自由基对海马神经元的损害及人参皂甙保护作用的免疫组化研究

目的：探讨自由基对海马神经元胆囊收缩素（ Ｃ Ｃ Ｋ）的损害及人参皂甙的抗损害作用。方法：对１８ ｄ Ｗｉｓｔａｒ 大鼠胚胎海马神经元进行培养。培养第４ 天随机分为正常组、自由基组和人参皂甙组。采用免疫组化结合图像分析检测其灰度值，进行统计学分析及处理。结果：自由基作用２４ ｈ，自由基组 Ｃ Ｃ Ｋ８ 含量明显低于正常组（ Ｐ ＜００１），而人参皂甙组 Ｃ Ｃ Ｋ８ 含量接近正常组（ Ｐ＜ ００５）。结论：自由基可降低海马神经元 Ｃ Ｃ Ｋ 含量，人参皂甙可增加 Ｃ Ｃ Ｋ 含量。说明自由基具有影响 Ｃ Ｃ Ｋ 等多肽合成，人参皂甙具有较强的抗氧化作用。

人脑伏核的应用解剖学研究

目的:探索人脑伏核的位置关系和分部;伏核联系纤维伏核蒂的位置及走向;测定有应用价值的数值。以期对今后伏核的研究,为用立体定向外科手术进行戒毒治疗开阔思路,提供解剖学参考资料。方法:共用11个成人脑。应用朱加也娃提出并详细阐述的,经过特殊预处理后的人脑精细解剖方法。按设计的项目测量、统计、数码摄像。结果:人脑伏核埋伏於尾-壳核、内囊前肢的腹侧和钩束形成的薄板之间。内侧依偎隔区,外侧是外囊。伏核分为内侧与外侧两部分。核的前端缩窄被大脑白质包裹,后端横宽紧靠前连合。伏核强大的联系纤维就存在于后端围绕着前连合。伏核联系纤维也分为内、外侧两部分。伏核联系纤维内侧部主要走向终纹、丘脑、大脑水管周围和中脑腹侧。外侧部趋向嗅结节、前穿质等脑底结构。结论:伏核仅其内侧部依偎于隔区,故称为伏核比叫伏隔核更确切。伏核内侧部和许多具有重要生理功能的脑结构相连是伏核的核心部分。伏核在腹侧纹状体和基底前脑中占有重要位置。

猫空肠回肠初级感觉神经元的定位研究

本文应用HRP逆行标记法研究猫空肠回肠初级感觉神经元的形态、大小和定位分布。猫空、回肠初级感觉纤维来自双侧T_3～L_5脊神经节和双侧迷走神经下节,脊神经节的集中分布节段是T_(10)～L_3节段。但空肠和回肠初级感觉神经元的集中分布节段有所不同,空肠是T_(10)～L_2脊神经节,回肠是T_(12)～L_2脊神经节。分布特点符合既分散又集中的分布模式。空肠和回肠初级感觉神经元的形态多呈椭圆形、圆形,少数为不规则形。细胞大小以中小型为主,又以中型为多。标记细胞在脊神经节和迷走神经下节内呈弥散性分布。

猫前庭神经下核和内侧核向小脑蚓部皮质的投射——WGA-HRP顺行追踪研究

将麦芽凝集素-棘根过氧化物酶(WGA-HRP)注入猫前庭神经下核(DVN)或内侧核(MVN),观察标记终末在小脑蚓部皮质的分布。结果表明:标记终末分布区在整个小脑蚓部呈边缘不整齐的锯齿状纵长带状分布,此带最宽处距正中线向外约3.0mm,最窄处约0.8mm。标记终末主要分布在小脑小叶的根部和中间部,位于两侧的蚓部,同侧的标记终末数量多于对侧。在首裂附近和Ⅸ、Ⅹ小叶有两个密集分布区。前叶和后叶(包括Ⅹ小叶)的标记终末数量大约相等。

大鼠肾上腺髓质交感节前神经纤维的分布——PHA-L顺行追踪法研究

用PHA-L顺行追踪法观察大鼠肾上腺髓质内交感节前神经纤维的来源、走行和分布特征.结果表明,来自胸8～10节段脊髓侧柱分布到肾上腺髓质的交感节前神经纤维,随内脏大神经走行,而后又成为内脏大神经的分支进入并通过肾上腺神经节,向内下方走行,在肾上腺内侧缘分成2～3支后,分别在肾上腺被膜内走行一段距离或立即进入肾上腺.在皮质内无分支,以若干小神经束穿经皮质到达髓质;在髓质内以粗细不等的纤维分散走行在髓质细胞索之间,在走行中逐渐分为多种形态的终末支,有的为带为许多膨体的树枝状分支,有的为带有许多膨体的终末支形成丛状或网状,并且再分支分布于髓质细胞之间.

