TGF-β1反义寡核苷酸对高糖下肾小球系膜细胞分泌MMP-9、TGF-β1、collⅣ的影响

目的观察TGF-β1反义寡核苷酸(antioligodeoxynucleotide,antiODN)对高糖下肾小球系膜细胞分泌MMP-9、TGF-β1、collⅣ的影响。方法采用逆转录PCR(RT-PCR)、酶谱分析法及ELISA法观察TGF-β1antiODN对高糖下系膜细胞表达细胞因子TGF-β1mRNA以及MMP-9、ECM主要成分COLLⅣ等蛋白的调控。结果TGF-β1antiODN可阻止高糖引起的TGF-β1mRNA表达增加,尤其高浓度的TGF-β1antiODN作用明显,48h基本接近正常(与对照组比较p>0.05);TGF-β1antiODN可以阻止高糖下系膜细胞分泌MMP-9蛋白减少及collⅣ增加;TGF-β1正义寡核苷酸(senseoligodeoxynucleotide,senseODN)、TGF-β1错义寡核苷酸(missoligodeoxynucleotide,missODN)无论高浓度还是低浓度都没有上述作用。结论TGF-β1antiODN可以通过减少TGF-β1mRNA的表达而使MMP-9表达接近正常,从而减少系膜细胞外基质的堆积,在糖尿病肾病的治疗方面有重要的参考价值。

内分泌干扰物与糖代谢异常和肥胖

内分泌干扰物（EDCs）是指影响人体生殖发育和内环境稳态相关激素的合成、分泌、转运、代谢、结合或清除过程的外生物质。长期暴露于EDCs能引起糖耐量异常甚至糖尿病，其可能机制包括：影响葡萄糖转运蛋白（GLUT）4mRNA与核因子（NF）KBmRNA比值、促进雌二醇受体a异常及高胰岛素血症的发生。孕期暴露于EDCs会增加子代成年后肥胖的风险，这种影响可能存在性别差异，其潜在机制是EDCs影响脂代谢过程或脂肪细胞的增殖、分化。

糖尿病心肌病心肌细胞纤维化的病理改变

目的研究糖尿病(DM)大鼠不同病程心肌纤维化及其相关病理变化。方法选取18只DM心肌模型后大鼠随机分为DM大鼠1个月组(DM1组)、3个月组(DM3组)、6个月组(DM6组),每组6只。另选18只健康大鼠作为对照组。采用氯胺T法测定羟脯氨酸含量,为心肌胶原总含量。免疫组织化学染色测定心肌胶原蛋白Ⅰ、Ⅲ和心肌细胞心肌型α肌动蛋白(α-actin)及转化生长因子β1(TGF-β1)平均积分吸光度(A)。光镜和透射电镜下观察心肌病理变化。结果DM6组心肌胶原总含量明显高于DM1组和DM3组(P<0.01)。与对照组比较,DM3组心肌胶原蛋白Ⅰ表达伴随TGF-β1的表达开始明显增加(P<0.01)。心肌细胞心肌型α-actin表达较对照组明显减少(P<0.01)。各组大鼠心肌横切面可见粗大胶原纤维相互连接成网状,排列紊乱,分布不匀。α-actin表达明显减少,有糖原沉积现象。结论胶原蛋白Ⅰ呈现持续性增加是DM大鼠心肌纤维化的主要原因。TGF-β1参与了心肌纤维化发生的早期过程。糖原沉积和心肌细胞心肌型α-actin表达减少是DM心肌病的病理基础。

高氟区骨龄延迟青少年血清hGH对L-dopa和Inderal反应的研究

本文探讨高氟区骨龄延迟青少年血清hGH对L-dopa及Inderal双重刺激的反应。结果发现其高峰反应值较同地区及非高氟区骨龄正常青少年明显减低(p<0.01),提示高氟可能作为影响hGH的分泌释放因素。并结合实验原理初探其发生机理。

