内皮细胞生长因子的分离纯化及生物活性的研究

介绍了内皮细胞生长因子(ECGF)一种分离纯化的方法,经硫酸铵分级盐析和肝素亲和层析可得到高纯度的ECGF。经SDS—PAGE电泳分析其分子量为17000,等电点为4.8。肝素与ECGF的生物活性密切相关,并可使已失活的(ECGF)恢复70%～80%的生物活性。

硫杂脯氨酸衍生物对蛋白激酶C活性的影响

用硫杂脯氨酸衍生物处理BEL—7402细胞72h后,该细胞株形态发生明显变化。同时发现该类药物对蛋白激酶C的活性存在明显的反竞争性抑制。提示硫杂脯氨酸衍生物可能通过抑制蛋白激酶C的活性来促使肿瘤细胞逆转。

甲胎蛋白异质体对原发性肝细胞癌的诊断价值

通过扁豆凝集素亲和双向免疫电泳,对47例原发性肝细胞癌(PHC),40例良性肝病,6例转移性肝癌血清AFP异质体进行研究,发现PHC患者血清扁豆凝集素结合型AFP为43.298±22.4%,明显高于良性肝病患者(10.35±17.053%)及转移性肝癌患者(4.167±6.646%)。以该值大于25%为诊断肝癌标准,则阳性率为82.98%特异性为90%。在14例AFP为阴性的PHC患者中,有10例该值大于25%,其阳性率为71.43%。对PHC患者行肝动脉栓塞术后其扁豆凝集素结合型AFP降低,故可用其做为观察疗效的指标。

几种新的肿瘤标志物对原发性肝癌的诊断价值

本文通过47例原发性肝癌(PHC)、40例良性肝病、6例胃癌肝转移患者及正常对照30例,同时检测血清甲胎蛋白(AFP)异质体、唾液酸(SA)和5′核苷酸磷酸二脂酶同工酶(5′NPD),并与血清AFP值对照,结果:AFP异质体、SA和5′NPD对PHC的敏感性分别是82.98%、78.72%和87.23%;而特异性分别是90.0%、82.5%和75.0%。三者在APP阴性的PHC中诊断阳性率分别为78.26%,73.91%和86.96%。如4项指标联合检测可使PHC的诊断敏感性达到93.62%,特异性增加到90%。

E.coli中alKA基因突变启动子及体外转录的研究

用人工突变的方法获得aIKA基因启动子区的突变体,以该突变的启动子DNA为模板进行体外转录试验及β-半乳糖苷酶活性测定。观察到测得的β-半乳糖苷酶活性与体外转录产生的alKA mRNA相平行。

5′-核苷酸磷酸二酯酶同工酶鉴别良恶性腹水的诊断价值

对37例恶性腹水和35例良性腹水测定5′-NPD同工酶,结果表明:恶性腹水中5′-NPI)-Ⅴ和Ⅵ的阳性率明显高于良性腹水(P<0.01)。特异性分别为80%和74.3%;腹水5′-NPD-Ⅴ与血清相关性γ=0.7804(P>0.05)。提示:腹水5′-NPD同工酶检测有助于良恶性腹水鉴别诊断。在疑恶性腹水时有必要进行腹水5′-NPD同工酶检测。

Mg^(2+)和Ca^(2+)对兔心肌单离腺苷酸环化酶的调节机制

用兔心肌可溶性肌纤维膜和层析分离的腺苷酸环化酶(AC)组分制备人工蛋白脂质体,并观察Mg^(2+)和Ca^(2+)对上述两种蛋白脂质体中AC的影响。结果表明,Mg^(2+)激活AC在可溶性肌纤维膜的蛋白脂质体中有两种不同的亲和常数,分别为0.14mmol/L和1.1mmol/L。其中高亲和常数在AC组分的调节部位,低亲和常数是Mg^(2+)和GTP结合蛋白质的结合部位。Ca^(2+)抑制AC的活性,它的抑制常数为30μmol/L。Mg^(2+)和Ca^(2+)对AC的作用是竞争性的。

