多元化教学模式在药剂学教学中的应用与探索

根据作者所在校药剂学教学中存在的相关问题,采用启发式教学、讨论教学、案例教学、直观教学及联系教学等多元化教学模式,并结合学科前沿内容在教学中进行应用与探索。多元化教学模式在药剂学教学过程中能够激发学生学习兴趣,提高学习动力,有助于学生综合能力的培养,提高了教学质量,取得了良好效果。

利用互动教学模式进行药剂学双语教学的探讨

药剂学是药学相关专业的主干专业课程,而药剂学双语教学是为了使学生适应国际化发展趋势提出的新要求。本教研室对药剂学课程进行教学改革,将国内外药学教育领域成功运用并不断推广的互动教学模式应用于药剂学双语教学,培养具有自主学习和批判性思维能力,同时具有国际化意识和交流能力的药剂学人才。教学改革中注重师资培养,使教师能够运用灵活的教学手段提高双语教学水平。教学双方互帮互学,共同进步,取得了理想的教学效果。

葛根素及葛根提取物在大鼠体内药代动力学研究

目的考察葛根素及葛根提取物在大鼠体内的药代动力学差异。方法大鼠分别灌胃给予葛根素(500mg/kg)或葛根提取物(相当于葛根素500 mg/kg),在不同时间点采血,以对羟基苯甲酸为内标,应用高效液相色谱法测定葛根素血药浓度,采用DAS 2.0软件计算药动学参数。结果葛根素及葛根提取物在大鼠体内药动学过程均符合二室模型,比较二者主要药动学参数:提取物组较葛根素组的AUC0-t、Cmax显著降低,Tmax、t1/2z、CL/F及Vz/F显著增加。结论葛根素及葛根提取物的主要药动学参数具有显著性差异,葛根提取物中复杂成分的存在能影响其有效成分葛根素的体内药动学行为。

不同剂量葛根素在大鼠体内的药代动力学

目的比较不同给药剂量下葛根素在大鼠体内的药代动力学。方法大鼠分别灌胃给予低、中、高剂量(250、500、750mg·kg-1)的葛根素,按实验设计在不同时间点采血,应用高效液相色谱法测定葛根素血药浓度,采用DAS2.0软件计算药动学参数。结果葛根素在大鼠体内药动学过程均符合二室模型;低、中、高3个剂量组的Tmax、MRT均无显著性差异;中剂量组t1/2z与高剂量组、低剂量组均有显著性差异;Vz/F、CLz/F与剂量基本呈线性关系;在250～500mg·kg-1剂量内,AUC与剂量基本呈线性关系,剂量增加至750mg·kg-1时,AUC无明显增加。结论不同给药剂量的葛根素在大鼠体内药动学过程存在差异,给药剂量在250～500mg·kg-1内,葛根素体内药动学行为呈线性关系,给药剂量在500～750mg·kg-1内,葛根素的药动学行为呈非线性关系。

2种苯磺酸氨氯地平片的相对生物利用度及生物等效性对比分析

目的研究2种苯磺酸氨氯地平片的相对生物利用度及其生物等效性。方法采用双周期、随机、交叉试验设计,将20名男性健康受试者随机分成2组,单剂量、交叉口服受试制剂及参比制剂苯磺酸氨氯地平片10 mg,采集不同时间点的静脉血样,用超高效液相色谱—串联质谱法测定给药后不同时间氨氯地平的血药浓度。结果受试试剂及参比试剂的主要药代动力学参数如下:Tmax分别为(6.32±0.85)h和(5.95±1.23)h;Cmax分别为(6.231±1.734)ng·mL-1和(6.138±1.352)ng·mL-1;T1/2分别为(39.89±9.43)h和(40.02±7.49)h;AUC0-144分别为(273.473±97.167)ng·h·mL-1和(278.314±80.340)ng·h·mL-1;AUC0-∞分别为(303.480±106.054)ng·h·mL-1和(306.412±91.351)ng·h·mL-1。受试制剂对参比制剂的相对生物利用度为(99.7±20.2)%。统计分析结果表明2种苯磺酸氨氯地平片在不同制剂间和不同周期间差异无统计学意义(P>0.05)。结论苯磺酸氨氯地平片的受试制剂与参比制剂具有生物等效性。