高糖对人肾小球系膜细胞细胞间黏附分子-1及层黏连蛋白表达的影响

目的探讨高糖对人肾小球系膜细胞表达细胞间黏附分子-1(intercellular adhesion molecule-1,I-CAM-1)及层黏连蛋白(laminin,LN)的影响。方法将培养的人肾小球系膜细胞分为正常糖对照组、高糖组和甘露醇对照组,分别在24、48、72h收集培养液上清,采用ELISA法检测上清液中ICAM-1和LN的表达。结果人肾小球系膜细胞表达ICAM-1在24h开始升高,48h达高峰,72h下降。LN表达呈时间依赖性。且高糖组ICAM-1及LN的表达显著高于正常糖对照组及甘露醇组(P<0.05),正常糖对照组与甘露醇组对比ICAM-1及LN的表达差异无显著性(P>0.05)。结论高糖可导致人肾小球系膜细胞ICAM-1及LN表达增加。I-CAM-1对肾脏可能具有炎性损伤作用,LN的增加表明肾小球系膜外基质的过度表达,二者均可促进糖尿病肾病的发生发展。从而为糖尿病肾病的治疗提供了新靶点。

冠心病和高脂血症红细胞抗氧化酶活性变化的意义

目的 通过测定红细胞两种抗氧化酶 (PHGPx和Cu -ZnSOD)活性和细胞膜氧化产物共轭双烯(CD) ,探讨冠心病和高脂血症的发病机制。方法 分为三组A组 (冠心病不伴高脂血症患者 ) 36例 ,B组 (单纯高脂血症患者 ) 31例 ,C组 (冠心病伴有高脂血症患者 ) 32例 ,D组 (健康对照组 ) 30例。分别测定红细胞PHGPx ,Cu -ZnSOD ,Na+ -K+ ATPase活性和CD水平。结果 A、B、C组红细胞PHGPx ,Cu -ZnSOD ,Na+-K+ ATPase活性均显著低于D组 (P <0 .0 5 ) ,而CD水平均显著高于D组 (P <0 .0 5 )。A、B、C组间比较Na+ ,K+ ATPase活性也有显著差异 (P <0 .0 5 )。PHGPx与CD呈线性负相关 (r =- 0 .5 6 ,P <0 .0 5 ) ,PHGPx与Na+ -K+ ATPase呈线性正相关 (r =0 .6 8,P <0 .0 5 )。结论 PHGPx活性变化与冠心病和高脂血症的发病密切相关。

糖尿病心肌纤维化和肌动蛋白异常表达的研究

目的 研究糖尿病大鼠不同病程心肌纤维化和肌动蛋白含量的变化 ,阐明两者对糖尿病心肌病变发生的作用。方法 1.制造糖尿病大鼠心肌模型并随机分组。 2 .氯胺T法测定羟脯氨酸含量 ,代表心肌胶原总含量。心肌免疫组织化学染色测定心肌胶原蛋白 (CollagenⅠ、CollagenⅡ )和心肌型α肌动蛋白 (α actin)及转化生长因子β1(TGF β1)。 3.心肌病理改变的光镜和透射电镜观察。结果 糖尿病病程 6个月组心肌胶原总含量明显高于病程 3个月以内组 (P <0 0 1)。病程 3个月之后Ⅰ型胶原蛋白表达伴随TGF β1的表达开始较健康鼠明显增加 (P <0 0 1)。α actin蛋白表达较健康鼠明显减少 (P <0 0 1)。糖尿病鼠心肌可见大量胶原纤维相互连接成网状 ,排列紊乱 ,分布不匀。心肌细胞心肌型α actin蛋白分布不均匀 ,位于心肌线粒体膜处 ,着色呈浅黄色。病程 3个月后大鼠α actin蛋白表达明显减少 ,心肌细胞核皱缩 ,线粒体肿胀 ,在细胞核周围和细胞质内有大量糖原沉积现象。结论 Ⅰ型心肌胶原蛋白大量增加是糖尿病鼠心肌纤维化的主要原因。心肌型actin表达减少 ,心肌细胞核皱缩和线粒体肿胀以及糖原沉积是糖尿病心肌病的病理基础。