氢过氧化亚油酸与硒对人内皮细胞的影响

以氢过氧化亚油酸作为脂质过氧化物,亚硒酸钠作为抗氧剂,作用于培养的人脐带静脉内皮细胞,探讨脂质过氧化与抗氧化作用对细胞结构和功能的影响。结果表明,氢过氧化亚油酸能引起细胞收缩、生物膜系统损伤及前列环素合成减少;硒可使细胞脂质过氧化损伤程度减轻。提示:硒可能通过阻止内皮细胞脂质过氧化反应,起抗动脉粥样硬化病变发生的作用。

血小板生长因子在NIH3T3成纤维细胞和MT3转化细胞应答中的作用

血小板生长因子(PDGF)通过促进细胞外Ca^(2+)内流,增加细胞内Ca^(2+)浓度,但在亲代NIH3T3成纤维细胞和转化的MT3细胞中,却表现出不同的作用。在亲代NIH3T3成纤维细胞中,PDGF能够抑制舒缓激肤介导的细胞内Ca^(2+)浓度增加,未能见到细胞内Ca^(2+)波动现象;而在转化的MT3细胞中,PDGF丧失了对舒缓激肽介导的细胞内Ca^(2+)浓度增加的抑制作用,常常引起细胞内Ca^(2+)波动现象。对于DNA的合成,PDGF在两种细胞中,也表现出有时程的差异。

胰岛素受体蛋白质水解活性的研究

胰岛素与受体结合后可引起两方面的效应:①引起受体β亚基自身磷酸化,从而激活β亚基的酪氨酸蛋白激酶活性,进而引起一系列细胞内的反应。②生成低分子介体,此介体可引起丙酮酸脱氢酶脱磷酸而激活。但是,关于介体的来源、化学本质及其存在尚有争论。

转化前后K-562细胞胰岛素受体酪氨酸蛋白激酶活性及内源性底物的研究

对丁酸钠转化前后的人红白血病细胞林K-562的表面胰岛素受体数量、胰岛素受体酪氨酸蛋白激酶活性及细胞内源性底物进行了研究。结果表明:丁酸钠转化后的K-562细胞酪氨酸蛋白激酶活性降低,胰岛素受体数量减少,K-562细胞酪氨酸蛋白激酶的内源性底物,分子量为67KD—底物蛋白在转化后消失。说明该底物及胰岛素受体酪氨酸蛋白激酶在胰岛素调控的K-562细胞的增殖中起重要作用。

温度敏感型SecY_(100)的转化膜在蛋白质转位中的作用特点

SecY基因产物是一个整合在膜上的蛋白,从基因角度它已被鉴定为E·Coli蛋白转位机制中主要化合物之一。我们检测了温度敏感型突变株SecY_(100)转化膜的转位活性。发现生长在允许温度下的突变株SecY_(100)的膜具有部分转位活性。若在40℃下预保温75 min则转位活性明显减少,与SecY_(24)的膜相比较,在非允许温度下,SecY_(100)的膜远不如SecY_(24)的膜对排出抑制敏感。我们的结果对SecY在转位过程中的基本作用提供了生化证据。实验表明,体外部分热失活的Secy的膜不可能经过重新保温在允许温度下而恢复其原来的转化活性。

α_1-抗胰蛋白酶等对修饰胰蛋白酶的作用

用葡聚糖T2000修饰的胰蛋白酶,对α_1-抗胰蛋白酶的抑制作用、对尿素的变性作用以及对胃蛋白酶的消化作用的耐受力均高于天然胰蛋白酶。

心肌梗塞患者不同时期红细胞磷脂的变化

本文测定了52例不同时期心肌梗塞患者的红细胞总磷脂含量。对其中30例患者测定了红细胞磷脂主要组分含量。结果表明各期心肌梗塞患者红细胞总磷脂、磷脂酰胆碱、磷脂酰乙醇胺含量均较正常人明显降低(P<0.05或0.01);急性心肌梗塞患者磷脂酰丝氨酸含量较正常人明显降低(P<0.05);神经鞘磷脂含量在急性心肌梗塞7天之内明显增高。上述改变说明心肌梗塞患者往往存在红细胞磷脂代谢紊乱,这对心肌缺血的加重可能产生了不良影响。