趋化因子受体CXCR4在胃肠道肿瘤组织及细胞系中的异常表达

目的:检测CXCR4在胃肠道肿瘤中的表达状态,探讨CXCR4在胃肠道肿瘤发病中的作用.方法:采用即时定量PCR(Real-time PCR)检测胃肠道肿瘤标本中CXCR4的表达.采用逆转录PCR(RT-PCR)和Western blot检测CXCR4在胃肠道肿瘤细胞系中的表达.结果:CXCR4mRNA在24例结直肠癌组织标本的表达水平显著高于其配对的癌旁正常组织(P<0.001).CXCR4mRNA在30例胃癌组织标本中的表达水平亦显著高于其配对的癌旁正常组织(P<0.001).CXCR4mRNA和蛋白质在结肠癌细胞系HT-29和SW-480及胃癌细胞系SGC-7901和AGS中均存在明显表达CXCR4表达与胃癌患者分期及淋巴结转移状态具有相关性(P=0.01,0.02).结论:CXCR4在胃肠道肿瘤中存在过度表达,其参与了胃肠道肿瘤的发病过程.

人类发育与遗传学整合课程教学体会

人类发育与遗传学整合课程体系的建立是课程改革的重要部分。通过整合教学内容,稳定教学队伍、开展教材建设、实施PBL(Problem-based learning)教学模式等进一步完善了整合课程体系,确立了整合+PBL教学模式,并通过教学实践证明切实可行,在提高教学效果、培养学生能力上发挥一定的作用。

神经干细胞向胆碱能神经元定向分化的探讨研究

目的通过促分化因子的调节作用对神经干细胞向胆碱能神经元的定向分化进行探讨研究。方法采用细胞培养技术、免疫细胞化学方法观察新生大鼠皮层神经干细胞向胆碱能神经元定向分化的时空变化。结果新生大鼠皮层神经干细胞去除丝裂原后在促分化因子的作用下开始进行分化,至第7天可分化为成熟的胆碱能神经元,AchE反应明显阳性。在胆碱能神经元逐渐成熟的分化过程中AchE在细胞内的的阳性反应部位发生了变化,由开始时的核膜极其周围分布变化为成熟时的细胞质内分布。结论皮层神经干细胞在促分化因子的作用下可定向分化为胆碱能神经元,且AchE阳性反应具有时空变化特性。

信号转导和转录激活因子6在溃疡性结肠炎中的表达

目的:探讨信号转导和转录激活因子6(STAT6)在溃疡性结肠炎(UC)中的表达和作用.方法:对50例经过结肠镜和病理检查证实的UC患者和50例正常对照者结肠黏膜病变,采用免疫组化方法进行STAT6和磷酸化的STAT6(pSTAT6)的检测.结果:UC黏膜组织中STAT6免疫组化反应产物主要定位于细胞质,与对照组相比有显著性差异(P<0.05).pSTAT6免疫组化反应产物主要定位于细胞质和细胞核,与对照组相比亦有显著性差异(P<0.05).结论:STAT6在UC黏膜组织中表达上调,STAT6可能在UC的发病机制中起重要作用.

CK19和MC在肺癌患者胸水中的表达及意义

目的探讨CK19和MC在肺癌患者胸水中的诊断价值。方法应用免疫细胞化学方法(S-P)研究44例肺癌患者胸水中的癌细胞和26例肺良性疾病胸水中的反应性间皮细胞的表达。结果CK19在肺癌患者胸水中的阳性率95.5%(42/44)明显高于在良性胸水中的阳性率7.7%(2/26),差异非常显著(P<0.01);而MC在良性胸水中的阳性率96.2%(25/26)明显高于在肺癌患者胸水中的阳性率22.7%(10/44),差异也非常显著(P<0.01);当CK19和MC联合应用时为最佳选择,其敏感性和特异性分别高达100%和88.5%。结论CK19和MC对肺癌患者胸水中癌细胞的诊断及鉴别诊断具有重要的临床应用价值。

CBX7基因与膀胱癌转移的相关性及其对细胞侵袭能力影响

目的:探讨CBX7基因与膀胱癌转移的相关性及其过表达对膀胱癌细胞侵袭能力的影响。方法:应用荧光定量PCR检测膀胱癌组织中CBX7 mRNA的表达。构建CBX7真核表达载体pc DNA-CBX7,转染膀胱癌T24细胞,检测转染后CBX7蛋白的表达以及T24细胞的侵袭能力。结果:CBX7基因在膀胱癌组织中明显下调,而且侵袭性膀胱癌组织中CBX7的表达显著低于浅表性膀胱癌;pc DNA-CBX7转染后能够显著升高T24细胞CBX7的表达量;CBX7过表达的T24细胞穿透滤膜的数量明显减少。结论:CBX7基因与膀胱癌的转移相关,其过表达能够降低T24细胞的侵袭能力。

