、Osterix、OCN、BSP、胶原的mRNA表达水平显著下降(P<0.05)。P.e-LPS(10μg/mL)分别作用于MC3T3-E1细胞7 d和14 d,ALP活性及茜素红染色强度下降。P.e-LPS分别作用于siRNA-TLR-4转染组及对照组7、14、21 d,与对照组相比,si-TLR-4组细胞的成骨分化基因表达水平、ALP活性、茜素红染色强度以及Von Kossa染色强度均显著高于对照组(P<0.05)。结论:P.e-LPS通过受体TLR-4抑制成骨细胞的分化,从而参与根尖周病变的骨吸收过程。

miR-138-5p在微炎症环境中对人牙髓干细胞成牙本质向分化作用研究

目的 研究miR-138-5p在微炎症环境对人牙髓干细胞(human dental pulp stem cells,hDPSCs)成牙本质向分化过程中的作用。方法 研究于2021年5月至2022年3月在中国医科大学口腔医学院中心实验室进行。原代培养并分离细胞,通过流式细胞术检测细胞表面间充质干细胞表面标记分子CD29、CD105、CD146及造血干细胞表面标记分子CD14、CD45的细胞阳性率,碱性磷酸酶(alkaline phosphatase,ALP)染色鉴定是否为hDPSCs及其成骨分化能力。根据ALP染色结果确定提高h DPSCs ALP活性的脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)有效质量浓度,按照hDPSCs培养条件的不同分为生长培养液(GM)组(仅使用GM培养)、成牙本质向分化诱导培养液(OM)组(仅使用OM培养)、OM+LPS组(使用含有效质量浓度LPS的OM培养)。采用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测各组hDPSCs白细胞介素-6(interleukin-6,IL-6)、肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)、成牙本质向分化相关指标[牙本质涎磷蛋白(dentin sialophosphoprotein,DSPP)、牙本质基质蛋白1(dentin matrix protein 1,DMP1)]及miR-138-5p的表达差异。将上述3组分别分为敲减miRNA阴性对照小干扰RNA(以下简称“NC”)亚组及敲减miR-138-5p小干扰RNA(以下简称“i-138”)亚组,通过qRT-PCR检测各亚组的成牙本质向分化相关指标,以及通过ALP染色检测敲减miR-138-5p后对微炎症环境中hDPSCs成牙本质向分化的影响。结果 分离出的原代细胞中表达间充质干细胞表面标记分子CD29、CD105的细胞阳性率超过95%,表达CD146的细胞阳性率超过30%,而表达造血干细胞表面标记分子CD14、CD45的细胞阳性率低于2%,且OM培养下细胞的ALP染色强于GM。ALP染色结果显示,含有0.01μg/mL质量浓度LPS的OM能有效促进hDPSCs成牙本质向分化。qRTPCR结果显示,OM+LPS组IL-6和TNF-α相对表达量均高于OM组,差异均有统计学意义(均P <0.001)。细胞培养7 d后,OM组DSPP、miR-138-5p相对表达量均显著高于GM组;细胞培养4、7 d后,OM组DMP1相对表达量显著高于GM组;细胞培养1、4、7 d后,OM+LPS组DSPP与DMP1相对表达量均显著高于OM组;细胞培养4、7 d后,OM+LPS组miR-138-5p相对表达量显著高于OM组,差异均有统计学意义(均P <0.001)。敲减miR-138-5p后,i-138 OM组和i-138 OM+LPS组分别与NC OM组和NC OM+LPS组相比,miR-138-5p、DSPP、DMP1相对表达量均减少,差异均有统计学意义(均P <0.001),且ALP染色强度均减弱。结论 微炎症环境可促进hDPSCs的成牙本质向分化,miR-138-5p可能在此过程中对h DPSCs成牙本质向分化起促进作用。

复合树脂修复体边缘微渗漏检测方法研究进展

复合树脂是窝洞充填最常用的材料,但其固化过程中发生聚合收缩常导致复合树脂修复体和牙体组织界面产生微渗漏,影响充填疗效。本文回顾了复合树脂修复体边缘微渗漏检测方法的相关研究,分析比较了各种检测方法的优点和局限性,总结归纳了各种检测方法的最新应用情况,以期为复合树脂充填疗效的评估提供科学依据。

