人p21活化激酶6基因真核表达质粒的构建及其亚细胞定位

目的:构建人p21活化激酶6(PAK6)真核细胞表达质粒,并研究其在人胚肾真核细胞HEK293中的亚细胞定位。方法:PCR扩增人PAK6基因,将其克隆入真核表达载体pcDNA3.1HisC中,构建含人PAK6基因的真核表达质粒pcDNA3.1HisC-PAK6。利用酶切鉴定,DNA测序,免疫印迹及免疫荧光方法鉴定PAK6真核表达质粒及PAK6蛋白的亚细胞定位。结果:经酶切鉴定、DNA测序、免疫印迹方法确认PAK6基因成功导入真核表达载体pcDNA3.1HisC。瞬时转染HEK293细胞,PAK6蛋白表达在细胞浆中。结论:PAK6真核表达质粒构建成功,PAK6定位于细胞浆中。

血清饥饿条件下p21活化激酶6(PAK6)与雄激素受体表达的相关性及其意义

目的血清饥饿条件诱导前列腺癌细胞系中内源性p21活化激酶6(PAK6)与雄激素受体(AR)蛋白表达,探讨PAK6与AR蛋白表达的关系。方法在前列腺癌细胞系CWR22Rv1和LNcap细胞进行血清饥饿,诱导内源性PAK6与AR蛋白表达发生变化。结果血清饥饿处理的不同时间点,CWR22Rv1和LNCaP细胞中PAK6蛋白表达呈上升趋势,AR蛋白表达呈下降趋势。瞬时转染递增剂量的PAK6引起AR蛋白表达的抑制。结论血清饥饿条件诱导前列腺癌细胞中PAK6与AR蛋白表达呈负相关。