实验性哮喘豚鼠内脏感觉传入部位SP免疫反应的研究

用免疫组织化学方法结合显微图像分析 ,观察哮喘豚鼠脊神经节、结状神经节、脊髓和孤束核内 P物质的变化。正常豚鼠 C7～ T5 脊神经节及结状神经节内存在 SP阳性反应细胞 ,其细胞质内充满棕色阳性反应颗粒 ,并可见大量的阳性反应纤维。 P物质免疫反应也见于 C7～ T5 脊髓后角板层 、板层 、中间带外侧核 ,呈点状分布 ,偶见阳性纤维。孤束核内可见大量的 P物质阳性反应。哮喘豚鼠结状神经节、C7～ T5 脊神经节和相应节段脊髓后角、孤束核内 P物质阳性反应的密度明显增多而平均灰度值却明显地低于对照组。上述结果表明 ,哮喘豚鼠内脏感觉传入部位 P物质表达增强 ,提示这些部位的

新型胆碱酯酶抑制剂对阿尔茨海默病作用的生物化学研究

目的:探讨新型胆碱酯酶抑制剂(活性物质)对阿尔茨海默病(Alzheimerdisease,AD海马结构的生物化学影响,为AD患者的临床治疗提供可)靠的基础研究资料。方法:实验选用40只3～5月龄雄性Wistar大鼠,其中30只大鼠切断穹窿海马伞制作AD动物模型。术后第8天静脉给予新型胆碱酯酶抑制剂进行治疗,然后采用分光光度计对各组海马结构分别进行生化检测。结果:海马结构细胞胞浆的乙酰胆碱酯酶(AchE)活性测定:活性物质组的酶活A/蛋白A的均值为0.223±0.058,每毫克蛋白酶活A为0.881±0.051。单纯损伤组分别为0.402±0.193和1.558±1.299,两组比较差异有显著性意义(P<0.01)。红细胞膜AchE活性测定:单纯损伤组的酶活A/蛋白A的均值为0.62±0.09。给药后的活性物质组为0.55±0.08,石杉碱甲组为0.62±0.14。活性物质组与单纯手术组比较差异有显著性意义(P<0.01)。结论:新型胆碱酯酶抑制剂(活性物质)具有较强的抑制乙酰胆碱酯酶的作用,其抑制作用大于石杉碱甲,并对AD具有一定的治疗作用。

豚鼠下呼吸道K物质放射免疫及免疫组织化学研究

应用放射免疫分析方法测定了16只豚鼠下呼吸道内K物质的含量。结果表明,肺内含量最高,支气管次之,气管最低。应用ABC免疫酶组织化学方法研究了K物质免疫反应纤维在16只豚鼠下呼吸道的分布,结果指出,K物质免疫反应纤维分布于:1)各级呼吸道粘膜固有层、粘膜下层、平滑肌内及外膜层;2)肺内各级血管壁内平滑肌层,外膜层及二者的交界处,以及血管周围的结缔组织内;3)肺泡隔内。本文并讨论了K物质与某些呼吸道疾病的发病之间可能的联系。

大鼠海马CA3区神经元突触的老龄性改变

目的 :观察老龄大鼠海马CA3区神经元突触超微结构的改变 ,探讨老龄动物海马学习记忆功能减退的形态学基础。方法 :应用透射电镜技术 ,观察青年组 (3～ 5月龄 )和老龄组 (2 4～ 2 6月龄 )Wistar大鼠海马神经元的超微结构。结果 :老龄组海马CA3区神经元的主要变化 :突触连接缩短或间断、突触前后膜融合 ;突触小胞大量集聚、小胞大小不等 ;树突棘内棘器远离突触后膜 ,其扁平小囊增多并扩张。结论 :老龄大鼠海马CA3区神经元突触发生了明显的变性改变 ,这可能是导致学习记忆障碍的形态学基础。

