七年制医学遗传学实验教学效果调查分析

通过问卷方法调查我校首次开设的医学遗传学实验课在教学内容、教学方法等方面所做的初步探索,及时总结经验并提出改进措施。精选实验内容激发学生学习兴趣、重视锻炼学生实验动手能力和启发式教学下,保证了实验课良好的教学效果。

面向21世纪医学遗传学教学改革初探

医学遗传学是生命科学最前沿学科之一，近二十多年来分子生物学的飞速发展有力地推动了医学遗传学前沿领域和各学科交叉领域的深入研究。细胞分子遗传学的新理论、新知识、新概念、新技术促进了临床医学各学科的发展，临床各学科与医学遗传学相结合促进形成了新的分子医学...

医学遗传学教学中合理运用PBL教学模式的探索

PBL（problem—based learning，以问题为基础的学习）以学生为教学环节的中心位置，注重发挥学生的主观能动性，引导学生主动发现问题、解决问题，并在解决问题的过程中培养医学专业素质，加强学生将理论与实践有机结合的综合能力，同时也促进指导教师业务水平的提高，有效做到了教学相长，并得到了国内外众多学者的一致认同。PBL教学模式针对实际情况，有选择、有适用范围地引入医学遗传学教学体系中，本文主要对其教学效果进行了总结。

癌基因遗传学

癌症是威胁人类生命最严重的疾病之一。癌细胞的遗传性损伤在癌研究领域中占据中心地位。癌可能是一种基因的疾病(A maladg of genes。1986年Ram、S.,Verma提出了癌基因遗传学(onoogene-

喉鳞状细胞癌的遗传学研究概况

喉癌是人类常见的恶性肿瘤之一，在头颈部肿瘤中占有很大比例，病理分型主要以鳞状细胞癌为主，占全部喉癌的９３％～９９％，在世界各国发病率均呈上升趋势，严重危害人类身心健康。与其它常见的恶性肿瘤相比，对喉癌遗传机制研究较少。本文从细胞遗传学和分子遗传学水平综述了与喉鳞状细胞癌发生相关的染色体数目和结构畸变、癌基因、抑癌基因及杂合性丢失，旨在深入探讨喉癌发生的分子机制，从而制订有效可行的预防、诊断和治疗策略。

喉癌分子细胞遗传学研究进展

喉癌的研究在过去的几年中取得了一定的进展 ,多种分子细胞遗传学技术的应用使我们发现了很多与喉癌密切相关的基因和蛋白质 ,极大地丰富了喉癌相关的分子细胞遗传学的知识 ,本文将对喉癌相关研究的最新进展加以综述。

先天性马蹄内翻足的遗传学研究进展

先天性马蹄内翻足是一种常见的先天畸形，常聚集发生于家族中但不符合典型的孟德尔遗传方式。遗传流行病学研究和复合分离分析提示先天性马蹄内翻足的发生存在着遗传因素的作用，因此探讨马蹄内翻足发生的分子机制将为提高遗传咨询、治疗的水平以及更好的理解足部的发育提供理论基础。

奋斗的历程 辉煌的人生——献给我国著名医学遗传学家孙开来教授

2014年10月初,在沈阳,尊敬的孙开来教授带着太多的艰辛、太多的希望,离开了他眷恋的亲人、他奋斗的学校和他培养的学生,享年80岁.孙开来教授选才、育才、用才独具慧眼,教学、治学、勤学,他以超常的智慧、超前的思维和超人的耕耘,为中国遗传学事业的发展做出了杰出贡献,也铸就了他的辉煌人生.

人类基因组单体型研究在疾病遗传学分析中的意义

随着人类基因组单体型图计划的顺利进行,单体型研究已经逐步应用于疾病研究的各个方面。本文将介绍单体型研究的基本特点和意义,以及目前它在一些常见复杂性疾病遗传学分析中的应用。

中国东北高血压病高发地区人群中G蛋白β_3亚单位825C/T多态分析

应用聚合酶链式反应和限制性片段长度多态技术 (PCR RFLP)检测高血压高发地区人群中 133例高血压病人和 2 5 7例正常人以及一般人群中 98例高血压病人和 110例正常人的GNB382 5C/T等位基因频率和基因型频率 ,同时测定相关的生化指标 ;并进行病历 对照统计学分析。发现GNB3基因虽然不是我国东北高血压人群的主要易感基因 。

中国东北汉族人群WNK4基因多态性与原发性高血压的关联性

目的探讨东北汉族人群WNK4基因多态性与原发性高血压的关系。方法259例原发性高血压患者和235例健康正常对照人群血样应用PCR-RFLP方法检测A589S多态,结果经测序验证,同时检测所有人群的血糖、血脂等生化指标。结果(1)两组研究对象基因型频率间差别无显著性意义(P>0.05),但等位基因频率间差别有显著性意义(P<0.05);(2)GT和TT基因型与收缩压及舒张压升高密切相关(P=0.041,0.032)。结论WNK4基因A589S多态可能与高血压密切相关。

