PEEK复合材料的力学性能及对成骨细胞增殖影响的实验研究

目的研究新型聚醚醚酮复合材料(PEEK-HA-CF)的力学特性和在体外对成骨细胞增殖能力的影响。方法利用万能材料实验机测试复合材料的拉伸和弯曲性能;将新生鼠颅盖骨分离培养的成骨细胞接种于复合材料上,以广泛应用于临床的PEEK-CF作为对照组,用CCK-8测定成骨细胞的增殖率;扫描电镜观察成骨细胞的形态。结果PEEK复合材料的力学性能与人体骨的力学性能相匹配,并具有良好的生物活性。结论PEEK复合材料可能成为一种理想的移植替代材料。

应用于行为学研究中八臂迷宫实验方法的改良

目的探讨一种简易有效的新型八臂迷宫实验方法。方法选用20只雄性成年SD大鼠,分为传统方法组即对照组和改良电加热方法组即实验组,每组10只。于对照组食饵臂末端放置食饵,非食饵臂不放置食饵。实验组在非食饵臂末端放置加热装置作为错误惩罚外,其他条件与对照组相同。记录并比较实验大鼠于两种迷宫探索移动距离、时间、速度、进臂次数指标。结果与对照组相比,实验组大鼠移动距离和探索时间明显缩短且进入错误臂次数明显减少。结论使用改良电加热八臂迷宫实验方法能在训练7 d后更准确有效评估大鼠空间记忆学习能力,可作为一种有效的实验新方案。

CD93^(+)B淋巴细胞亚群在炎症及炎症相关疾病中的研究进展

CD93表达于原B(pro-B)细胞、前B(pre-B)细胞以及各种不成熟B细胞,CD93可以和膜突蛋白(moesin)、多聚素2(MMRN2)等分子相互作用参与细胞迁移、黏附和吞噬过程,进而在炎症以及血管生成过程中发挥着重要的作用。检测CD93+B细胞亚群对炎症及炎症相关疾病,如幽门螺杆菌相关性的胃炎、脓毒症、非肥胖型糖尿病以及牙周炎等疾病的诊断、治疗及预后监测具有重要的作用。

神经母细胞瘤化疗耐药机制的研究进展

神经母细胞瘤(Neuroblastoma,NB)是儿童最常见的颅外恶性实体瘤,其临床症状各异且易复发和转移。目前NB的治疗方法主要以手术联合化疗为主,由于化疗后期易出现耐药性,高危型NB患者的预后往往不理想。因此,深入了解NB化疗耐药机制对于提高患者的预后具有至关重要的意义,本文从多个方面探讨NB化疗耐药的机制。

聚醚醚酮及其复合材料作为骨科植入物的研究进展

文章总结了聚醚醚酮及其复合材料的生物活性和相容性的最新研究进展,同时综述了聚醚醚酮及其复合材料作为骨科植入物的应用现状,并分析其发展前景。

呼吸道分泌型IgA研究进展

人体粘膜是病原微生物等抗原性异物入侵机体的主要途径,机体近50%的淋巴组织分布于粘膜系统。粘膜相关淋巴组织（Mucosal-associated lymphoidtissue,MALT）是发生局部特异性免疫应答的主要部位,MALT中的B细胞多为产生分泌型IgA（SecretoryIgA,SIgA）的B细胞,

miR-181调控人晶状体上皮细胞凋亡的机制研究

目的:探讨miR-181在白内障晶状体组织中的表达情况,及其对人晶状体上皮细胞凋亡的调控机制。方法:利用Real time q-PCR方法,检测年龄相关性白内障患者晶状体前囊膜和人晶状体上皮细胞凋亡模型中miR-181的表达情况;利用Lipofectamine 2 000瞬时转染miR-181 mimic和inhibitor调节人晶状体上皮细胞中miR-181的表达,利用Real time q-PCR方法验证转染效率,利用流式细胞仪检测细胞凋亡率的变化。结果:与对照组相比,年龄相关性白内障患者晶状体前囊膜组和人晶状体上皮细胞凋亡模型组,miR-181的表达显著升高;miR-181 mimic转染组,miR-181的表达显著升高,细胞凋亡率显著升高;miR-181 inhibitor转染组,miR-181的表达显著降低,细胞凋亡率显著降低,差异均有统计学意义(P<0.01)。结论:miR-181在年龄相关性白内障晶状体组织中呈高表达,miR-181能够促进人晶状体上皮细胞凋亡,从而可能在年龄相关性白内障的发病过程中发挥一定作用,miR-181可能成为白内障非手术治疗的一种新途径,但具体机制有待进一步研究。