氧自由基对胎鼠海马神经元ATPase和SOM的影响及人参皂甙的保护作用

目的 :观察氧自由基对培养的胚胎海马神经元三磷酸腺苷酶 (ATPase)和生长抑素 (SOM)含量的影响以及人参皂甙 (Gin)的抗自由基作用。方法 :在细胞培养第 5天给以黄嘌呤 -黄嘌呤氧化酶 (X- XO)体系建立氧自由基损伤模型 ,并分别同时给以 Gin超氧化物岐化酶 (SOD)以及 Gin+SOD,采用组化及免疫组化染色观察各组ATPase及 SOM含量变化。结果 :X- XO组 ATPase及 SOM含量均低于对照组及各实验组 (P <0 .0 1) ,Gin+SOD及 ATPase及 SOM含量均高于 Gin及 SOD)组 (P <0 .0 1)。结论 :氧自由基可降低 ATP ase和 SOM含量 ,Gin、SOD可增加 ATPase和 SOM含量 ,二者联合应用优于单独应用。提示 Gin可能具有 SOD样作用或激活体内

氧自由基损伤海马神经元及人参皂甙的保护作用

采用胎龄 18天大鼠海马神经元进行培养 ,第 5天以黄嘌呤 -黄嘌呤氧化酶 (X- XO)体系建立氧自由基损伤模型 ,并分别给与人参皂甙 (Gin)、超氧化物歧化酶 (SOD)、Gin+ SOD,观察氧自由基对神经元的损伤及 Gin、SOD的保护作用 ,结果表明 :氧自由基组细胞死亡率明显高于正常组 (P<0 .0 1) ,各抗自由基组细胞死亡率接近正常组 (P>0 .0 5 ) ,自由基组神经元细胞器严重受损 ,脂褐素增多 ,核变形偏位 ,胞浆与胞核比例减少 ,而各抗自由基组上述损伤减轻 ,提示 Gin和 SOD可增强神经元抗氧化能力 。

大鼠脊髓不完全性损伤后前角运动神经元的酶细胞化学改变

以改良Ａｌｅｎ氏法造成Ｗｉｓｔａｒ大鼠不完全性脊髓损伤，采用神经学功能评分法评定大鼠运动功能，应用定量酶细胞化学方法观察脊髓前角运动神经元内乙酰胆碱酯酶（ＡＣｈＥ）和酸性磷酸酶（ＡｃＰ）活性变化。结果显示：１．脊髓损伤后大鼠运动功能障碍，随后逐渐恢复。２．前角运动神经元内ＡＣｈＥ活性减弱、ＡｃＰ活性增强；随后酶活性呈逐渐恢复，四周时ＡＣｈＥ活性基本恢复正常。结果说明：大鼠脊髓不完全性损伤后运动功能变化与前角运动神经元的功能状态具有较强的相关性；前角运动神经元在不完全性脊髓损伤运动功能恢复中起重要作用。

神经激肽A免疫反应在哮喘豚鼠脊髓中的定量分析

用免疫细胞化学ＡＢＣ法结合显微图像定量分析，研究了神经激肽Ａ（ＮＫＡ）免疫反应物在哮喘豚鼠脊髓中的分布及其变化。结果表明，ＮＫＡ免疫反应纤维及终末分布于豚鼠Ｃ７～Ｔ５段脊髓后角Ⅰ～Ⅲ层和背外侧索核区，ＮＫＡ样阳性免疫反应物的平均密度在前者为４２．２％，后者为３７．２％；它们的平均灰度值分别为１３４．７和９２．９，与对照组（平均密度分别为２７．２％和２４．９％，平均灰度值分别为１９９．９和１２９．２）比较均有显著性差别（Ｐ＜０．０１）。这些研究结果提示脊髓内ＮＫＡ可能参与了哮喘发作的神经病理生理机制，是其发作的重要因素之一。

X线对培养脊髓神经元生存能力的影响

目的 :观察射线对神经元存活能力的影响。方法 :应用大鼠 E1 8脊髓细胞 ,在培养第 2天进行 4Gy X线定量照射。结果 :培养 1、2、3、4周时 ,神经元分别占生存细胞的 89.31%、96 .78%、80 .42 %、46 .42 % ,明显高于对照组。结论 :该方法能获得较大数量的存活神经元细胞 ,可以增加对神经元研究观察的时间跨度 。

实验性哮喘豚鼠延髓内神经激肽A免疫反应的定量分析

应用免疫组织化学ABC法结合显微图像定量分析,研究了神经激肽A免疫反应在哮喘豚鼠延髓中的分布及其变化.结果表明:神经激肽A免疫反应细胞纤维或终末分布于豚鼠的延髓的弧束核区.腹外侧面浅表区,三叉神经脊束核区及网状结构等区域.此外,哮喘豚鼠延髓孤束核及腹外侧部浅表区内神经激肽A阳性免疫反应物的平均密度分别为49.2%和41.6%;它们的平均灰度值分别为129.6和110.5,与对照组(平均密度31.7%和28.8%;平均灰度值:183.7和165.2)比较均有显著性差异(P<O.01).结果提示:延髓内神经激肽A可能参与哮喘发作的神经病理生理机制,是其发作的重要因素之一.

