线粒体功能障碍及氧化应激与糖尿病视网膜病变关系的研究

糖尿病视网膜病变(diabetic retinopathy,DR)为糖尿病的严重并发症之一,已成为致盲的主要眼疾。DR的发生发展与多种因素有关,发病机制复杂,尚不明确,早期的资料表明,其发生发展与血糖水平、糖尿病病程、环境等多种因素相关。其中线粒体功能障碍和氧化应激反应是导致DR发生的重要机制之一,已成为近几年的研究热点。细胞内线粒体功能障碍的后果包括因为线粒体活性氧(ROS)的产生率升高而导致的电子传递链蛋白的损伤,以及线粒体DNA(mt DNA)的损害和代谢能力的降低。明确把握高糖下线粒体的功能变化和氧化应激反应在DR发生发展过程中的作用机制,对DR的防治具有重要意义。因此本文就相关研究发展做一综述。

自体结膜瓣覆盖术治疗深层角膜溃疡(英文)

目的:评价自体结膜瓣覆盖术对深层角膜溃疡的治疗效果。方法:分析于2010-05/2011-10在中国医科大学眼科中心行自体结膜瓣覆盖术的14例深层角膜溃疡患者的预后。14例患者中包括6例病毒性角膜炎患者,7例真菌性角膜炎患者和1例细菌性角膜炎患者。进行结膜瓣遮盖术前,真菌性角膜炎患者用氟康唑冲洗角膜溃疡,细菌和病毒性角膜炎患者用庆大霉素液体冲洗角膜溃疡。根据角膜溃疡大小不同采取部分或全部结膜瓣覆盖术。术后根据不同的角膜炎类型使用不同的抗菌素共4wk。所有的患者术后均随访观察结膜瓣存活情况、并发症及视力恢复情况,随访时间达10～18mo。结果:所有患者经历1 次手术后均痊愈(治愈率为100%)。除1例结膜瓣脱落外,其余患者术后2wk自体结膜瓣均存活并与角膜溃疡处贴附紧密(85.71%)。这13例患者的结膜瓣在随访观察期间内逐渐变得透明并发生了不同程度的退缩。1例真菌性角膜炎患者在术后3mo时角膜炎复发,在使用那他霉素眼液点眼3wk后痊愈。1例患者术后3mo时并发浅前房。1例患者术后10mo并发后弹力层膨出。1例患者术后1a并发了青光眼。所有的患者成功地保留了眼球,但视力提高不明显。结论:自体结膜瓣覆盖术治疗深层角膜溃疡有效,但是术后长期观察存在一定的并发症。

组织型转谷氨酰胺酶与玻璃体视网膜疾病

组织型转谷氨酰胺酶在稳定细胞外基质、细胞凋亡、细胞粘附、细胞信号转导等多种生理病理过程中扮演重要角色,并参与了一些玻璃体视网膜疾病的病理过程。我们对此进行综述,以期对揭示这些疾病的发病机制和制定治疗方案有所帮助。

双重荧光标记法检测人视网膜色素上皮细胞吞噬的功能

目的:检测人视网膜色素上皮(humanretinalpig-mentepithelium,HRPE)细胞特异性及非特异性吞噬动力学,比较二者的不同之处。方法:用双重荧光标记法检测HRPE细胞吞噬动力学,即分别用红色染料硫氰酸罗达明(sulforho-damine,SR)、绿色荧光染料异硫氰酸酯荧光素(FITC)标记HRPE细胞和视杆细胞外节膜盘(rodoutersegments,ROS)。用1×1010个/L的FITC-ROS及自发绿色荧光的乳胶微球(leatexbeads,LB)于37℃孵育培养的正常HRPE细胞,在孵育的不同时间(5min￣48h)去除孵育物,终止吞噬反应。用配有特殊三通广谱吸收波长,长工作距离镜头的荧光显微镜实时,活体观察并记录结合及吞噬的数量。用扫描电镜及激光共聚焦扫描显微镜证明HRPE细胞对LB及ROS结合与吞噬。结果:孵育0.25h时ROS已结合于HRPE细胞表面,0.5h时可见极少数的ROS被HRPE细胞摄入细胞内;之后的孵育过程中被结合及被吞噬的ROS数目不断增加,至孵育18h对ROS的结合达到饱和,但摄入过程继续进行,至孵育24h,对ROS的吞噬达到饱和。当HRPE细胞与LB孵育时,至1.5h结合方启动,6h摄入开始;在观察的48h内被结合及被吞噬的LB数目随时间延长而呈线性增加。结论:HRPE细胞的特异性及非特异性吞噬动力学明显不同,HRPE细胞对ROS的结合及吞噬比其对LB的结合及吞噬发生得更早,而且结合及吞入过程均具有时间饱和性。