心肌胶原蛋白和肌动蛋白对糖尿病心肌病变的研究(英文)

目的研究糖尿病大鼠不同病程心肌胶原蛋白和骨架蛋白含量的变化,阐明两者对糖尿病心肌病变发生的作用。方法制造糖尿病大鼠心肌模型随机分组。氯胺T法测定羟脯氨酸含量,代表心肌胶原总含量。心肌免疫组织化学染色测定心肌胶原蛋白(CollagenI、CollagenIII)和心肌型α肌动蛋白(α-actin)及转化生长因子β1(TGF-β1)平均积分光密度(IOD)。心肌病理改变的光镜和透射电镜观察。结果糖尿病病程6个月组心肌胶原总含量明显高于病程3个月以内组(P <0.01)。病程3个月之后I型胶原蛋白表达伴随TGF-β1的表达开始较健康鼠明显增加(P <0.01)。α-actin蛋白表达较健康鼠明显减少(P <0.01)。糖尿病鼠心肌横切面可见粗大胶原纤维相互连接成网状,排列紊乱,分布不匀。心肌细胞心肌型α-actin蛋白分布不均匀,着色呈浅黄色,心肌纵切面可见α-actin蛋白表达主要分布于心肌肌膜处。病程3个月后大鼠心肌细胞核皱缩,线粒体肿胀、模糊,闰盘不连续,α-actin蛋白表达明显减少,有糖原沉积现象。结论Ⅰ型心肌胶原蛋白呈现持续性增加是糖尿病鼠心肌纤维化的主要原因。心肌细胞核皱缩,线粒体肿胀、模糊,闰盘不连续,糖原沉积和心肌型actin表达减少是糖尿病心肌病病理基础。

JNK信号转导通路与2型糖尿病

JNK作为丝裂原激活蛋白激酶家族成员,能使某些蛋白结构中丝氨酸/苏氨酸残基磷酸化,使其活化或改变其原有活性而产生异常效应。目前认为,JNK参与肥胖、胰岛素抵抗和炎症等代谢过程,阻断JNK通路可改善胰岛β细胞功能和胰岛素抵抗,诱导活化JNK通路可导致2型糖尿病(T2DM)的发生发展,本文总结近年关于JNK的研究状况,旨在说明其已经成为糖尿病研究方面一个新的关注点,阻断JNK信号转导通路可能成为糖尿病新的治疗途径。

糖尿病心肌骨架蛋白异常表达及其超微结构病理改变的研究

[目的]研究糖尿病大鼠不同病程心肌病变使心肌细胞内肌动蛋白含量的变化和超微结构的改变。[方法]①制造糖尿病大鼠心肌模型随机分组。②心肌免疫组织化学染色。③采用显微图像分析仪进行积分光密度分析,计算心肌型肌动蛋白平均积分光密度。④心肌病理改变的透射电镜观察。[结果]糖尿病病程6个月组心肌细胞心肌型α-actin蛋白表达减少明显高于3个月以内组(4.06±2.03)病程3个月之后α-actin蛋白表达较健康鼠明显减少(145.8±30.66)。糖尿病大鼠心肌细胞心肌型α-actin蛋白分布不均,着色呈浅黄色,心肌纵切面可见α-actin蛋白表达主要分布于心肌肌膜处。心肌细胞核邹缩,线粒体肿胀,模糊,闰盘不连续,α-actin蛋白表达明显减少,有糖原沉积现象。[结论]糖尿病α-actin KNA减少改变了心脏能力的基础代谢和基因表达。

