原代培养大鼠颌下腺细胞分离方法的比较研究

目的 探讨体外培养大鼠颌下腺细胞的分离方法并进行比较。方法 取 Wistar大鼠颌下腺分别采用直接分离法与胰酶消化法分离获取颌下腺细胞 ,并进行原代及传代培养 ;相差倒置显微镜观察细胞形态 ,苔盼蓝染色法测细胞成活率 ,MTT法检测培养细胞活性 ,并检测 2 4、4 8、72和 96小时不同时间培养上清液中淀粉酶的含量 ,免疫组织化学鉴定细胞来源及比例。结果 直接分离法获取的细胞活性为 70 % ,活力值为 0 .16± 0 .0 14 ,功能欠佳 ,经胰酶消化法所获取的细胞活性为 85 % ,活力值为 0 .4 5± 0 .0 13,细胞形态完整、贴壁良好 ,且功能强 ;免疫组织化学检测颌下腺细胞α- SMA抗体、CK8.13抗体、keratin抗体呈阳性反应 ,胰酶消化法颌下腺细胞反应强度大于直接分离法。结论 胰酶消化分离获取颌下腺细胞的方法优于直接分离法。