猫十二指肠的植物神经支配

用HRP逆行标记法研究猫十二指肠的植物神经支配。十二指肠的交感节后神经元位于腹腔神经节、肠系膜前神经节和双侧T_6-L_2交感干神经节。前二者和后者数量之比是18:1.腹腔神经节和肠系膜前神经节内的标记细胞有局部定位分布的特点,即多集中在节的右后半部。交感干神经节的标记细胞较集中分布于 T_8-T_(13),并以右侧占优势(占59.45％)。十二指肠的副交感节前神经元位于双侧的迷走神经背核,平闩上下各1mm范围内较为集中。

下呼吸道的P物质能神经纤维

应用ABC免疫酶组织化学方法研究P物质免疫反应纤维在豚鼠和大白鼠下呼吸道内的定位分布。这些纤维主要分布在气管、支气管、肺内各级支气管的粘膜上皮、平滑肌、外膜疏松结缔组织、肺泡隔和肺内血管壁及其周围。呼吸道粘膜的基膜和神经上皮体也呈P物质阳性反应。

腹腔-肠系膜上神经节内腹部内脏器官的代表区

目的 探讨支配腹部内脏器官的交感节后神经元在腹腔 -肠系膜上神经节内的代表区。 方法 用HRP逆行标记法 ,显微镜描图仪做连续切片描图记录 ,计数标记细胞的面数密度 ,并经统计学处理。 结果 猫脾、胰、肾、十二指肠和空回肠交感节后神经元在腹腔 -肠系膜上神经节内具有各自的集中分布区和分散分布区 ,亦即各自的局部定位区。支配脾的交感节后神经元集中区位于该节的左侧上部 ;支配胰的交感节后神经元集中区位于该节两侧的上中后部 ;支配左、右肾的交感节后神经元集中区位于该节的中下部的两侧 ;支配十二指肠的交感节后神经元集中区位于该节的右侧后上部 ;支配空回肠的交感节后神经元集中区位于该节的两侧中下部。支配上述各器官的交感节后神经元的分散区则分别位于其各自集中区的周围。 结论 腹腔 -肠系膜上神经节内存在上述器官各自的功能代表区。

大鼠胚胎下丘脑神经细胞的体外原代培养

本文采用体外原代培养技术,详细观察和描述了大鼠胚胎下丘脑神经元在体外的形态发育过程,在国内首次建立了稳定的胚胎下丘脑神经元培养模型。结果表明:细胞培养4h,大部分细胞已贴壁;12h,部分细胞开始向外伸出小的突起;24h,部分细胞成为具有两个突起的神经元;3天时,神经元胞体增大,部分细胞为具有3个突起的神经元;1周后,神经细胞突起互相连接成网,细胞突起随培养时间延长而增多;第4周时,细胞开始减少,但仍可见较大的、具有多个突起的神经元。本文还对细胞培养过程中胚胎胎龄的选择、细胞分离的方法等问题进行了讨论。

实验性哮喘下呼吸道神经激肽B免疫反应纤维

用免疫组织化学方法研究了神经激肽B免疫反应纤维在实验性哮喘豚鼠下呼吸道的变化。在气管和支气管,实验组一抗最佳稀释浓度为1:1500,对照组为1:1000,当两组的一抗浓度均为1:1500时,两者的神经激肽B免疫反应纤维见于平滑肌层,上皮内、上皮和平滑肌交界处以及外膜层,实验组的纤维数量明显多于对照组。在肺组织,实验组一抗最佳稀释浓度为1:2000,对照组为1:1500,当一抗稀释浓度均为1:2000时,两组的神经激肽B免疫反应纤维主要见于肺内各级支气管平滑肌层、血管壁平滑肌层、血管周围结缔组织和肺泡隔内,但实验组的阳性纤维数量明显比对照组多。