血小板衍化生长因子-BB与糖尿病肾病

血小板衍化生长因子-BB(PDGF-BB)是PDGF经典的存在形式之一,其在肾脏中的作用主要包括诱导肾脏系膜细胞增生,促进细胞外基质积聚及单核-巨噬细胞在肾组织浸润。PDGF-BB在糖尿病肾病肾脏中表达增高,高水平的PDGF-BB可引起肾小球系膜细胞增生和细胞外基质积聚,亦参与肾小管及其间质改变,从而在糖尿病肾病的发生发展中起着重要作用。PDGF-BB还能通过诱导转化生长因子-β表达协同促进糖尿病肾病肾纤维化的发展。阻止PDGF-BB表达及其信号转导将有可能是糖尿病肾病的一种治疗手段。

MMPs/TIMPs、TGF-β_1、细胞外基质与糖尿病肾病

转化生长因子 β1 可刺激系膜细胞外基质 (ECM)蛋白的合成 ,抑制基质金属蛋白酶的酶解活性 ,并增加其抑制剂组织型金属蛋白酶抑制剂的活性 ,从而促进ECM的沉积 。

不同尿白蛋白排泄率的2型糖尿病患者血清Smad2和Smad7的变化及临床意义

目的探讨不同尿白蛋白排泄率的2型糖尿病患者血清Sm ad2和Sm ad7的变化及临床意义。方法对203例2型糖尿病患者根据尿蛋白排泄率(U AER)(尿白蛋白与尿肌酐的比值,urinary album in tocreatinine ratio,AC R)分为正常白蛋白尿组(D 1组78例)、微量白蛋白尿组(D 2组69例)、临床白蛋白尿组(D 3组56例),分别测定血清Sm ad2和Sm ad7的水平及代谢指标,并与41例正常对照者相比较。结果 2型糖尿病患者中血清Sm ad2和Sm ad7的水平显著高于对照组,D 3和D 2组的血清Sm ad2和Sm ad7显著高于D 1组,D 3组血清Sm ad2和Sm ad7的水平显著高于D 2组;2型糖尿病患者血清Sm ad2和Sm ad7的水平与AC R、糖化血红蛋白(H bA1c)成显著正相关(P<0.05),与空腹血糖(FBG)及空腹胰岛素(FIN S)无统计学相关性。结论Sm ad2和Sm ad7可能参与糖尿病肾病(diabetic kidney disease,D KD)的发生发展,检测血清中Sm ad2水平对于D KD的诊断及其干预有重要意义。

Na^+/H^+交换体阻滞剂对糖尿病鼠心肌细胞缺氧/复氧损伤的保护机制

[目的]探讨Na+/H+交换体阻滞剂对糖尿病鼠心肌细胞缺氧/复氧损伤的保护机制。[方法]通过观察糖尿病鼠单个心肌细胞在缺氧/复氧时细胞胞浆Ca2+浓度的动态变化以及Na+/H+交换体阻滞剂(EIPA)在不同时相(糖尿病单纯缺氧组即DM组,缺氧/复氧全程给药组即DM-EIPA组,复氧前给药1组即DM-EIPA 1组,复氧前给药2组即DM-EIPA2组)对Ca2+浓度的影响来研究Na+/H+交换体阻滞剂对糖尿病鼠心肌细胞缺氧/复氧损伤的保护机制。[结果]DM-EIPA组在180 min的缺氧期间Ca2+浓度的上升幅度显著低于DM组、DM-EIPA1组和DM-EIPA2组;在复氧期间DM-EIPA组和DM-EIPA2组Ca2+浓度的上升幅度显著低于DM组,而前两组之间差异无显著性意义。[结论]EIPA可以通过减轻钙超载而对缺血再灌注的糖尿病鼠心肌细胞起保护作用,可能对糖尿病心肌病的发生发展有预防作用。