视网膜色素上皮细胞吞噬功能与MERTK-Ras-肌球蛋白通路关系的研究

目的：研究视网膜色素上皮（retinal pigment epithelium,RPE）细胞吞噬功能与MERTK受体及其下游信号通路Ras-MEK-MLCK-肌球蛋白的关系。方法：用视细胞外节膜盘（rod outer segments,ROS）于37益孵育离体培养的3~5代C57小鼠RPE细胞,在孵育0、30、60、120、180、240min终止吞噬反应。双重荧光标记法检测RPE细胞吞噬动力学;以MERTK及Ras抗体、磷酸化MEK及MLCK抗体应用Western-Blot方法检测不同孵育时间（30、60、120、180min）MERTK、Ras、MEK及MLCK的激活状态;以瞬时转染质粒方法抑制Ras及MERTK基因表达后,再次以Western-Blot方法检测对应时间MERTK-Ras通路激活状态及吞噬功能的变化。结果：C57小鼠RPE细胞吞入ROS发生在孵育30min,并在3h达到饱和。在吞噬过程中,随着孵育时间的延长,RPE细胞MERTK、Ras、MEK和MLCK的蛋白表达水平不断增多（与对照组相比,P〈0.05）。Ras及MERTK干扰后的RPE细胞与ROS共孵育（30、60、120、180min）的全过程中,MERTK、Ras、MEK和MLCK的蛋白表达及ROS的吞入数量始终维持较低水平,仅在孵育180min见到少量ROS吞入;与未转染RPE细胞相比,si Ras-RPE细胞及si MERTK-RPE细胞与ROS共孵育120、180min时,MERTK、Ras、MEK及MLCK的蛋白表达量均明显减少（P〈0.05）。结论：Ras-MEK-MLCK-肌球蛋白通路是鼠RPE细胞吞噬过程中MERTK受体激活的下游信号通路。

视网膜下液致视网膜色素上皮细胞和神经胶质细胞增殖过程中PKC活性的变化(英文)

目的:研究视网膜下液(SRF)能否引起体外培养的人视网膜色素上皮(RPE)和神经胶质(RG)细胞发生增殖及在其增殖过程中是否出现蛋白激酶 C 的激活和转位, 来探讨RPE 和 RG 细胞增殖与其细胞中 PKC 信号系统变化的关系以及 PKC 抑制剂的作用。方法:实验对象为体外培养的 RPE 和 RG 细胞;刺激因素为提取 PVR 分级是 B、C 级两级患者的 SRF 和来自角膜移植后的供体眼球所提供的正常玻璃体成分;PKC 特异激活剂佛波酯(PMA)为阳性对照;DMEM 培养液作为空白对照。用 3H- 胸腺嘧啶脱氧核苷(3H- TdR)掺入法测定各自的RPE 和 RG 细胞增殖情况。用 B、C 级 SRF、正常玻璃体成分、PMA、DMEM 培养液分别在不同的时间刺激 RPE 和 RG细胞, 通过细胞裂解和离心获取细胞质和细胞膜蛋白粗提液,用同位素 32P 标记和液体闪烁计数法检测细胞质和细胞膜 PKC 活性水平。选用 PKC 抑制剂地喹氯铵预处理各组细胞后,再分别观察各组 RPE 和 RG 细胞中 PKC 活性表达水平及增殖情况。结果:用 B、C 级 SRF 和 PMA 处理过的 RPE 细胞出现高增殖;SRF 和 PMA 都可以激活 RPE 和 RG 细胞质中的 PKC,并使其由胞质向胞膜转位,但 SRF 作用于 RPE 和 RG 细胞时,胞膜上 PKC 活性峰值出现的时间较 PMA 明显延长。其中,B 级 SRF 作用于 RPE 和 RG 细胞时,胞膜上 PKC 活性峰值出现的时间较 C 级长且峰值低,增殖程度也低;正常玻璃体成分和 DMEM 培养液组没有出现 PKC 活性变化和高增殖。用 PKC 特异抑制剂预处理各组细胞后,没有出现PKC 活性和细胞增殖的改变,组间无显著性差异,P>0.05。结论:SRF 可促进 RPE 和 RG 细胞增殖,RPE 和 RG 细胞中的 PKC 是以激活和转位方式参与细胞增殖的过程;使用PKC 特异抑制剂可阻止此过程发生。

连接粘附分子-1在人角膜上皮中的表达(英文)