microRNA let-7a调控Caspase家族影响白内障发生的机制研究

目的：探讨microRNA let-7a靶向调控Caspase家族的机制及其在年龄相关性白内障发病过程中的作用。方法收集2014年7~9月在中国医科大学附属第四医院（以下简称“我院”）眼科诊断为年龄相关性白内障（排除其他眼部疾病）的患者晶状体前囊膜标本30例，作为实验组；同时收集我院眼科眼库提供的新鲜人眼透明晶状体前囊膜标本15例，作为对照组。利用生物信息学软件预测let-7a可能调控的Caspase家族中的关键基因；采用实时荧光定量PCR （Real time q-PCR）检测实验组和对照组let-7a及其预测靶基因的表达；利用Lipofectamine 2000瞬时转染let-7a mimic和inhibitor，调节人晶状体上皮细胞中let-7a的表达，利用Real time q-PCR法验证转染效率，并检测预测靶基因的表达变化。结果3种不同的生物信息学软件预测到Caspase家族中Caspase-3、Caspase-8、Caspase-9可能为let-7a的靶基因。与对照组比较，实验组let-7a的表达显著降低，Caspase-3、Cas-pase-8、Caspase-9的表达显著升高。let-7a mimic转染组，let-7a的表达显著升高，Caspase-3、Caspase-8、Caspase-9的表达显著降低；let-7a inhibitor转染组，let-7a的表达显著降低，Caspase-3、Caspase-8、Caspase-9的表达显著升高；差异均有高度统计学意义（P＆lt;0.01）。结论let-7a可能通过靶向调控Caspase家族成员Caspase-3、Caspase-8、Caspase-9的表达，在年龄相关性白内障发病过程中发挥重要作用，let-7a可能成为白内障非手术治疗的新靶点。

子宫内膜异位症大鼠模型研究进展

为临床深入研究子宫内膜异位症(EMs)的病因、发病机制、治疗药物和预防对策提供合理的大鼠模型。本文对EMs大鼠模型的发病机制、建模方法、优化措施、评价标准以及模型应用等进行综合阐述和比较,研究者可根据实验需要选择合适的建模方法,使其更加贴合实验及临床研究的需要。

癫痫与微小RNA和生酮饮食的研究进展

微小RNA(microRNA,miRNA)与癫痫的发生发展过程有重要关系,可通过调控其靶基因参与信号传导通路,发挥着类似于癌基因或抑癌基因的作用,目前已发现多种miRNA与癫痫关系密切。生酮饮食(ketogenic diet,KD)是一种用来治疗儿童癫痫的方法,其有效性和安全性已经得到全世界的公认,目前认为KD治疗癫痫的可能机制有KD影响脑组织的能量代谢和神经递质以及KD具有抗氧化和抗凋亡作用。全面研究KD治疗癫痫的miRNA调控机制将可能对研发新型抗癫痫药物提供理论依据。