神经干细胞分化过程中微管蛋白表达变化的光电镜观察

目的对神经干细胞向神经元定向分化过程中微管蛋白的表达变化进行光、电镜观察研究。方法采用细胞培养技术、免疫荧光技术以及免疫电镜技术对神经干细胞向神经元定向分化过程中微管蛋白的表达变化进行观察。结果在神经干细胞向神经元定向分化的不同时期,存在微管蛋白的表达变化,在分化初期以核周附近分布明显,随神经元的成熟散在分布于胞质中及突起内,形成细网状,构成细胞骨架,维持细胞形态。结论在神经干细胞向神经元定向分化过程中伴随有微管蛋白的表达变化,随神经元的成熟而构成细胞骨架,维持细胞形态。

碱性成纤维细胞生长因子对新生大鼠缺氧缺血性脑损伤的保护作用

目的探讨碱性成纤维细胞生长因子（ ｂＦＧＦ）对新生大鼠缺氧缺血性脑损伤( ＨＩＢＤ）的保护作用。方法 将 ３２只 ７日龄Ｗｉｓｔａｒ大鼠分为４组：假手术组、ＨＩＢＤ组、 ｂＦＧＦ治疗组（分大剂量组１７．５ μｇ／ｋｇ和小剂量组１０ μｇ／ｋｇ），每组 ８只。后３组动物制成 ＨＩＢＤ模型，给予治疗组大鼠连续 ７ ｄ腹腔注射 ｂＦＧＦ， ＨＩＢＤ组腹腔注射等体积生理盐水作为对照。全部大鼠于术后１４ ｄ处死，对脑纹状体、皮质的光镜下结构、乙酰胆碱酯酶（ＡｃｈＥ）、酸性磷酸酶（ＡＣＰ）活性变化进行观察和比较。结果 新生大鼠 ＨＩＢＤ后皮质、纹状体有选择性神经元坏死及胶质细胞增生， ｂＦＧＦ治疗组上述病变明显减轻； ＨＩＢＤ后纹状体、皮质神经元 ＡｃｈＥ活性明显下降(－～＋）， ｂＦＧＦ组 ＡｃｈＥ活性（＋～＋＋）较ＨＩＢＤ组恢复快； ＨＩＢＤ后纹状体神经元 ＡＣＰ活性明显增高（＋＋＋）， ｂＦＧＦ组 ＡＣＰ活性（＋＋）变化程度小于ＨＩＢＤ组。但大、小剂量ｂＦＧＦ治疗组未见明显差异。结论 ｂＦＧＦ能通过影响受损神经元的酶物质代谢而加快ＨＩＢＤ新生大鼠神经元的修复。

神经干细胞定向分化过程中溶酶体表达变化的研究

目的对神经干细胞向神经元定向分化过程中溶酶体的表达变化进行观察研究。方法采用细胞培养技术、荧光免疫细胞化学技术以及光电镜酶细胞化学技术对神经干细胞向神经元定向分化过程中溶酶体的表达变化进行观察。结果在神经干细胞向神经元定向分化的过程中,随着细胞分化的不断成熟,溶酶体的表达亦发生着变化。分化初期主要以核周附近表达明显,至神经元分化成熟则散在分布于胞质中及突起内,且表现有圆形、线状两种形态。结论在神经干细胞向神经元定向分化过程中溶酶体发生表达分布的变化,说明其参与了细胞的代谢和细胞内物质的运输。

创伤后应激障碍综合征及其与海马-垂体-肾上腺轴的关系

介绍创伤后应激障碍综合征(PTSD)的基本特点及其与海马-垂体-肾上腺轴之间的关系。对PTSD患者的研究表明,海马内的皮质酮受体MR、GR是HPA轴调节的作用位点,它们在应激后引起的基因变化可能是PTSD发生的原因。通过对PTSD的动物模型———SPS模型的研究发现,海马和杏仁核的突触可塑性及杏仁核MAPK磷酸化水平的降低可能是造成PTSD患者出现众多精神症状的原因。

应用硒化锌金属自显影技术显示含锌神经元胞体的方法

应用金属自显影技术显示神经系统内的含锌神经元胞体。

神经干细胞分化过程中溶酶体与微管蛋白相关性研究

目的探讨神经干细胞向神经元定向分化过程中溶酶体和微管蛋白(β-tublin)的相关性。方法采用细胞培养技术、荧光免疫细胞化学技术以及共焦激光扫描显微镜技术对神经干细胞向神经元定向分化过程中溶酶体和微管蛋白的分布变化进行观察。结果在神经干细胞向神经元定向分化的不同时期,存在着溶酶体与微管蛋白的分布变化,CLSM扫描显示两者在分化初期以核周附近分布明显,随神经元的成熟散在分布于胞质中及突起内。结论在神经干细胞向神经元定向分化过程中溶酶体与微管蛋白关系密切,共同参与细胞内物质的运输。