白藜芦醇通过上调SOCS-3蛋白抑制脂多糖诱导的成骨细胞表达MIP-2

目的:探讨白藜芦醇是否依赖细胞因子信号转导抑制因子3(suppressor of cytokine signaling-3,SOCS-3)蛋白发挥对牙髓卟啉单胞菌(Porphyromonas endodontalis,P.e)脂多糖(lipopolysaccharides, LPS)诱导成骨细胞产生巨噬细胞炎性蛋白2(macrophage inflammatory protein-2,MIP-2) mRNA的抑制作用。方法:以不同浓度的白藜芦醇(0、5、10和20μmol/L)诱导MC3T3-El细胞和以20μmol/L白藜芦醇作用于细胞不同时间(0、10、30、60、120和180 min)后,采用蛋白免疫印迹法(Western blot)检测SOCS-3蛋白的表达。SOCS-3的si RNA(si-SOCS-3)和对照si RNA(si-control)转染成骨细胞后,以实时反转录聚合酶链反应(RT-PCR)和Western印迹法检测SOCS-3沉默效率;在有或无白藜芦醇预处理转染细胞1 h后,用20μg/mL P.e-LPS刺激MC3T3-E1细胞24 h,实时RT-PCR检测MIP-2 mRNA的变化。采用SPSS 13.0软件包对结果进行单因素方差分析和Dunnett t检验。结果:不同浓度白藜芦醇诱导MC3T3-El表达SOCS-3蛋白具有剂量依赖性;在所观察的180 min内,20μmol/L白藜芦醇作用成骨细胞60 min时,SOCS-3蛋白表达量最大。si-SOCS-3对SOCS-3 mRNA的沉默效率是63.7%,转染si-SOCS-3后,增加LPS诱导成骨细胞产生MIP-2 mRNA,并且削弱白藜芦醇对MIP-2 mRNA表达的抑制作用。结论:白藜芦醇通过上调SOCS-3蛋白,抑制P.e-LPS诱导成骨细胞表达的MIP-2 mRNA。

对融合牙的分类及其治疗的认识

融合牙(fused teeth)是一种牙体形态异常的表现, 乳牙和恒牙均可发生, 融合牙不仅容易引起牙列拥挤、咬合异常和美观问题, 而且患牙还易罹患龋病、牙髓病、根尖周病和牙周病。乳牙融合牙可导致继承恒牙发生异常。融合牙的治疗常涉及牙体牙髓科、牙周科、口腔颌面外科、修复科和正畸科等多学科合作。本文对融合牙的病因、分类、临床表现和治疗方法进行阐述, 以期为融合牙的临床治疗管理提供参考。

组蛋白去甲基化酶Jmjd3对牙髓干细胞成牙本质向分化的影响研究

目的研究组蛋白去甲基化酶Jmjd3对牙髓干细胞(dental pulp stem cells,DPSCs)成牙本质向分化的影响。方法原代分离培养DPSCs,用流式细胞术和茜素红染色鉴定DPSCs。体外诱导DPSCs成牙本质向分化不同时间(0、3、5、7、14 d),qRT-PCR检测Jmjd3及成牙本质细胞标志物牙本质涎磷蛋白(dentin sialophosphoprotein,DSPP)、牙本质基质蛋白1(dentin matrix protein1,DMP1)的表达情况。用不同浓度(0、1、10μmol/L)的Jmjd3抑制剂GSK-J4处理DPSCs 14 d,q RT-PCR检测DSPP、DMP1的表达情况。结果原代培养的DPSCs表达间充质干细胞表面标记物CD44、CD29、CD146,体外诱导培养具有成骨分化潜能。DPSCs成牙本质向分化过程中,Jmjd3、DSPP、DMP1表达水平均上调(P<0.05),且可能具有时间依赖性。10μmol/L GSK-J4处理DPSCs可明显抑制DSPP、DMP1的表达(P<0.05)。结论Jmjd3在DPSCs成牙本质向分化过程中发挥正调节作用,且与其去甲基化酶活性相关。