一测多评法在中药药物分析中的应用进展

目的:为进一步探索和推广一测多评法在中药药物分析中的应用提供参考。方法:查阅近年国内发表的相关文献,进行整理、归纳和总结。结果与结论:一测多评法作为一种中药多指标质量控制方法,目前已在中药材、饮片、提取物及中药制剂多个有效成分含量测定方面得到了广泛的研究和应用,而超高效液相色谱法和高效液相色谱-质谱-电雾式检测法等新技术也逐渐被引入一测多评法分析中。一测多评法应用于中药药物分析具有准确、可靠、高效等优点,有良好的发展前景,但该方法在发展和推广应用过程中还面临很多课题需要攻克。

卡莫氟固脂纳米粒对人大肠癌细胞多药耐药的逆转的机制研究

研究卡莫氟固脂纳米粒对人大肠癌细胞多药耐药的逆转作用,并对其逆转机制进行了初步探讨。采用MTT法比较了卡莫氟不同药物形式的细胞毒作用;采用RT-PCR技术考察卡莫氟固脂纳米粒对敏感和耐药人大肠癌细胞中mdr 1和MRP的基因表达的影响。卡莫氟固脂纳米粒能下调耐药人大肠癌细胞中mdr 1的mRNA表达,对其中的MRP的mRNA的表达没有显著影响。卡莫氟固脂纳米粒能逆转人大肠癌细胞由mdr 1介导的多药耐药,而对MRP介导的多药耐药没有显著影响。

钙/钙调蛋白激酶Ⅱ信号系统与心血管疾病

CaMKⅡ是钙/钙调蛋白激酶(Ca2+/calmodulin-dependent protein kinase,CaMK)成员之一。心脏中的CaMK包括Ⅰ,Ⅱ和Ⅳ三种类型,CaMKⅡ含量最多。CaMKⅡ单体由氨基端的催化域、中间部分的调节域和羧基端的结合域组成。钙调蛋白(calmodulin,CaM)与Ca2+结合后被激活,结合于CaMKⅡ调节域中的CaM结合区激活CaMKⅡ。CaMKⅡ富集于T管并靠近L-Ca2+通道,也存在于肌浆网和细胞核中。激活的CaMKⅡ通过多种途径调节细胞内Ca2+平衡,广泛参与心血管系统生理活动及病理变化的信号转导过程,与多种心血管系统疾病密切相关。目前研究认为,CaMKⅡ信号系统在心律失常、心肌肥厚、心力衰竭、缺血性心脏病和扩张性心肌病的发生和发展中起着重要作用。

氟罗沙星胶囊的人体药代动力学和相对生物利用度

目的建立人血浆中氟罗沙星测定含量的HPLC法,评价氟罗沙星胶囊在健康人体内的药动学及生物等效性。方法20名健康男性受试者单剂量交叉口服200mg氟罗沙星供试胶囊或参比胶囊后,不同时间点的血药浓度,采用HPLC法测定氟罗沙星的血药浓度,并计算其药动学参数和相对生物利用度,评价两制剂的生物等效性。结果氟罗沙星供试胶囊与参比胶囊的主要药动学参数分别为:AUC0(-tμg·h/ml)分别为32.99±4.85和29.84±3.08;Cma(xμg/ml)为2.938±0.530和2.897±0.545;Tma(xh)为1.09±0.31和1.10±0.43;T1/(2h)为15.19±2.62和14.48±2.07。以参比制剂为标准,受试制剂的生物利用度为(110.7±13.4)%,受试制剂与参比制剂相比,生物利用度无显著性差异(P>0.05)。结论两制剂具有生物等效性。

