胆道梗阻再通术后肾脏AQP3的变化及其意义

目的:探讨大鼠胆道梗阻再通术后肾脏水通道蛋白3(AQP3)的变化及其意义.方法:50只大鼠,任选10只为对照组,其余为实验组,实验组先建梗阻性黄疸(obstructive jaundice,OJ)模型,7 d后解除梗阻;按取材时间不同随机分为5组:OJ0h、OJ24h、OJ72 h、OJ1wk和NC.测定血生化指标.Western blot法检测肾脏AQP3水平.结果:随梗阻解除时间延长血清总胆红素(TBIL)和谷丙转氨酶(ALT)逐渐下降(TBIL:93.26±1.32 vs 63.31±1.85,30.78±1.40,5.04±0.24,P<0.05:ALT:70.95±1.22 vs 69.96±0.82,30.74±1.52,11.84±1.12,P<0.05):OJ0 h与NC相比尿素氮(BUN)、血肌酐(Cr)无明显变化(P>0.05),AQP3表达降低;OJ24h BUN、Cr下降,AQP3表达进一步降低.OJ 72 h与OJ 24 h相比BUN、Cr无明显变化,AQP3表达增强,但仍弱于NC(P<0.05);到第7天,BUN、Cr和AQP3均与NC无明显差别.结论:大鼠胆道梗阻解除后短期内因肾功能受损加重,AQP3表达下降后随肾功好转表达增强,其灵敏性和特异度均高于BUN和Cr.

大鼠胆道梗阻再通术后肾脏水通道蛋白3 mRNA的变化

目的:探讨大鼠胆道梗阻再通术后肾脏水通道蛋白3(AQP3)mRNA的变化。方法:50只大鼠,随机选10只作为对照组,其余为实验组。实验组先建梗阻性黄疸(obstructive jaundice,OJ),7d后解除梗阻。按取材时间不同分为5组,OJ0h、OJ24h、OJ72h、OJ1周和NC组。测定血生化指标,RT-PCR检测肾脏AQP3 mRNA。结果:随梗阻解除时间延长,总胆红素(TBIL)和丙氨酸氨基转移酶(ALT)逐渐下降(P<0.05);OJ0h与NC相比血尿素氮(BUN)、肌酐(Cr)无明显变化(P>0.05),AQP3 mRNA表达降低;术后24h(OJ24h)BUN、Cr下降,AQP3 mRNA表达进一步降低。OJ72h与OJ24h相比BUN、Cr无明显变化(P>0.05),AQP3 mRNA表达增强,但仍弱于NC组(P<0.05);到第7天,BUN、Cr和AQP3 mRNA均与NC无明显差异。结论:大鼠胆道梗阻解除后AQP3 mRNA的变化与AQP3的变化一致,其灵敏性和特异度均高于BUN、Cr。

多巴胺调控实验性梗阻性黄疸围手术期肾髓质水通道蛋白2表达

目的:探讨梗阻性黄疸围手术期应用小剂量多巴胺对肾髓质水通道蛋白2(aquaporin 2)蛋白表达影响.方法:♂wistar大鼠70只随机分为4组,分别为对照组(n=10)、梗阻性黄疸组(n=20)、多巴胺5μg组(n=20)和多巴胺10μg组(n=20).梗阻性黄疸组及多巴胺组大鼠全身麻醉后建立梗阻性黄疸动物模型;对照组大鼠行假手术.7d后全麻下解除胆管梗阻,对照组再次行假手术.多巴胺组于胆管再通手术之前于股静脉套管针穿刺泵入多巴胺,剂量分别为5μg/(kg·min)和10μg/(kg·min);而假手术组及梗阻性黄疸组大鼠泵入9g/L生理盐水,泵注持续2h,并将各组动物随机均分为立即取材组和24h后取材组.腔静脉血离心后收集血清冻存检测胆红素、肌酐和尿素氮;分离肾脏髓质冻存,免疫印迹法(Western blotting)法检测aquaporin 2的表达.结果:解除梗阻早期鼠血清胆红素水平下降.血尿素氮及肌酐未见明显改变.通过Western blotting对肾髓质aqp2表达测定发现,梗阻性黄疸组解除梗阻0h取材组aqp2表达较对照组明显下降(15 665±1181 vs 21 966±1544,P<0.01),而解除梗阻24h后aqp2表达出现明显上升(36 490±1822 vs 21 917±2661,P<0.01).多巴胺5μg组0与24h aqp2表达更接近CO组(16 010±646,22 715±575 vs 21 966±1544,21 917±2661);10μg组各时间点aqp2表达与梗黄组接近(13 581±1662,32 313±1453 vs 15 665±1181,36 490±1822),未见多巴胺有明显调节aqp2表达作用.结论:胆管梗阻损伤肾脏集合管上皮细胞结构并抑制水重吸收功能;低浓度多巴胺可调控集合管水通道蛋白2表达.