中国北方地区非小细胞肺癌患者表皮生长因子受体基因突变的研究

目的研究中国北方地区非小细胞肺癌(NSCLC)患者肺癌组织表皮生长因子受体(EGFR)基因突变的情况。方法采用PCR扩增和基因测序,检测93例NSCLC患者癌组织EGFR基因外显子19和21的突变情况,并分析其突变与临床特征的关系。结果93例组织标本中共检测到21例EGFR突变(22.6%),其中16例发生在外显子19的缺失突变,5例发生在外显子21的错义突变。男性与女性,吸烟者与非吸烟者,不同病理分型的NSCLC患者基因突变率间差异均有统计学意义(P<0.05)。结论中国北方地区NSCLC患者癌组织的EGFR基因在腺癌、女性、非吸烟者中突变率高,这类患者更适宜靶向药物的治疗。

COL9A1基因与先天性马蹄内翻足相关性的研究

应用限制性片段长度多态性技术结合测序方法,分析了84个先天性马蹄内翻足核心家系COL9A1基因内2个SNP位点rs592121与rs1135056的基因型;应用ETDT软件统计分析各SNP位点基因型与先天性马蹄内翻足的相关性;应用TRANSMIT软件构建单倍型并统计分析单倍型频率是否存在差异;采用半定量RT-PCR方法检测25例马蹄内翻足患儿肌肉及肌腱组织COL9A1基因mRNA的表达。结果发现rs592121及rs1135056位点在先天性马蹄内翻足中均存在传递不平衡(P<0.05)。马蹄内翻足患儿组织中COL9A1基因表达水平高于正常组织(t=4.7500,P<0.05)。提示COL9A1基因可能是先天性马蹄内翻足重要的易感基因。

胃癌发展相关阶段中E-cadherin基因启动子甲基化及蛋白表达的研究

为了研究E cadherin基因启动子甲基化在胃癌发生及发展阶段中的作用 ,我们采用甲基化特异性PCR和免疫组化的方法对异型增生 (2 3例 )、早期胃癌 (2 0例 )和进展期胃癌 (2 0例 )石蜡标本进行启动子甲基化状态及蛋白表达的分析。结果表明E cadherin基因启动子在异型增生、早期胃癌和进展期胃癌中均有甲基化 ,其阳性率分别为78 3% ,80 %和 90 % ,经χ2 检验各病例组与正常组 (30 % )比较均有差异 (P <0 0 5 ) ,但各病例组间没有差异 (P >0 0 5 ) ;进展期胃癌E cadherin蛋白表达全部阴性 ,早期胃癌 70 %阴性 ,异型增生中无蛋白阴性 ,在早期胃癌和进展期胃癌 34例蛋白表达阴性的标本中 31例有启动子甲基化 (91 2 % ) ,蛋白表达与启动子甲基化呈明显负相关 (P <0 0 1)。表明E cadherin启动子甲基化是胃癌发生的早期事件 ,也是胃癌发生。

喉鳞癌Apaf-1基因表达及启动子区甲基化研究

喉鳞癌细胞存在多种癌基因和抑癌基因异常 ,Apaf 1(apoptoticproteaseactivatingfactor 1)基因是诱导细胞凋亡的肿瘤抑制基因。为探讨Apaf 1基因在喉鳞癌发生中的作用 ,应用半定量PCR方法分析Apaf 1的表达用比较基因组杂交 (ComparativeGenomicHybrodization ,CGH)和杂合性丢失 (LossofHeterozygosity ,LOH)分析方法对喉鳞癌病人Apaf 1基因所在的 12 q2 2 2 3区域缺失情况进行研究 ,并用甲基化特异PCR对该基因启动子区甲基化情况进行了分析。结果表明 :11例喉鳞癌组织出现Apaf 1mRNA表达明显下调 ,占 4 0 7% (11/ 2 7) ,而 6例良性喉肿瘤未发现缺失或下调 ;CGH分析发现 ,18例喉鳞癌仅发现 2例存在 12 q2 2 2 3区域缺失 ,未发现扩增 ;LOH分析发现 ,72例喉癌组织Apaf 1基因的 5个多态位点LOH发生频率低 ,分别为 18 2 % (D12S346 )、13 9%(D12S170 6 )、18 2 % (D12S32 7)、2 2 2 % (D12S16 5 7)和 16 6 % (D12S393) ,11例出现Apaf 1mRNA下调的喉癌组织均检测到启动子区甲基化 ,而 16例Apaf 1mRNA表达未下调者仅 1例有甲基化 ,两者有显著差异 (χ2 检验 ,P=0 0 0 0 1)。通过以上结果 ,首次证实Apaf 1基因与喉鳞癌相关 ,在喉鳞癌中Apaf 1基因缺失发生率低 。