部分纯化的牛心细胞质提取物对心肌细胞膜“run-down”L-型钙通道活性的恢复作用

目的研究牛心细胞质部分纯化提取物及钙调蛋白激酶Ⅱ(CaMKⅡ)对大鼠心肌细胞膜L-型钙通道活性的调节作用。方法采用常规的蛋白提取方法制备牛心细胞质提取物,离子交换方法进行部分纯化。应用膜片钳制技术的细胞贴附和膜内向外记录模式记录大鼠心室肌细胞单通道钙电流,观察牛心细胞质部分纯化提取物和CaMKⅡ对"run-down"L-型钙通道活性的恢复作用。Western blot方法验证活性蛋白。结果膜内向外记录模式下,L-型钙通道出现"run-down"现象,活性下降至细胞贴附记录模式的(0.46±0.15)%;牛心细胞质部分纯化提取物使"run-down"的通道活性恢复至细胞贴附记录模式的(44.29±13.51)%(P<0.01),加入CaMKⅡ抑制剂KN-62(1μmol/L)后活性仅恢复至(1.30±0.94)%,与未加抑制剂组相比差异有统计学意义(P<0.05);Western blot方法验证牛心细胞质部分纯化提取物中含有CaMKⅡ;基因重组融合蛋白法制备的CaMKⅡ也可将"run-down"后的钙通道活性恢复至细胞贴附记录模式的(71.59±14.76)%(P<0.05)。结论牛心细胞质部分纯化提取物对"run-down"钙通道活性具有恢复作用,该作用可能与CaMKⅡ密切相关。

大鼠慢性肝损伤的线粒体功能障碍及其影响

目的研究大鼠慢性肝损伤中线粒体功能障碍及能量异常。方法给予大鼠皮下注射50%四氯化碳大豆油溶液,制备慢性肝损伤模型,测定肝组织细胞线粒体膜电位、膜肿胀度、细胞内辅酶ⅠNAD (H)含量、三磷酸腺苷(ATP)含量。结果与对照组相比,模型组大鼠肝细胞线粒体膜电位水平、膜肿胀度水平、辅酶ⅠNAD (H)、ATP水平明显降低(P <0.05),随着造模时间的延长,损伤程度逐渐增加(P <0.01)。结论在四氯化碳致大鼠慢性肝损伤模型中,肝脏线粒体功能受损,能量代谢异常,提示肝脏线粒体功能障碍所致能量代谢异常在临床肝脏疾病中具有重要意义。

雌雄小鼠肝脏中I相代谢酶的mRNA表达谱

将6个月不同性别的C57BL/6小鼠分为雌、雄两组(n=6),分别取其肝脏,以荧光定量PCR(Real time quantitative PCR,RT-qPCR)测定肝脏中I相代谢酶mRNA的相对表达量。在分析的24个I相代谢酶中有8个代谢酶(Cyp2b9、Cyp4a14、Cyp2b10、Cyp2b13、Cyp4a10、Cyp2c38、Fmo3、Nqo1)的mRNA水平在雌性小鼠肝脏中高表达(P<0.01或P<0.05);5个代谢酶(Cyp4a12、Cyp7b1、Cyp2d9、Fmo5、Cess2c)的mRNA水平在雄性小鼠肝脏中表达较高(P<0.01或P<0.05);其它I相代谢酶在雌雄小鼠肝脏中的mRNA表达没有显著性差异。研究显示,性别差异显著影响小鼠肝脏中I相代谢酶的mRNA表达谱,这将导致药物在药动学和药效学方面的个体差异。