生酮饮食对海人酸点燃癫癎模型大鼠海马神经元保护作用研究

目的探讨生酮饮食对海人酸点燃癫癎模型大鼠海马神经元的保护作用。方法经海人酸制备SD大鼠癫癎模型,分别给予生理盐水+正常膳食(C组)、生理盐水+生酮饮食(K组)、海人酸+正常膳食(E组)和海人酸+生酮饮食(EK组),连续观察21 d后记录不同处理组大鼠体重、观察Ⅳ或Ⅴ级癫癎发作频率和持续时间,并通过HE染色和Nissl染色计数E组和EK组大鼠海马CA3区正常锥体神经元数目。结果 C组和K组大鼠均无癫癎发作,且海马CA3区锥体神经元数目正常。E组和EK组大鼠在观察过程中均出现Ⅳ或Ⅴ级癫癎发作,但EK组大鼠在饲养第21天时与E组相比,癫癎发作频率减少[(17.90±4.12)次对(30.50±4.40)次,P=0.000]、发作持续时间缩短[(212.70±17.75)s对(335.00±14.21)s,P=0.000],差异有统计学意义;EK组海马CA3区正常锥体神经元数目与E组相比增加[(117.67±7.51)个对(71.33±6.11)个,P=0.000],差异亦有统计学意义。结论生酮饮食对海人酸点燃癫癎模型大鼠海马神经元具有保护作用。

Eaf2基因调控microRNA抑制白内障发生的机制研究

目的探讨Eaf2基因敲除小鼠中micro RNA的表达情况,以及Eaf2基因对人晶状体上皮细胞凋亡及晶状体内micro RNA表达的影响。方法利用Lipofectamine 2000瞬时转染p EGFP-C1-Eaf2质粒过表达Eaf2基因,利用流式细胞仪检测细胞凋亡率的变化,利用Real time q-PCR方法检测人晶状体上皮细胞中micro RNA的表达情况;利用Real time q-PCR方法检测Eaf2基因敲除小鼠micro RNA的表达情况。结果 p EGFP-C1-Eaf2质粒转染组细胞凋亡率显著低于对照组,mi R-125b、let-7a的表达显著高于对照组,而mi R-204的表达显著低于对照组;Eaf2基因敲除小鼠mi R-125b、let-7a的表达显著低于对照组,而mi R-204的表达显著高于对照组,差异均有统计学意义(P<0.01)。结论 Eaf2基因可能通过调控micro RNA的表达抑制人晶状体上皮细胞凋亡,从而在白内障发生中发挥晶状体保护作用。

肠道树突状细胞的研究进展

树突状细胞（Dendritic cells,DCs）是专职抗原提呈细胞（Professional Antigen presenting cells,APC）,它能协调固有免疫和适应性免疫应答,黏膜DCs除抗原提呈外主要参与IgA的类型转换和特异性印迹淋巴细胞的归巢受体使其再循环至肠道等生物学特性。DCs作为专职APC具有高效地摄取、

17β-雌二醇调控大鼠成肌细胞L6GNR4细胞迁移能力的机制研究

目的研究17β-雌二醇对大鼠成肌细胞L6GNR4细胞迁移能力的调控作用及机制。方法L6GNR4细胞培养在含有10%胎牛血清的DM EM高糖增殖培养基中,培养基中添加10 nM雌激素17β雌二醇和/或50 nM雌激素竞争性拮抗剂Tamoxifen。应用细胞划痕试验在药物处理后0、12、24 h观察17β雌二醇对成肌细胞迁移能力的影响。在药物处理24 h后,应用荧光定量PCR技术检测各组细胞中雌激素受体α和β的表达。同时还检测了成肌细胞迁移相关关键基因(Pax3、Fhl1以及Fhl1相互作用蛋白Actg1、Myh10)在各组细胞中的表达情况。结果与对照组比较,17β-雌二醇在划痕24 h时可以明显抑制L6GNR4的细胞迁移。17β-雌二醇能够明显抑制ERβ的表达,而雌激素竞争性拮抗剂Tamoxifen能够部分逆转17β-雌二醇对ERβ的抑制作用。17β-雌二醇能够明显抑制成肌细胞迁移相关的关键因子Pax3、Fhl1以及Fhl1相互作用蛋白Myh10的表达,而雌激素竞争性拮抗剂Tamoxifen能够逆转或部分逆转17β-雌二醇对Pax3、Fhl1和Myh10的转录抑制作用。相同浓度的雌激素对L6GNR4细胞中Actg1的表达改变不明显。结论雌激素17β-雌二醇通过ERβ转录抑制Pax3、Fhl1以及Fhl1的相互作用蛋白Myh10的表达,发挥其抑制大鼠成肌细胞迁移的作用。