目的:检测连接粘附分子-1(junction adhesion molecule,JAM-1)在正常人角膜上皮各层中的表达及分布特点并与咬合蛋白(occludin)进行比较。方法:培养人角膜上皮细胞提取细胞总RNA。以逆转录后获得的cDNA为模板PCR扩增目的基因JAM-1及occludin。流式细胞仪检测JAM-1蛋白表达。双重免疫荧光观察JAM-1与occludin在正常人角膜上皮组织的原位表达。结果:通过RT-PCR在培养人角膜上皮细胞中检测到JAM-1与occludin扩增片段;流式细胞仪检测到JAM-1蛋白表达;双重免疫荧光结果显示occludin染色主要位于表层上皮层细胞之间;而JAM-1荧光染色不仅见于上皮表层,在整个上皮层细胞之间均可见其荧光反应。结论:Occludin主要位于正常人角膜上皮表层细胞之间,JAM-1在正常人角膜上皮的全层中均有表达。

青少年近视眼角膜地形图的临床分析

目的 :探讨青少年近视眼角膜地形图特点。方法 :对 2 36例 46 3眼青少年近视眼患者采用日本TopconKR 710 0P角膜彩色地形图自动验光仪进行检测 ,对检测结果进行统计分析。结果 :① 46 3眼角膜地形图中圆形 6 7眼 ,占 14.47% ;椭圆形 35眼 ,占 7.5 6 % ;不规则形 16眼 ,占 3.46 % ;各种蝴蝶结形角膜地形图共有 34 5眼 ,占总眼数 73.92 %。②各种角膜地形图眼的屈光度、角膜厚度、角膜直径、眼轴、眼压等差异均无统计学意义。③蝴蝶结形组与圆形角膜地形图组比较 ,其角膜垂直K值、角膜散光度、总散光度差异有统计学意义 (P <0 .0 1)。结论 :①青少年近视患者的各种角膜地形图形态与其角膜屈光度、角膜直径、角膜厚度、眼压等无明显差异。②当角膜有散光时 ,地形图可呈现蝴蝶结形 ,蝴蝶结形的轴向与角膜循散光、逆散光。

额肌瓣悬吊治疗上睑上垂(摘要)

从1987年9月开始,我们对先天性上睑下垂提上睑肌功能极差或缺如的病例,共16例23眼(双眼7例、单眼9例,二次手术8眼)采用3改良Robert氏额肌牵引法手术,取得了较满意意的效果。手术方法:(1)按龙胆紫标记的双重睑线切开皮肤和皮下组织,在眼轮匝肌下向上分离至眉弓上1mm,将皮肤与额肌分离。(2)用止血钳夹住眉弓中央部的额肌向下方切口处牵引,在夹住的额肌两侧,与眉弓垂直剪开,做成宽1mm的额肌瓣。(3)用小三角针在睑板深层穿过内中外三组3—0黑丝线。然后从额肌瓣穿过,打活结调整上睑高度厂。

复明眼液对体外诱导的兔晶状体上皮细胞凋亡的影响

目的 探讨中药复明眼液对兔晶状体上皮细胞 (lensepithelialcells,LEC)凋亡的影响。方法 采用H2 O2 诱导体外培养的兔LEC ,用SOD超微量快速测定和TBA荧光法分别检测不同浓度的复明眼液对兔LEC的超氧化物歧化酶 (superoxidedismulase,SOD)活性和脂质过氧化物 (lipidperoxide ,LPO)含量的影响。结果 终浓度 40 0 μg/ml、 80 0 μg/ml复明眼液可明显降解兔LEC的LPO含量。结论 一定浓度的复明眼液具有提高兔LEC抗氧化作用的能力。保护兔LEC免受氧化损伤的作用 ,防止兔LEC发生凋亡。

人胎儿球结膜成纤维细胞的离体培养

为使离体成纤维细胞培养条件更符合正常人眼组织生物学特点,笔者取材人胎儿球结膜培养成纤维细胞获得成功。本文介绍了培养的方法。

速激肽受体

速激肽受体包括ＮＫ－１、ＮＫ－２和ＮＫ－３三种类型，广泛分布于神经系统和外周组织中，属Ｇ蛋白共役型受体，速激肽受体ｃＤＮＡ已被克隆。受体激活后能够引起多种生理效应，并且在某些疾病状态下，速激肽受体的表达和分布具有可塑性。速激肽受体拮抗剂的研制将进一步推动速激肽受体的研究并有广阔的应用前景。本文综述了速激肽受体的类型、结构、分布、受体后信息传递机制、生理效应、病理改变及受体拮抗剂等研究进展。

细胞凋亡与眼科疾病

细胞凋亡与眼科疾病中国医科大学附属一院眼科（１１０００１）白禹诗喻晓兵综述吴景天审校细胞凋亡（ａｐｏｐｔｏｓｉｓ）是生物进化过程中保留下来的一种细胞死亡方式，主要见于生理性细胞死亡。近来发现细胞凋亡与肿瘤、神经组织变性、病毒感染、自身免疫及获得性免疫...