卡莫氟在Caco-2细胞模型中的吸收和转运特性

目的应用Caco-2细胞模型对卡莫氟(carmofur,1-hexylcarbamoyl-5-fluorouracil,HCFU)的吸收、转运特性及其机制进行研究。方法分别考察时间、pH、浓度及抑制剂对HCFU吸收的影响;测定药物在不同时间双向转运的速度,计算HCFU的表观渗透系数,研究不同药物浓度对其转运的影响。结果Caco-2细胞对HCFU的吸收在20min内呈线性,药物摄取时间定为10min;pH对HCFU的吸收没有显著影响,浓度依赖性结果显示,HCFU的吸收由一个饱和成分和一个非饱和成分组成;P-糖蛋白(P-glycoprotein,P-gp)抑制剂维拉帕米对HCFU的吸收基本没有影响,而耐药相关性蛋白(MRP)抑制剂MK571的存在可显著增加对HCFU的吸收(P<0.05)。双向转运的表观渗透性存在方向性差异,且受浓度的影响。结论HCFU在Caco-2细胞中以主动和被动2种形式吸收,其吸收存在外排机制,MRP2可能对HCFU的吸收有外排作用。

5-氟尿嘧啶与卡莫氟的理化特性对其渗透性的影响

目的应用Caco-2细胞模型研究5-氟尿嘧啶(5-fluorouracil,5-FU)和卡莫氟(carmofur,HCFU)的渗透性并探讨物理化学性质如logP、pKa值、分子量及水溶性等对两者渗透性的影响。方法实验中应用的5-氟尿嘧啶和卡莫氟的pKa值、水溶性等由文献获得,logP值用HyperChem V5.0软件中的ChemPlus模块计算得到;用跨膜电阻值(transepithelial electricalresistance,TEER)和荧光黄检测细胞完整性,进行渗透实验,计算表观渗透系数(apparent permeability coefficients,P_(app))。结果 5-氟尿嘧啶和卡莫氟的logP值分别为-0.96和2.63;细胞的TEER值维持在760～965 Ω·cm^(-2)之间;荧光黄的P_(app)值为(1.89±0.78)×10^(-7) cm·s^(-1),细胞融合形成了连续的单层细胞膜,且其紧密性和完整性良好;HCFU的P_(app)值约是5-FU的P_(app)值的10倍。结论 logP值对5-氟尿嘧啶和卡莫氟在Caco-2细胞模型中的渗透性起决定作用,5-氟尿嘧啶和卡莫氟的理化特性对两者的渗透性有不同的影响。

纳米药物输送系统提高肿瘤多肽疫苗效应的研究进展

作为一种新的治疗策略,免疫疗法正让抗肿瘤治疗步入"新时代",肿瘤多肽疫苗也随之展现出良好的应用前景。将纳米药物输送系统应用于肿瘤多肽疫苗,成为近年来的研究热点。纳米药物输送系统作为纳米佐剂,具有提高多肽稳定性、靶向传递抗原、促进抗原的摄取和递呈、激活抗原特异性免疫应答等作用;可通过多种途径提高肿瘤多肽疫苗的免疫效应和治疗效果。笔者结合国内外研究前沿,对纳米药物输送系统提高肿瘤多肽疫苗免疫应答的作用机制、递药模式、药效学等内容进行归纳和总结。同时,对纳米药物输送系统递送肿瘤多肽疫苗所面临的困境进行了初步分析和展望。

不同性别小鼠肝脏中Ⅱ相代谢酶的mRNA表达

该研究考察了性别差异对小鼠肝脏Ⅱ相代谢酶的mRNA表达的影响。将6月龄不同性别的C57BL/6小鼠分为雌、雄两组(n=6),分别取其肝脏。以荧光定量PCR(Real-time quantitative PCR,RT-qPCR)测定肝脏中II相代谢酶mRNA的相对表达量。在分析的19个II相代谢酶中,有4个代谢酶(Ugt1a1、Sult1a1、Sult2a2和Sult3a1)的mRNA水平在雌性小鼠肝脏中高表达(P<0.01或P<0.05);6个代谢酶(Ugt2b1、Ugt2b5、Ugt2b35、Sult5a1、Gstp1和Gstp2)的mRNA水平在雄性小鼠肝脏中表达较高(P<0.01或P<0.05);其他检测的II相代谢酶在雌雄小鼠肝脏中的mRNA表达没有显著性差异。性别差异显著影响小鼠肝脏中II相代谢酶的mRNA表达,这将导致药物在药效和毒性方面的个体差异。