IL-1β增强主动脉平滑肌细胞内Ⅰ型IP_3受体表达

目的 :探讨白细胞介素 1(IL 1)对主动脉平滑肌细胞株 (A7r5细胞 )Ⅰ型IP3受体蛋白过度表达的影响。方法 :通过对主动脉平滑肌细胞培养 ,应用蛋白杂交技术、核酸杂交技术分别检测在IL 1β作用后 ,主动脉平滑肌细胞中Ⅰ型三磷酸肌醇 (IP3)受体蛋白和Ⅰ型IP3受体mRNA的表达及Ⅰ型IP3受体mRNA半衰期的测定 ,同时研究IL 1β对Ⅰ型IP3受体基因启动子的作用。结果 :IL 1β能增强主动脉平滑肌细胞内的Ⅰ型IP3受体蛋白的表达 ,两者呈剂量依赖关系 ;IL 1β也能使Ⅰ型IP3受体mRNA水平增高 ;通过对Ⅰ型IP3受体mRNA半衰期的测定明确IL 1β对Ⅰ型IP3受体mRNA影响不是抑制mRNA的降解 ,而是诱导其表达增加。IL 1β作用 4小时时 ,装有Ⅰ型IP3受体启动子的质粒上的报告基因表达增加 ,而 8小时时 ,报告基因的表达即降至IL 1β作用前的水平。 结论 :IL 1可能作用于Ⅰ型IP3受体mRNA的基因启动子 ,使Ⅰ型IP3受体mRNA合成增加 ,导致Ⅰ型IP3受体蛋白表达增加 ,由此构成了主动脉平滑肌细胞内储备Ca2 + 释放 ,引起动脉平滑肌细胞收缩、舒张功能异常的病理生理基础。

TGF-β对WB鼠肝脏上皮细胞内Ⅰ型IP_3受体表达的影响

目的:探讨TGF-β对WB鼠肝脏上皮细胞内Ⅰ型IP3受体表达的影响。方法:通过对WB细胞的培养,应用Westernblot和RT-PCR技术分别检测在TGF-β刺激不同时间后WB细胞内Ⅰ型IP3受体蛋白和mRNA的表达。结果:TGF-β刺激不同时间后WB细胞内Ⅰ型IP3受体蛋白和mRNA的表达均有所增加,8小时的表达达到最高峰,然后开始下降。结论:TGF-β可增强WB细胞内Ⅰ型IP3受体蛋白和mRNA的表达。

慢性丙型肝炎患者的血清HCV基因型和RNA含量与ALT和AST水平不相关

目的研究HCV基因型、RNA含量与肝损伤指标的相关性。方法对来自14家医院的208例慢性丙型肝炎患者的血清进行ALT、AST检测，采用罗氏公司的Cobas Amplicor HCV Monitor Test version2．0（v2．0）试剂进行HCV RNA定量和Simmons酶切分型方法进行HCV基因分型检测，分析HCV基因型、HCV RNA含量与ALT、AST水平及AST／ALT比值的相关性。结果本研究的208例慢性丙型肝炎患者中，基础HCV RNA含量与ALT、AST水平及AST／ALT比值没有相关性（r值分别为0．093、0．092、0．009，均P〉0．05），高病毒含量组（≥8．5×10^5IU／ml）与低病毒含量组（〈8．5×10^5IU／ml）比较ALT、AST水平及AST／ALT比值的差异无统计学意义（P=0．101、0．052、0．746）；HCV基因1型与非基因1型之间ALT、AST、AST／ALT的差异无统计学意义（P=0．406、0．461、0．528），HCV基因1型与非基因1型之间RNA含量差异无统计学意义（P〉0．05）；治疗结束时病毒应答组和非应答组比较的ALT、AST水平及AST／ALT比值的差异无统计学意义（P=0．443、0．641、0．942），随访结束时，病毒应答组和非应答组的ALT、AST水平及AST／ALT比值的差异无统计学意义（P=0．201、0．411、0．76）。结论慢性丙型肝炎患者的HCV基因型和RNA病毒含量与肝损伤指标没有相关性。

沈阳地区乙型肝炎病毒基因型分子流行病学研究

目的研究沈阳地区乙型肝炎病毒基因型分布和特点。方法应用半巢式聚合酶链反应(PCR)扩增乙型肝炎病毒P基因,将PCR产物应用ABI377自动测序仪直接做核苷酸序列分析,并用DNASTAR软件进行种系发生分析及基因型鉴定。结果HBVDNA标准株P基因片段可进行基因分型。在沈阳地区慢性HBV感染者中可检出基因型B、C和D,检出率分别为22%、50%和28%,基因型C分布与基因型B、D的差异有统计学意义,在慢性乙型肝炎患者和慢性HBV携带者间各基因型间分布比较中差异无统计学意义。结论通过测定HBVDNAP基因序列片段可进行HBVDNA基因分型。沈阳地区乙型肝炎病毒基因型有基因型B、C和D型,其中基因型C为优势基因型。