梗阻性黄疸围手术期肾髓质水通道蛋白2表达变化的实验研究

目的探讨大鼠胆道梗阻解除后肾髓质集合管上皮细胞形态学改变及水通道蛋白2(AQP2)表达的变化。方法30只大鼠按随机表法随机分为假手术组(n=10)和梗阻性黄疸组(n=20)。梗阻性黄疸组大鼠全麻后建立梗阻性黄疸模型;假手术组大鼠行假手术。7d后再次全麻解除胆道梗阻,而假手术组再次行假手术。各组动物分别于解除梗阻后立即或24h处死取材。将静脉血离心后血清冻存备检肝、肾功能;部分肾脏标本分离后冻存,Western blot法半定量检测AQP2表达;部分肾脏固定后作光镜观察。结果各组动物均顺利完成实验,无实验动物死亡。梗阻性黄疸组大鼠取材时见腹腔较多金黄色腹水。解除梗阻后24h大鼠血清胆红素水平下降〔(45.95±8.39)μmol/L〕,P<0.01,血肌酐及尿素氮未见明显改变。梗阻性黄疸组肾髓质AQP2表达(15665.30±1181.85)较假手术组(21966.20±1544.70)明显下降(P<0.01),解除梗阻后梗阻性黄疸组肾髓质AQP2表达增强(19490.80±4239.32),P<0.01。结论胆道梗阻会造成肾髓质集合管上皮细胞结构损伤,同时下调AQP2表达。

梗阻性黄疸围手术期肾水通道蛋白3表达变化的实验研究

梗阻性黄疽是胆道外科常见疾病，临床上约8％的患者在围手术期出现急性肾功能不全，1991年Peter Agre发现水通道蛋白之后，利用其特点在分子水平研究肾损伤。aqp3是肾脏集合管自由水代谢调节的主要蛋白质．梗阻性黄疸。肾集合管损伤的研究对于指导临床早期治疗具有重要意义，目前国内外尚未见该方面的相关报道。本文旨在探讨解除胆道梗阻时大鼠肾aqp3蛋白表达的变化。

梗阻性黄疸围手术期肾水通道蛋白1表达变化的实验研究

目的探讨大鼠胆道梗阻解除后肾脏近曲小管上皮细胞形态学检测及水通道蛋白1表达的变化。方法30只大鼠随机分为二组，分别为假手术组10只、梗阻性黄疸组20只。梗阻性黄疸组20只大鼠全身麻醉后建立梗阻性黄疸动物模型；假手术组10只大鼠行假手术。7d后再次全麻解除胆道梗阻，而假手术组再次行假手术。并将各组动物随机均分为立即取材组和24h后取材组，分别立即处死取材或24h后处死取材。将静脉血离心后血清冻存检测肝功能、肾功能；部分肾脏标本冻存，Western印迹法半定量检测水通道蛋白1（aquaporin1，aqp1）表达；部分肾脏固定后光镜检测。结果解除梗阻早期鼠血清胆红素水平下降，同时血BUN及cr未见明显改变。通过Western印迹对肾aqp1表达测定发现：梗阻性黄疸组aqp1表达较对照组明显下降，解除梗阻后梗黄组aqp1表达增强。结论胆道梗阻会造成肾脏近曲小管上皮细胞结构损伤，同时下调aqp1表达。解除梗阻后aqp1表达增强。