犬消声实验及其观察

目的探索一种简单、有效的犬消声方法,并对其消声效果和声音恢复情况进行观察。方法对10只易兴奋,喜吠的普通级犬,行口腔内电刀直接切除声带,并分别于术前、术后3d,7d,15d,30d,3个月,6个和12个月进行声音值测量。结果术后犬叫声较术前有明显降低,随时间推移声音有所恢复,但不会恢复到原来状态。结论烧烙法行口腔直接切除声带是一种简单、安全、有效的犬消声方法。

自噬在细胞铁死亡发生中作用机制的研究进展

铁死亡(ferroptosis)是近年来新发现的一种非凋亡性细胞程序性死亡方式,以铁依赖性和脂质活性氧(lipid reactive oxygen species,L-ROS)累积为特征。自噬是真核生物中的高度保守的生物代谢过程,广泛参与机体生物调节。研究发现细胞铁死亡与自噬在肿瘤发生发展中关系密切,自噬调控基因及相关信号通路与铁死亡过程发生交互调节,影响细胞死亡进程。本文将概述铁死亡与自噬的发生及调节机制,综述自噬在铁死亡发生过程中的作用,展望利用自噬与铁死亡的相互作用对肿瘤治疗的意义。

反式维甲酸诱导显性脊柱裂胎鼠骶尾部神经前体细胞凋亡和增殖的变化规律研究

目的观察大鼠胚胎脊柱裂发生早期,细胞凋亡与细胞增殖的变化规律。方法孕鼠随机分为对照组和实验组。胚胎10天时,实验组1次性经胃管注入致畸量反式维甲酸诱导产生脊柱裂动物模型,对照组胃饲等量溶剂,分别在妊娠11、12、13天(E11,E12,E13)时剖宫取胚胎,一部分胚胎固定后进行全胚胎TUNEL染色观察其整体凋亡情况;另一部分胚胎常规制作石蜡切片,采用TUNEL切片染色和免疫荧光染色技术,检测胚胎脊部神经管组织中细胞凋亡和细胞增殖的变化。结果与对照组相比,细胞凋亡于多个发育部位明显增多,集中表现在颅面原基、颅部神经管的背外侧、骶尾部神经管的背部中线。免疫荧光染色显示,与对照组相比,脊柱裂组胚胎畸形发生部位的神经前体细胞的凋亡率升高[E11(2.02±0.52)%与(0.57±0.23)%,E12(3.56±0.33)%与(0.93±0.14)%,E13(3.76±0.37)%与(1.24±0.21)%,P<0.001]。而细胞增殖降低[E11(65.17±2.30)%与(81.76±2.17)%,E12(63.97±3.03)%与(76.98±5.14)%,E13(56.86±2.80)%与(73.43±1.99)%,P<0.001]。结论反式维甲酸诱导的大鼠脊柱裂胚胎骶尾部神经管中神经前体细胞凋亡增多,而细胞增殖减少,这可能是脊柱裂胚胎神经元发育异常的主要原因之一。

供精人工授精妊娠结局的影响因素及子代安全性分析

目的:分析影响供精人工授精(AID)妊娠结局的相关因素,以提高妊娠率,并评价其子代安全性。方法:回顾性分析沈阳二〇四医院生殖医学研中心2005年7月1日至2013年6月30日行AID助孕的5 109例患者,共计7 761周期的妊娠结局及子代出生缺陷发生率情况。结果:AID临床妊娠2 252例,周期妊娠率29.02%,累积妊娠率44.08%。女方年龄≤35岁组临床妊娠率明显高于35岁以上组(30.31%vs 20.18%,P<0.01),不孕年限5年以下组高于5年以上组(30.83%vs 28.16%,P<0.01),使用促排卵组临床妊娠率明显高于自然周期组(33.22%vs 28.68%,P<0.01);治疗第1周期组的临床妊娠率最高(29.87%),与治疗第4周期组妊娠率(23.61%)差异有统计学意义(P<0.05),其余各治疗周期组间的临床妊娠率差异无统计学意义(P>0.05)。AID发生子代出生缺陷28例(1.40%),以心血管畸形发生率最高(6例,21.43%),其次是骨骼肌肉系统畸形4例(14.29%),泌尿系统和神经系统畸形各3例(10.71%),还包括唇腭裂、呼吸系统、消化系统畸形各2例(7.14%)及其它系统畸形。结论:女方年龄、不孕年限及促排卵治疗是影响AID临床妊娠率的重要因素;冷冻精液行AID并未增加子代出生缺陷发生率,是一项相对安全的辅助生殖技术。