法乐四联症心肌纤维结构变化与心功能关系研究

目的 探讨法乐四联症心肌纤维肥大的程度对心功能与术后恢复的影响。方法 对 80例法乐四联症患者右室流出道心肌组织切片改变观察及心肌纤维直径测定 ,结合临床术前彩超测定心功能参数以及右心导管测定参数进行分析。结果 心肌纤维肥大程度与心功能指标有一定的关系。一部分四联症病例心肌纤维发生增生肥大 ,肥大的程度对射血分数无影响 (P >0 0 5 ) ,但与心肌每搏量和年龄有十分显著的相关关系 (P <0 0 1) ,并对术后恢复有一定的影响。结论 法乐四联症心肌纤维形态改变随年龄增长而加重 ,提示在条件允许的情况下 。

大鼠下丘脑腹内侧核等核团内胆囊收缩素能神经元与儿茶酚胺系之间关系的免疫电镜观察

以免疫电镜技术与人工伪介质小泡显示方法结合在一起，定性、定位地证明了大鼠下丘脑摄食中枢区域：下丘脑腹内侧核（ＶＭＨ）和下丘脑外侧区（ＬＨＡ）内分布的胆囊收缩素（ＣＣＫ）能神经元与儿茶酚胺（ＣＡ）能神经终末之间的超微结构关系，即突触的存在。否定了上述核团内ＣＣＫ与ＣＡ在同一神经元内的共存，为揭示下丘脑的摄食调节机理提供形态学依据。

葡萄糖调节蛋白78和内质网调节蛋白57在PTSD大鼠前额皮质的表达

目的观察创伤后应激障碍(PTSD)大鼠前额皮质(mPFC)神经元未折叠蛋白反应(unfolded protein response,UPR)标志物葡萄糖调节蛋白78(GRP78)和内质网调节蛋白57(ERP57)的表达变化,探讨内质网分子伴侣在PTSD发病机制中的作用。方法采用国际认定的PTSD动物模型-SPS大鼠模型,取80只成年雄性健康Wistar大鼠,随机分为正常组和SPS模型组(SPS1d,SPS4d,SPS7d),采用逆转录-聚合酶链式反应、免疫组织化学法和免疫印记检测PTSD-SPS大鼠m PFC神经元中GRP78和ERP57的表达变化。结果 SPS刺激后大鼠m PFC神经元细胞内GRP78和ERP57蛋白表达于1d开始逐渐升高,7d时表达最多;GRP78和ERP57的m RNA水平的变化与其蛋白表达变化相一致。结论 GRP78和ERP57在PTSD大鼠mPFC过表达可能参与SPS刺激诱导的UPR反应。

膀胱癌中miR-9对CBX7表达的调控作用

目的研究mi R-9在膀胱癌中对CBX7基因表达的调控作用及机制。方法应用荧光定量PCR方法检测膀胱癌及癌旁组织中mi R-9及CBX7基因的表达。培养膀胱癌T24细胞,转染mi R-9的前体pre-mi R-9,Western blot检测CBX7蛋白的表达。荧光素酶报告基因表达分析明确mi R-9与CBX7基因3'非翻译区(3'UTR)的结合。结果 mi R-9在膀胱癌组织中的表达较癌旁组织呈现显著的上调,而CBX7的表达则下调明显,二者的表达呈显著负相关。在转染后膀胱癌T24细胞中,pre-mi R-9能够分别下调T24细胞中CBX7蛋白的表达。荧光素酶报告基因表达分析明确mi R-9能够与CBX7基因的3'UTR结合并负性调节其表达。结论 mi R-9与CBX7基因的表达改变与膀胱癌相关,mi R-9能够在膀胱癌细胞中靶向负性调节CBX7基因的表达。

应激的细胞反应上调细胞自噬的机制

应激的细胞反应包括热休克反应和内质网应激等,热休克反应产生的热休克蛋白和内质网反应中的未折叠蛋白反应、异常钙离子升高与细胞自噬有很重要的关系。自噬是细胞重要的保护机制,可以降解蛋白质和细胞器。但过度自噬会导致细胞死亡,而且自噬的分子机制和信号通路与应激有关,如泛素化蛋白系统中的ATG12、LC3和自噬信号通路中的m TOR、ClassⅢPI3K-Beclin1等。

性激素对大鼠胸腺上皮细胞分泌胸腺素 α1 的影响

胸腺产生胸腺素等肽类激素，控制胸腺依赖淋巴细胞的发育并参与免疫调节过程。本实验用原位杂交法和高效液相色谱分析法研究了性激素（雌二醇和双氢睾酮）对培养胸腺上皮细胞（ＴＥＣ）胸腺素α１（ＴＭＡ１）生成的影响。结果如下：（１）ＴＭＡ１－ｍＲＮＡ活性产物成群分布于ＴＥＣ胞浆中；（２）雌二醇浓度大于３×１０－９ｍｏｌ／Ｌ使ＴＭＡ１－ｍＲＮＡ活性细胞数目明显减少；（３）双氢睾酮处理不影响ＴＭＡ１－ｍＲＮＡ活性细胞的数量；（４）雌二醇或双氢睾酮均使ＴＥＣ生成ＴＭＡ１明显减少。结果表明：性激素特别是雌二醇通过影响胸腺素的生成而调节免疫功能。