视黄酸调节IL-1β和IFN-γ诱导肺癌细胞分泌C3及B因子的实验研究

背景与目的肺癌的发病率急剧上升,寻找有效的防治方法是迫切需要的。本研究旨在从免疫治疗的角度探讨近年来用于治疗恶性肿瘤的视黄酸(RA)与IL1β和IFNγ间的相互作用对人肺癌细胞株A549分泌C3及B因子(Bf)的影响。方法用ELISA、Westernblot的方法检测肺癌细胞株培养液中C3及Bf蛋白,用RTPCR法检测细胞核内C3及Bf的mRNA。结果ELISA、Westernblot和RTPCR法均显示IL1β和IFNγ促进A549细胞中C3和Bf的分泌及其mRNA的表达。视黄酸对A549细胞分泌C3及Bf没有影响,但它能进一步增强IL1β诱导的A549中C3、BfmRNA的表达和C3、Bf的分泌,以及IFNγ诱导的A549细胞中BfmRNA的表达和Bf的分泌。结论视黄酸可上调IL1β及IFNγ诱导人肺癌细胞株A549分泌C3及Bf,稳定补体系统激活因子与抑制因子间的平衡,对杀伤肿瘤细胞起到一定的作用,为临床上共同应用视黄酸与细胞因子治疗肺癌提供了理论依据。

视黄酸对肿瘤坏死因子α诱导肺泡上皮细胞损伤的保护作用

目的探讨肿瘤坏死因子α(TNF-α)对肺泡Ⅱ型上皮细胞株A549增殖凋亡的影响与视黄酸(RA)对其调控作用。方法用不同浓度的TNF-α、1μmol/LRA和10μg/LTNF-α+1μmol/LRA处理肺泡Ⅱ型上皮细胞株A549细胞24h和48h后MTT法测定细胞增殖能力,流式细胞仪检测细胞凋亡。用10μg/LTNF-α处理24h或48h后继续培养,用台盼蓝染色计算24、48和72h活细胞数。结果分别用0、0.1、1、5、10μg/L浓度的TNF-α培养A549细胞24h和48h测定细胞增殖数(%):24h分别为95.0%、90.0%、79.6%、72.4%和59.6%,方差分析结果F值为18.04,P<0.01;48h分别为93.2%、82.7%、61.5%、50.3%和44.7%,F值为40.61,P<0.01。用10μg/LTNF-α处理A549细胞24h,其对细胞的增殖抑制作用可逆转,但处理48h后的A549细胞增殖抑制作用不能逆转。用TNF-α和视黄酸培养A549细胞12、24与48h后,凋亡的细胞数(%)TNF-α组分别为14.3%±3.2%、18.6%±2.9%和43.4%±3.5%,与对照组(6.3%±1.2%,8.2%±1.3%和26.1%±2.5%)比较差异有统计学意义;视黄酸加TNF-α组为4.8%±1.1%,5.2%±1.3%和16.4%±2.3%,明显少于TNF-α组。结论视黄酸通过抑制TNF-α对肺泡Ⅱ型上皮细胞的破坏,可以达到减轻肺泡上皮细胞损伤,保护肺表面活性物质的作用。