α-硫辛酸干预对自身免疫性甲状腺炎发病的影响

目的观察不同剂量硫辛酸干预对高碘诱发的自身免疫性甲状腺炎(autoimmune thyroiditis,AIT)的动物模型中CD4^+CD25^+调节性T细胞和Th17细胞的变化及影响,探讨硫辛酸治疗AIT的免疫学机制。方法选取饮用质量浓度50 mg·L-1碘化钠水的NOD.H-2h4雌鼠,注射不同剂量硫辛酸干预。采用HE染色法观察淋巴细胞浸润的情况并进行甲状腺炎症程度的评分;测定血清甲状腺球蛋白抗体(Tg Ab)的水平;再用免疫荧光染色流式细胞仪分析CD4^+CD25^+Foxp3^+调节性T细胞和Th17细胞比例变化;实时定量RT-PCR法检测Foxp3 mRNA、IL-17mRNA和RORγtmRNA的表达水平。结果与AIT非干预组相比,硫辛酸干预组NOD.H-2h4小鼠CD4^+CD25^+Foxp3^+调节性T细胞比例及Foxp3 mRNA表达量均明显升高(P<0.05);脾细胞中Th17细胞比例及其转录因子IL-17mRNA和RORγtmRNA表达水平均明显减低(P<0.01)。但不同剂量硫辛酸干预组之间比较无显著性差异(P>0.05)。同时,硫辛酸干预组NOD.H-2h4小鼠血清Tg Ab滴度以及甲状腺内淋巴细胞浸润的程度均较同周龄非干预组小鼠明显降低(P<0.05)。结论α-硫辛酸对AIT有治疗效果。

糖尿病肾病脂代谢异常的调节

糖尿病可致全身众多重要器官损毁，严重影响着患者的生活质量及寿命，并极大程度地增加医疗费用。糖尿病肾病（DN）是1型糖尿病患者的主要死亡原因之一，合并DN的1型糖尿病患者的死亡风险比未合并者高20～40倍。目前引起肾功能衰竭第一位的原因就是DN，但迄今为止，国内外临床上尚缺乏特异性的DN治疗方法。

CTGF反义寡核苷酸对高糖培养人肾小球系膜细胞细胞外基质表达的影响

目的:观察体外转染结缔组织生长因子(CTGF)反义寡核苷酸(ASODN)对高糖培养的人肾小球系膜细胞(HMC)细胞外基质表达的影响。方法:体外培养HMC,予以高糖(30mmol/L)和正常糖(5mmol/L)培养液培养,高糖培养后应用脂质体Lipofectamine2000转染CTGFASODN,在不同时间收集培养液上清。用ELISA检测培养液上清中的纤连蛋白(FN)和层黏连蛋白(LN)含量。结果:高糖呈时间依赖促进体外培养的HMC表达FN和LN,而转染CTGFASODN可抑制高糖所致的FN和LN分泌增加。结论:高糖培养可促进HMC细胞外基质的表达,转染CTGFASODN可抑制上述高糖的作用。故调控HMC的CTGF表达水平可能成为防治糖尿病肾病(DN)、特别是早期病变的有效途径之一。

2型糖尿病患者血清抵抗素与尿白蛋白排泄率的关系

目的检测不同尿白蛋白排泄率(UAER)的2型糖尿病患者血清抵抗素(RESISTIN)水平,并探讨尿白蛋白排泄率与抵抗素之间的关系。方法酶联免疫检测法(ELISA)测定60例研究对象空腹血清抵抗素水平。其中2型糖尿病伴微量白蛋白尿组20例;2型糖尿病UAER正常组20例,健康对照组20例。结果2型糖尿病伴微量白蛋白尿组的血清抵抗素浓度高于2型糖尿病UAER正常组(P<0.05);且2型糖尿病UAER正常者组的抵抗素水平又高于健康对照组(P<0.05);其值分别为1.80(1.55～2.45);1.57(1.29～1.87);1.29(1.07～1.47)。结论2型糖尿病及其微量白蛋白尿的形成可能与抵抗素相关。