不同厚度氮化钛涂层对镍钛器械显微硬度及切削性能的影响

目的:探讨不同厚度氮化钛涂层对镍钛根管器械显微硬度及切削性能的影响,为提高临床根管预备效率提供依据。方法:选取15个KV4型镍钛合金片和60支25#KV4型机用镍钛锉,随机分为5组:未镀膜组、镀膜1 h组、镀膜2 h组、镀膜3 h组和镀膜4 h组。通过控制沉积时间,制备不同厚度的镍钛氮化钛涂层,扫描电镜(SEM)下测量每组的膜层厚度。采用维氏硬度计测定各组镍钛合金片的显微硬度。选取60个透明树脂模块,每支镍钛锉预备1个树脂模块,通过重量损失法测量每组的切削性能。SEM下观察5组镍钛锉预备前、后的表面形貌。采用SPSS 22.0软件包对实验数据进行单因素方差分析。结果:随着氮化钛涂层厚度增加,镍钛合金的显微硬度逐渐增大(P<0.05)。随着氮化钛涂层厚度增加,镍钛器械的切削性能提高;涂层厚度为860 nm时,切削性能最大(P<0.05)。镀膜组器械根管预备前、后的表面形貌均优于未镀膜组。结论:氮化钛涂层的厚度影响镍钛根管器械的显微硬度和切削性能,厚度增加,硬度和切削能力增强。厚度过大时,会降低其切削性能。

锥形束CT导航下应用显微超声技术治疗牙髓钙化1例报告

牙髓钙化作为牙髓组织对刺激的一种反应,使得根管口定位困难,根管难以疏通,增加了根管预备的难度,从而影响根管治疗的成功率。随着显微超声技术的逐步推广,钙化根管的疏通率大幅度提高。中国医科大学附属口腔医院牙体牙髓病科收治1例锥形束CT(cone-beam CT,CBCT)导航下应用显微超声技术治疗牙髓钙化的病例,现报道如下。1病例资料1.1病史与检查患者女,23岁,因"下后牙咬合不适1月余"于外院就诊,诊断为36慢性根尖周炎,经检查后怀疑牙髓钙化。

累及种植体的根尖周病变显微根尖外科手术再治疗1例报告

根管治疗和再治疗是目前治疗根尖周病的主要方法,但由于根管的感染位置不同,仍有部分患牙的根尖周病变无法治愈。随着显微、超声技术的推广及生物相容性材料的发展,使用显微根尖外科手术治疗根尖周病的成功率显著提高。中国医科大学附属口腔医院牙体牙髓病科采用显微根尖外科手术再治疗1例累及种植体的根尖周病变的病例,现报道如下。

显微超声结合套管技术治疗下颌第一磨牙根管内分离器械1例报告

根管内发生器械分离会影响根管系统后续的成形、清理和充填,最终影响根管治疗的效果。若可在舒适、有效、微创的前提下完全取出分离器械,重新获得根管通路则最为理想。取出分离器械的方法有套管法、超声法、电化学溶解等,牙科显微镜的使用对治疗成功率有显著提升"。本文报道1例在牙科显微镜下使用ET25超声工作尖(赛特力,德国)结合显微套管(苏州心灯医疗器械有限公司)。

牙根内吸收的病因及致病机制

牙根内吸收是由破牙本质细胞活动引起的根管内牙本质缺失的病理性过程。由于其发病具有隐匿性,发现时往往已形成较大病损。前期牙本质层受损是始发因素,持续的牙髓炎症刺激是促进因素。牙外伤、牙髓的慢性炎症、活髓切断术和牙再植术等多种因素均可诱导牙根内吸收的发生。本文针对牙根内吸收的病因和致病机制进行阐述,以期为牙根内吸收的早期阻断治疗提供参考。

感染根管的根管治疗及氧化锆嵌体修复1例报告

造成牙髓病和根尖周病的根本原因是根管内以厌氧菌为主的多种细菌的混合感染,在根管机械和化学预备过程中要重点关注根尖1/3区及根尖孔外生物膜的清除是否彻底。根管治疗后的牙齿应及时行冠部修复实现'冠根一体化',最大程度延长患牙的临床寿命。1病例资料1.1病史与检查患者女,44岁,2个月前因左上后牙钝痛于外院就诊行树脂充填,自述近日进食时疼痛加重,不敢咀嚼,遂于2015-07-16来中国医科大学附属口腔医院牙体牙髓病科就诊。

