新抑癌基因INPP4B在EB病毒相关胃癌中的表达及其临床意义

目的研究胃癌中INPP4B的表达情况以及其与EB病毒相关胃癌的关系。方法以301例胃癌手术切除标本为研究对象,利用免疫组织化学方法检测癌细胞及癌旁正常黏膜细胞中INPP4B蛋白表达的情况。利用EBER原位杂交技术检测胃癌标本中EB病毒感染情况,分析INPP4B蛋白表达与临床病理特点的关系,以及与EB病毒相关胃癌的相关性。结果48.5%的胃癌标本中出现了INPP4B蛋白表达明显下降或阴性表达,而且INPP4B蛋白的表达与癌细胞的分化程度和生长方式密切相关。在EB病毒相关胃癌中,INPP4B表达下降的比率显著高于未被EB病毒感染的胃癌。结论新抑癌基因INPP4B在胃癌中出现较高频率的表达下降或阴性表达,尤其在EB病毒相关胃癌中表达下降更加显著,提示INPP4B在胃癌的失活与EB病毒感染相关。

信息化大背景下“3+2”高职生物化学教材改革体会

3+2"高职指的是中专院校与大专院校联合办学,在中专完成3年学习后,再到联合所办学校完成2年课程拿到大专毕业证。文章针对"3+2"高职没有合适的生物化学教材的现状,提出了目前存在的问题,并从准确定位"3+2"高职生培养目标;把握好新教材基本理论阐述的深度;缩短再版周期,加快内容更新;规划实验教学内容,增加实验教学学时数和录制微课视频等方面提出了改革设想。争取让学生在尽量短的时间内掌握基本理论知识和实用的生物化学技术。"3+2"高职生物化学教材改革项目应立足于实际,以先进的理念为根本,确定教材改革的目标,顺应高等教材发展趋势,增加微课等信息化教学方法,推动高职教材建设工作的顺利进行。

缺氧诱导因子1-血管内皮生长因子-Notch信号通路参与马蹄内翻足畸形的发生机制

目的研究马蹄内翻足畸形发生的分子机制。方法采用HE染色观察两组胎鼠足踝部组织结构差异,免疫组化染色、qRT-PCR和Western blot技术检测模型组和对照组大鼠足踝部组织缺氧诱导因子1(hypoxia inducible factor 1,HIF-1)、血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)及Notch-1表达情况。结果光镜下观察,与对照组相比,实验组足踝部组织结构相对紊乱,组织间隙增大,软组织松散,局部软组织聚集挛缩。免疫组化染色、qRT-PCR和Western blot结果显示,实验组足踝部组织HIF-1表达水平下调,Vegf、Notch-1的表达减少。结论HIF-VEGF-Notch信号通路可能与马蹄内翻足畸形的发生相关。

一例多种羧化酶缺乏症的HLCS基因变异分析

目的对1例临床诊断为多种羧化酶缺乏症(multiple carboxylase deficiency,MCD)的患儿及其父母进行相关致病基因的变异分析,为临床诊断及遗传咨询提供依据。方法应用PCR技术和DNA测序技术对患儿的MCD致病基因BT和HLCS编码区进行变异检测,并对患儿父母进行相应基因变异分析。在80名正常人中对未报道过的基因变异进行PCR-限制性片段长度多态性分析。结果患儿的BT基因编码区未发现碱基改变,HLCS基因存在c.286delG(p.Val96Leufs*162)和c.1648G>A(p.Val550Met)复合杂合变异,其中c.286delG(p.Val96Leufs*162)经PCR-限制性片段长度多态性分析验证为新变异。结论HLCS基因c.286delG(p.Val96Leufs*162)和c.1648G>A(p.Val550Met)变异可能为患儿的致病原因,致病基因的检出为临床诊断及遗传咨询提供了依据,同时丰富了HLCS基因变异谱。

X连锁先天性视网膜劈裂症家系的RS1基因变异分析

目的探讨一个X连锁先天性视网膜劈裂症家系的遗传学病因。方法收集X连锁先天性视网膜劈裂症家系临床资料,采用聚合酶链式反应和Sanger测序法筛查先证者RS1基因外显子及其侧翼序列的变异位点,采用限制性片段长度多态性聚合酶链式反应分析家系成员和100名无关正常人的相应位点,应用生物信息学方法预测该变异位点致病性。结果该家系中的患者均有RS1基因c.458T>G(p.Val153Gly)变异,家系内正常人及无关正常对照者不含该变异,携带者存在杂合变异,生物信息学分析表明该变异具有致病性。结论RS1基因c.458T>G(p.Val153Gly)变异可导致X连锁先天性视网膜劈裂症。

表皮松解性掌跖角化病一家系的致病基因突变分析

目的对一个表皮松解性掌跖角化症(EPPK)家系进行基因突变检测,为该家系成员提供临床遗传咨询,并初步探讨该家系患者特殊表型指节垫、指关节弯曲与KRT9基因突变的相关性。方法收集该家系中的先证者、先证者的父亲及舅舅三人的外周血并提取基因组DNA。对以上三位家系成员进行全外显子组测序(WES),通过突变位点频率、突变类型、是否改变剪接或编码氨基酸进行筛选,并按照常染色体显性遗传方式筛选杂合突变,然后在家系内进行共分离分析,针对候选基因表达及已知功能分析,得到候选基因突变位点,并进行Sanger测序验证。应用生物信息学软件对KRT9基因结构域和功能域进行分析,针对161位氨基酸位点改变,进行文献综述和基因型-表型相关性探讨。结果本研究报道了一个中国EPPK家系,伴有罕见的指关节屈曲表型;WES测序检测到KRT9基因第1外显子存在杂合突变c.482A>G(p.N161S),该突变在家系内与疾病表型共分离,Sanger测序验证与WES结果一致。利用生物信息学软件预测到N161突变成S161后,角蛋白9的无规则卷曲发生空间位置改变,α螺旋结构有明显缺少,突变位点附近氢键数量增加,键长变长。对角蛋白9的161位点突变所致EPPK进行文献综述,发现N161S突变与指节垫表型高度相关。结论本研究报道了国际上第三例伴有罕见指关节屈曲表型的EPPK家系,初步认为KRT9基因c.482A>G(p.N161S)为该EPPK家系致病突变,对患者明确诊断及遗传咨询有重要意义。