CYX型眼科强磁异物吸出器的研制与应用

ＣＹＸ型眼科强磁异物吸出器的研制与应用中国医科大学附属一院眼科张百新，汤晓东，白玉芹眼外伤常伴有限内异物，据统计，眼内异物中有９０％具有磁性，再加上外伤中身体其他部位的磁性异物，手术取出时都需要使用磁铁。因此，异物摘出手术使用的磁铁显得非常重要。以往...

YD－1型眼科多功能电凝器的制作与应用

ＹＤ－１型眼科多功能电凝器的制作与应用中国医科大学附属一院眼科张百新沈阳市医用光学仪器厂张玉倩沈阳市中心医院眼科刘淑岩沈阳市第二人民医院王士光，刘秀荣电凝器是眼科较常用的仪器，主要用于视网膜脱离手术时视网膜漏孔的封闭。虽然目前已部分被冷凝代替，但是由...

多波长氪离子激光治疗糖尿病视网膜病变

目的 观察多波长氪离子激光对糖尿病视网膜病变的疗效。 方法 用多波长氪离子激光对35例糖尿病视网膜病变患者 5 5只眼 ,根据病变性质、部位和屈光间质情况选择不同波长激光进行视网膜光凝 ,术前行视力、裂隙灯、检眼镜、眼压、眼 B型超声、视野、视觉诱发电位和荧光素眼底血管造影检查 ,术后随访 1年。 结果 2 0只眼视力提高 ,占 36 .4% ,视力无变化 34只眼 ,占 6 1.8% ,视力下降 1只眼 ,占1.8% ,其间未见严重并发症。 结论 多波长氪离子激光 ,可依实际需要组合使用不同波长治疗糖尿病视网膜病变 ,使部分患者视力提高。远期效果有待进一步观察。

单疱病毒性角膜内皮炎的诊治探讨

目的探讨单疱病毒性角膜内皮炎的临床表现和治疗原则，尤其是激素类药物的应用方法。方法临床收集22例单疱病毒性角膜内皮炎的患者分为盘状型、弥漫型和线状型，明确诊断后应用抗病毒制剂和高浓度激素治疗，部分重症的弥漫型和全部线状型的患者全身给予抗病毒药和激素药物，观察视力和角膜后KP消退的时间。结果应用上述方法治疗后盘状型、弥漫型和线状型视力恢复时间分别为：（10．17±2．44）d，（16．50±3．16）d，（27．00±4．24）d，KP消退的时间为（15．17±2．55）d．（23．25±4．20）d，（37．50±4．95）d。结论局部足量的抗病毒制剂和激素治疗单疱病毒角膜内皮炎是非常有效的；单疱病毒线状角膜内皮炎是最严重的类型，需要给予全身的抗病毒和激素类药物，应用时间要长于其他类型。

外伤性视神经萎缩眼的研究动脉血流速度

本文利用经颅超声多普勒扫描仪（ＴＣＤ）对视神经萎缩（外伤性）的患、健眼眼动脉血流速度进行检测，且探讨其与睫状后动脉之间的关系以期探讨此病的发病机制，为临床合理治疗提供资料。结果表明：外伤性视神经萎缩患眼与配对的正常眼之间眼动脉血流速度无明显差异（Ｐ＞０．０５），中心固视组眼动脉血流速度增高占６０％，血流速度降低的占４０％。偏心固视组血流速度增高及降低的均占４４．４％，无变化的占１１．１％，患眼眼动脉血流速度与后睫状动脉灌注压之间无显著的直线相关关系（ｒ＝０．０４６６８，Ｐ＞０．０５）。

准分子激光原位角膜磨镶术角膜瓣蒂不同位置的疗效比较观察

目的 :观察准分子激光原位角膜磨镶术 (Laserinsitukeratomileusis ,LASIK)不同位置角膜瓣蒂的疗效。方法 :将 2 18例 43 6眼行LASIK的近视患者按角膜瓣蒂位置分为鼻侧和上方两组。对术中操作和术后疗效进行比较观察。结果 :术后 3个月裸眼视力鼻侧和上方蒂角膜瓣组分别为 1 0 7± 0 2 4和 1 0 8± 0 19两组无明显差异 (t =0 72 ,P >0 0 5 )。术后出现散光鼻侧蒂瓣组有 2 7眼 (12 3 8% )上方蒂瓣组 2 1眼 (9 6% )。术后鼻侧蒂瓣有 3眼发生角膜瓣移位。结论 :鼻侧和上方角膜瓣组均具有良好的术后效果 ,两组无明显差异 ,但在操作掌握和术后角膜瓣稳定性上 。