CBCT诊断上颌第二磨牙双腭根2例报告并文献复习

上颌第二磨牙牙根及根管系统变异较多，结构复杂、通常为近中颊根、远中颊根和腭根3个；少数牙近中或远中颊根与腭根融合，或近、远中颊根融合而成2个牙根；极少数为近、远中颊根和腭根相互融合；发生4个牙根（2个颊根、2个腭根）的情况相当少见（0．28％～1．4％）。本文报道2例上颌第二磨牙为腭侧双根的病例，其中1例近颊根双根管，为4根5根管。

应用根尖屏障术治疗根尖内外吸收的上颌中切牙1例报告

根尖外吸收可由外伤、正畸治疗、牙髓病变、根尖周病变及肿瘤侵袭生长等原因诱发[1],并常同时伴有根尖内吸收。上颌中切牙是根尖外吸收最易发生的牙位[2]。由于根尖内外吸收,患牙根尖孔敞开,如何清除病变组织、严密充填根管成为该类患牙根管治疗的难点。

大块充填树脂的临床应用研究进展

大块充填树脂因具有良好的聚合收缩率及机械性能,广泛应用于口腔医学各领域。本文通过总结大块充填树脂的性能,比较大块充填树脂与传统树脂的差异,探讨大块充填树脂在口腔各学科中的应用,以期为临床工作提供更多选择。

根面龋的预防与治疗

随着我国人口老龄化加剧,根面龋的发生率逐年升高。与冠部龋坏不同,根面龋多发生于老年患者牙龈退缩后暴露的根面上,主要累及根部牙骨质和牙本质,在发病特点、临床表征、诊断和防治上都有其特异性。本文从根面龋的病因和危险因素、病理和临床表现、分类、三级预防等方面进行阐述,以期为根面龋的临床防治提供参考。

镍钛器械分离的影响因素及防治策略

器械分离是根管治疗过程中最棘手的并发症之一。由于分离的器械会妨碍根管系统的清理和成形,进而影响根管治疗的预后,因此关于镍钛器械分离的问题一直都是临床讨论的热点。文章就镍钛器械分离的影响因素及防治策略做一介绍。

四种自酸蚀粘接剂的粘接强度耐久性实验研究

目的评价4种自酸蚀粘接剂的粘接强度耐久性。方法选择2012年1—6月就诊于中国医科大学附属口腔医院口腔外科的患者因非龋源性原因拔除的无龋第三磨牙80颗,采用石膏打磨机去除牙釉质以充分暴露牙本质,600目砂纸在水环境中研磨去除表面玷污层。采用随机抽签的原则,每4颗牙为一组,共分为20组,在其表面分别涂布4种临床上使用的自酸蚀粘接剂[Easy Bond(EB)、G-Bond plus(GBp)、Clearfil Mega Bond(MB)、Clearfil Protect Bond(PB)]。每种粘接剂分为5组对应各个时间点(24 h、3个月、6个月、12个月和24个月)。粘接剂的使用严格按照各自产品说明书进行操作。之后,在其表面堆砌约5 mm厚的复合树脂。将其置于无菌双蒸水中保存在37℃恒温箱内,分别于24 h和3、6、12、24个月后将其切割成截面为1.0 mm2的长柱状后进行微拉伸测试,比较4种粘接剂在不同时间点的粘接强度耐久性。结果一步自酸蚀粘接剂EB和GBp在24个月后的粘接强度较24 h的粘接强度显著降低(P<0.05)。二步自酸蚀粘接剂MB和PB在24个月后的粘接强度与24 h的相比差异无统计学意义(P>0.05)。结论含有亲水性成分甲基丙烯酸羟乙酯(HEMA)的一步自酸蚀粘接剂24 h后的粘接力强于不含HEMA的粘接剂。与一步自酸蚀粘接剂相比,二步自酸蚀粘接剂在耐久性测试中表现更为稳定。