白藜芦醇对牙髓卟啉单胞菌脂多糖诱导成骨细胞产生MIP-2的影响

目的:研究牙髓卟啉单胞菌(Porphyromonas endodontalis,P.e)脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)影响成骨细胞产生巨噬细胞炎性蛋白2(macrophage inflammatory protein-2,MIP-2)mRNA和蛋白分泌的作用,以及白藜芦醇对P.eLPS诱导分泌MIP-2产生的抑制作用。方法:以不同剂量的P.e-LPS (0～50 mg/L)作用于MC3T3-El细胞,并以20 mg/L P.e-LPS作用MC3T3-El细胞不同时间(0～48 h),采用实时反转录PCR (real-time RT-PCR)和酶联免疫吸附试验(ELISA)检测MIP-2 mRNA和蛋白的表达;采用ELISA方法检测白藜芦醇对20 mg/L P.e-LPS刺激MC3T3-El细胞24 h后MIP-2蛋白表达的影响。采用SPSS 13.0软件包对结果进行单因素方差分析和Dunnett t检验。结果:当不同剂量P.e-LPS (0～50 mg/L)刺激MC3T3-El细胞时,MIP-2 mRNA的表达和蛋白的分泌随剂量的提高而升高;其中,蛋白表达从(41.86±2.49)ng/L升高到(3126.74±158.30)ng/L,差异显著(P<0.05)。在观察时间内(0～48 h),20 mg/L P.e-LPS刺激MC3T3-El细胞后,MIP-2 mRNA的表达和蛋白的分泌随时间的延长而增高,48 h时蛋白表达量最高,为(2102.55±123.27)ng/L(P<0.01)。10 mol/L白藜芦醇预处理细胞1 h,可抑制P.e-LPS诱导的MIP-2蛋白的表达,蛋白水平从(1805.33±67.54)ng/L降低到(813.82±47.21)ng/L,差异显著(P<0.01)。结论:P.e-LPS可诱导成骨细胞表达和分泌MIP-2,白藜芦醇对P.e-LPS诱导的MIP-2蛋白分泌发挥抑制作用。

Wnt5a在慢性根尖周炎病损中的表达及临床意义

目的 :检测慢性根尖周炎根尖病损区Wnt5a的水平与细胞定位,探讨Wnt5a与炎症细胞浸润程度的关系,以及Wnt5a在慢性根尖周炎发展中的作用及意义。方法:选取10例慢性根尖周炎牙作为实验组,根据根尖区组织的H-E染色,依炎症细胞浸润程度将病例组分为轻中度组、重度组。5例因正畸需要而拔除的健康牙作为对照组。采用实时定量PCR(real-time PCR,RT-PCR)从m RNA水平检测样本Wnt5a的表达;免疫组织化学法检测样本中Wnt5a蛋白的表达,应用图像分析软件检测Wnt5a蛋白表达水平,分析Wnt5a表达高低与炎症程度的关系。采用SPSS13.0软件包对数据进行统计学分析。结果:Wnt5a在实验组与对照组均有表达,实验组中Wnt5a m RNA表达水平显著高于对照组(P<0.05)。免疫组织化学结果显示,重度炎症组Wnt5a的表达水平显著高于对照组(P<0.01);轻中度组Wnt5a的表达水平显著高于对照组(P<0.05);重度炎症组中Wnt5a的表达水平显著高于轻中度炎症组(P<0.05)。结论:Wnt5a与慢性根尖周炎的炎症程度相关,可能参与了病变的始动过程,推测Wnt5a在慢性根尖周炎的发生、发展中起着一定作用。