幼年大鼠内毒素血症对小肠上皮细胞凋亡及PCNA表达的影响

目的:探讨幼年大鼠内毒素血症对小肠细胞凋亡与增生的影响,为抗凋亡或促增生治疗提供理论依据方法:用内毒素(4 mg/kg大肠杆菌脂多糖)ip制备幼年大鼠内毒素血症模型,同等量生理盐水ip为对照组,分别在注射后0 h(只限于对照组)或死后10 min(只限于内毒素组),2,4,6,24,72 h取4 cm远端回肠, HE染色观察小肠绒毛的病理变化,原位末端标记法(TUNEL)检测小肠上皮的细胞凋亡,免疫组织化学方法测定增生细胞核抗原(PCNA)的表达. 结果:内毒素组各时间点小肠绒毛上皮细胞凋亡指数均明显高于对照组(分别为37.4±7.1,44.1±9.3,46.6±8.2, 54.7±9.0,45.3±7.2,33.9±6.1 vs 0.02±0.01, P<0.01),PCNA表达均明显低于对照组(P<0.05).注内毒素后2 h上皮细胞凋亡指数明显增加,随着时间延长, 逐渐增加,于24 h达高峰,72 h恢复到6 h的水平;PCNA 的表达于2 h(30.2±8.3 vs 74.6±16.2,t=6.874, P<0.01)明显降低,4 h(21.4±6.7 vs 74.6±18.7, t=7.566,P<0.01)和6 h(23.9±14.7 vs 73.6±13.7, t=6.999,P<0.01)达最低水平,24 h(35.8±11.4 vs 76.3±11.8,t=7.010,P<0.01)恢复到2 h的水平, 72 h(59.6±18.0 vs 78.7±16.9,t=2.185,P= 0.046<0.05)仍未达到正常.死亡组细胞凋亡指数(33.9±6.1)和PCNA表达(20.2±9.2)分别与注内毒素后2 h 和4 h的接近.将同一时间点的PCNA表达与细胞凋亡指数的比值进行比较发现,内毒素组的比值(分别为0.8±0.3,0.5±0.1,0.5±0.3,0.6±0.2,1.3±0.3,和0.6±0.2)明显低于正常[(3.2±0.8)×103- (3.7±0.7)×103](P<0.01),死亡组比值与注内毒素后4,6,24 h的接近,近于最低点. 结论:幼年大鼠内毒素血症时小肠上皮细胞凋亡增加, PCNA表达降低,细胞凋亡与细胞增生之间的平衡破坏是严重感染时肠屏障破坏的病理机制之一.