UC-MSC经PI3K/AKT信号通路影响人肺腺癌A549细胞的凋亡和增殖

目的:探讨人脐带来源间充质干细胞(umbilical cord-derived mesenchymal stem cell, UC-MSC)经PI3K/AKT信号通路对人肺腺癌A549细胞凋亡和增殖的影响及其作用机制。方法:采用酶消化法从人脐带组织中分离UC-MSC并进行体外培养,用流式细胞术鉴定所得到的UC-MSC的免疫表型。收集UC-MSC培养上清,建立UC-MSC条件培养基与肺腺癌A549细胞株的体外间接共培养体系。采用CCK-8法检测A549细胞增殖率,通过Annexin V/PI染色流式细胞术检测A549细胞的凋亡率,通过PI染色法判断肿瘤细胞的细胞周期分布;qPCR实验检测CyclinD1、BAX、Bcl-2等PI3K/AKT通路下游凋亡与增殖相关基因的转录水平;Wb测定PI3K/AKT通路相关蛋白质表达水平。结果:人脐带组织分离培养3周后,可见纤维状细胞铺满培养瓶,平行排列或呈旋涡状生长。流式细胞术检测发现所得细胞表达MSC标志分子CD73、CD90、CD105,不表达CD45和HLA-DR。UC-MSC条件培养基与肺腺癌A549细胞株在体外间接共培养后,与对照组比较,A549细胞的增殖率明显降低、凋亡率明显升高,其细胞周期明显停滞在G1期(均P<0.01)。PI3K/AKT信号通路相关分子CyclinD1和Bcl-2转录下调、BAX的转录上调(均P<0.01);UCMSC条件培养基培养的A549细胞总AKT水平不变,p-AKT蛋白表达呈剂量性依赖下降(P<0.01)。结论:UC-MSC明显影响肺腺癌A549细胞的增殖和凋亡能力,细胞周期停滞在G1期,其主要作用机制是UC-MSC抑制A549细胞PI3K/AKT信号通路,为探索UC-MSC临床应用的安全性和有效性提供实验依据。

microRNA let-7a对人晶状体上皮细胞凋亡的调控及其在白内障中的作用

目的探讨micro RNA let-7a对人晶状体上皮细胞凋亡的调控作用及其在白内障中的作用。方法利用Real time q-PCR方法,检测年龄相关性白内障患者晶状体前囊膜和正常人眼晶状体前囊膜、人晶状体上皮细胞凋亡模型和正常人晶状体上皮细胞系let-7a的表达情况;利用Lipofectamine 2000瞬时转染let-7a mimic和let-7a inhibitor,分别上调和下调人晶状体上皮细胞中let-7a的表达,并利用Real time q-PCR方法验证转染效率,利用流式细胞仪检测细胞凋亡率的变化。结果年龄相关性白内障患者晶状体前囊膜组let-7a的表达显著低于正常对照组;人晶状体上皮细胞凋亡模型组let-7a的表达显著低于正常对照组;let-7a mimic转染组let-7a的表达显著高于对照组,let-7a inhibitor转染组let-7a的表达显著低于对照组;let-7a mimic转染组细胞凋亡率显著低于对照组,let-7a inhibitor转染组细胞凋亡率显著高于对照组,差异均有统计学意义(P<0.01)。结论 micro RNA let-7a能够调控人晶状体上皮细胞凋亡,从而在白内障发病过程中发挥重要作用,micro RNA let-7a可能成为白内障非手术治疗的新靶点。