医学实验室器材相关的生物安全实践

保证实验室生物安全不仅仅是依赖安全的实验室建筑和生物安全器材 ,更重要在于规范实验操作流程诸环节及其相关技术装备的正确使用。本文试以优良微生物学技术 /安全实验室技术为基础 ,讨论生物安全器材以及与引发生物危害相关器材的技术应用实践。

幼鼠肠缺血再灌注损伤时TNF-α的产生及作用

目的 :探讨肠缺血 /再灌注时肿瘤坏死因子 α(tumornecrosisfactor α ,TNF α)的来源及作用。方法 :建立幼鼠肠缺血 /再灌注动物模型 ,利用放射免疫法检测门静脉和外周血血清中TNF α表达及对肠组织进行形态学观察。结果 :缺血 30min组肠粘膜轻度受损 ,缺血 30min /再灌注 30min组、缺血 30min/再灌注 6 0min组、缺血 30min/再灌注 90min组肠粘膜中度受损 ,缺血 12 0min组肠粘膜重度受损。肠缺血 30min组门静脉血清TNF α开始升高为 (2 .0 6± 0 .5 2 )ng/ml,缺血 30min/再灌注 30min组达峰值为 (2 .96± 0 .4 5 )ng/ml,二者皆明显高于对照组 (P <0 .0 5 ) ;缺血 30min/再灌注 6 0min组、缺血 30min/再灌注 90min组时下降 ;肠缺血 30min/再灌注 30min组外周血清TNF α也升高为 (2 .11± 0 .2 9)ng/ml(P <0 .0 5 )。且缺血 30min组、缺血 30min/再灌注 30min组、缺血 12 0min组门静脉TNF α水平显著高于外周血 (P <0 .0 5 )。结论 :幼鼠肠缺血 /再灌注后TNF α在肠、肝内均有产生 ,但门静脉血清TNF α较外周血血清升高明显 ,因此推论幼鼠肠缺血 /再灌注损伤TNF α可能主要来源于肠组织 ,并且介导幼鼠肠缺血

多重PCR技术及定量PCR技术在缺失型Duchenne型肌营养不良患儿及携带者诊断中的应用研究

目的 建立一种简便、可靠的缺失型Duchenne型肌营养不良(DMD)患儿及携带者的基因检测方法,为DMD产前诊断的开展奠定基础。方法 首先采用1 8对引物多重PCR反应体系,确定2 0 0 1年3月至2 0 0 4年8月就诊于中国医科大学附属第二医院遗传门诊的48例DMD患儿dystrophin基因缺失情况,然后应用定量PCR方法对1 5例缺失型患儿母亲进行携带者检测。结果 48例DMD患儿中2 5例存在基因缺失,缺失率52 % ( 2 5/ 4 8) ,共涉及1 2个外显子,主要集中在44～52外显子,其中外显子49和50缺失频率最高;1 5例缺失型患儿母亲中检出8例携带者,其中肯定携带者检出率1 0 0 % ( 4 / 4 ) ,可疑携带者检出率3 6% ( 4 / 1 1 )。结论 多重PCR结合定量PCR方法能有效地检出缺失型DMD患儿及携带者,可为产前诊断提供十分重要的信息。

肠缺血再灌注时肿瘤坏死因子免疫组织化学研究

目的 探讨肠缺血 /再灌注时肿瘤坏死因子 (tumornecrosisfactorα,TNF α)的来源及作用。方法 ① 4 8只雄性Wistar大白鼠体重 (130± 15 ) g ,分成 6组 (n =8) ,假手术组 ,缺血 30min组 ;缺血 30min ,再灌注组 ;缺血 30min ,再灌注 6 0min组 ;缺血 30min ,再灌注 90min组 ;缺血 12 0min组 ;②利用免疫组织化学技术检测肠、肝组织TNF α蛋白表达和分布。③对肠组织进行HE染色。结果 ①肠粘膜免疫组化于缺血 130组 ;缺血 30min ,再灌注 6 0min组 ;缺血 30min ,再灌注 90min组时可见TNF α强阳性物质 ,缺血 30min ,再灌注 90min组 ;可见极强阳性物质 ;②缺血 30min ,再灌注 30min组 ;缺血 30min ,再灌注 6 0min组肝组织内可见阳性物质 ,缺血 30min ,再灌注 90min组 ;为强阳性物质 ;③肠组织HE染色显示I30’G肠粘膜轻度受损 ,缺血 30min ,用灌注 30min组 ;缺血 30min ,再灌注 6 0min组 ;缺血 30min ,再灌注 90min组肠粘膜中度受损 ,再灌注 12 0min组肠粘膜重度受损。结论 幼鼠肠缺血 /再灌注后TNF α在肠、肝内均有阳性反应 ,但肠粘膜内TNF α较肝内明显 ,因此推论幼鼠肠缺血 /再灌注损伤早期TNF α可能主要来源于肠组织 ,并且介导幼鼠肠缺血