细胞角蛋白基因13在喉鳞状细胞癌中缺失和表达的研究

为了探讨细胞角蛋白基因 13(Cytokeratin 13,CK13)在喉癌发生中的作用 ,在CK13基因内部及附近选择 5个微卫星引物进行杂合性丢失 (lossofheterozygosity,LOH)分析 ,于DNA水平间接检测 72例喉鳞状细胞癌患者中该基因的缺失 ,应用NorthernBlot检测 16例喉鳞癌患者的配对肿瘤及癌旁正常组织中CK13基因的表达差异 :同时应用CK13蛋白单克隆抗体对不同分化程度的喉鳞癌组织进行免疫组化染色。结果表明 :5个STR位点均存在LOH ,其中D17S196 4E、D17S2 0 92、D17S791、D17S16 6 5及D17S80 8位点的LOH频率分别为 18.0 3%、2 8.13%、2 7.4 2 %、39.6 8%和 34.85 % ,其中D17S16 6 5位点的LOH频率最高 ,至少一个位点出现LOH的病例高达 77.78% (5 6 / 72 ) ,杂合性丢失与临床分期、淋巴结转移无显著相关 ,但与肿瘤分化程度高低相关 (P <0 .0 5 )。Northernblot结果表明 :16例喉鳞癌患者CK13基因在正常组织中的表达比肿瘤组织显著增强 ,免疫组化结果也显示CK13蛋白在正常组织或高分化肿瘤中的表达明显高于低分化者 ,且存在显著差异 (P <0 .0 1)。证实CK13基因可能在喉鳞状细胞癌的发生中具有重要作用 。

喉癌的比较基因组杂交研究

寻找与喉癌发生进展的相关基因 ,应用比较基因组杂交技术分析了 18例喉癌患者。结果显示 ,每例喉癌细胞染色体均有不同程度的变化 ,包括染色体全部或部分的扩增或丢失。平均每例有 12 9处异常区域 ,丢失多于扩增 ,分别为每例 7 2处和 5 7处。主要为 3q(78% )、5 p(6 1% )、11q(5 6 % )、1q(5 0 % )、8p(4 4 % )、8q(39% )和 15q(39% )的扩增 ;3p(70 % )、5 q(78% )、9p(6 7% )、13q(5 0 % )、1p(4 4 % )和 14q(39% )的丢失。有多条染色体区带上出现特异的扩增或丢失 ,特别是 1p13 2 1(8/ 18)、3p2 1 2 3(14 / 18)、5 p2 1 2 2 (14 / 18)、9p12 pter(10 / 18)和 13q2 1 31(8/18)的拷贝数增加明显 ,而 1q11 2 1(11/ 18)、3q15 2 1(12 / 18)、8p2 2 2 4 (6 / 18)、11q12 13(8/ 18)、15q2 1 2 3(7/ 18)和18p11(8/ 18)区域的丢失为喉癌的特征性变化 ,说明这些区域中存在与喉癌发生发展密切相关的癌基因。

单纯性先天性心脏病中TBX5基因表达异常的机制

为探讨人类单纯性先天性心脏病患者中TBX5基因表达下调的可能原因,应用变性高效液相色谱(DHPLC)方法检测100例单纯性先天性心脏病患者中TBX5基因上游1200bp调控区的突变情况;应用甲基化敏感性限制性内切酶(MS-RE)法检测50例单纯性先天性心脏病患者和5例非先天性心脏病患者心肌组织TBX5基因启动子区两个CpG岛(转录起始点上游-49～-188bp和-247～-464bp处)的甲基化情况;应用P-match软件预测小鼠Tbx5基因上游转录因子Nkx2-5的结合位点,构建Nkx2-5表达载体转染小鼠H9C2(2-1)心肌细胞,RT-PCR及Western blotting检测Tbx5基因表达,凝胶阻滞实验(EMSA)验证Nkx2-5和Tbx5基因的作用。结果在100例单纯性先天性心脏病患者中,未检测到TBX5基因上游1200bp调控区突变;非先天性心脏病患者和单纯性先天性心脏病患者在两个CpG岛存在相同的甲基化;小鼠Tbx5基因转录起始点上游-312～-315bp可能存在Nkx2-5的结合位点,转染Nkx2-5表达载体后Tbx5基因在mRNA及蛋白质水平均有表达增高趋势,Nkx2-5在体外可以与Tbx5基因上游-312～-315bp序列相结合。以上结果提示TBX5基因调控区突变和两个CpG岛的甲基化不是单纯性先天性心脏病患者心肌组织中TBX5基因表达下调的原因,TBX5基因表达下调可能由于NKX2-5的表达异常引起。