CD93^(+)B淋巴细胞亚群在炎症及炎症相关疾病中的研究进展

CD93表达于原B(pro-B)细胞、前B(pre-B)细胞以及各种不成熟B细胞,CD93可以和膜突蛋白(moesin)、多聚素2(MMRN2)等分子相互作用参与细胞迁移、黏附和吞噬过程,进而在炎症以及血管生成过程中发挥着重要的作用。检测CD93+B细胞亚群对炎症及炎症相关疾病,如幽门螺杆菌相关性的胃炎、脓毒症、非肥胖型糖尿病以及牙周炎等疾病的诊断、治疗及预后监测具有重要的作用。

PEEK复合材料的力学性能及对成骨细胞增殖影响的实验研究

目的研究新型聚醚醚酮复合材料(PEEK-HA-CF)的力学特性和在体外对成骨细胞增殖能力的影响。方法利用万能材料实验机测试复合材料的拉伸和弯曲性能;将新生鼠颅盖骨分离培养的成骨细胞接种于复合材料上,以广泛应用于临床的PEEK-CF作为对照组,用CCK-8测定成骨细胞的增殖率;扫描电镜观察成骨细胞的形态。结果PEEK复合材料的力学性能与人体骨的力学性能相匹配,并具有良好的生物活性。结论PEEK复合材料可能成为一种理想的移植替代材料。

神经母细胞瘤化疗耐药机制的研究进展

神经母细胞瘤(Neuroblastoma,NB)是儿童最常见的颅外恶性实体瘤,其临床症状各异且易复发和转移。目前NB的治疗方法主要以手术联合化疗为主,由于化疗后期易出现耐药性,高危型NB患者的预后往往不理想。因此,深入了解NB化疗耐药机制对于提高患者的预后具有至关重要的意义,本文从多个方面探讨NB化疗耐药的机制。

应用于行为学研究中八臂迷宫实验方法的改良

目的探讨一种简易有效的新型八臂迷宫实验方法。方法选用20只雄性成年SD大鼠,分为传统方法组即对照组和改良电加热方法组即实验组,每组10只。于对照组食饵臂末端放置食饵,非食饵臂不放置食饵。实验组在非食饵臂末端放置加热装置作为错误惩罚外,其他条件与对照组相同。记录并比较实验大鼠于两种迷宫探索移动距离、时间、速度、进臂次数指标。结果与对照组相比,实验组大鼠移动距离和探索时间明显缩短且进入错误臂次数明显减少。结论使用改良电加热八臂迷宫实验方法能在训练7 d后更准确有效评估大鼠空间记忆学习能力,可作为一种有效的实验新方案。

犬消声实验及其观察

目的探索一种简单、有效的犬消声方法,并对其消声效果和声音恢复情况进行观察。方法对10只易兴奋,喜吠的普通级犬,行口腔内电刀直接切除声带,并分别于术前、术后3d,7d,15d,30d,3个月,6个和12个月进行声音值测量。结果术后犬叫声较术前有明显降低,随时间推移声音有所恢复,但不会恢复到原来状态。结论烧烙法行口腔直接切除声带是一种简单、安全、有效的犬消声方法。

供精人工授精妊娠结局的影响因素及子代安全性分析

目的:分析影响供精人工授精(AID)妊娠结局的相关因素,以提高妊娠率,并评价其子代安全性。方法:回顾性分析沈阳二〇四医院生殖医学研中心2005年7月1日至2013年6月30日行AID助孕的5 109例患者,共计7 761周期的妊娠结局及子代出生缺陷发生率情况。结果:AID临床妊娠2 252例,周期妊娠率29.02%,累积妊娠率44.08%。女方年龄≤35岁组临床妊娠率明显高于35岁以上组(30.31%vs 20.18%,P<0.01),不孕年限5年以下组高于5年以上组(30.83%vs 28.16%,P<0.01),使用促排卵组临床妊娠率明显高于自然周期组(33.22%vs 28.68%,P<0.01);治疗第1周期组的临床妊娠率最高(29.87%),与治疗第4周期组妊娠率(23.61%)差异有统计学意义(P<0.05),其余各治疗周期组间的临床妊娠率差异无统计学意义(P>0.05)。AID发生子代出生缺陷28例(1.40%),以心血管畸形发生率最高(6例,21.43%),其次是骨骼肌肉系统畸形4例(14.29%),泌尿系统和神经系统畸形各3例(10.71%),还包括唇腭裂、呼吸系统、消化系统畸形各2例(7.14%)及其它系统畸形。结论:女方年龄、不孕年限及促排卵治疗是影响AID临床妊娠率的重要因素;冷冻精液行AID并未增加子代出生缺陷发生率,是一项相对安全的辅助生殖技术。

UC-MSC经PI3K/AKT信号通路影响人肺腺癌A549细胞的凋亡和增殖

目的:探讨人脐带来源间充质干细胞(umbilical cord-derived mesenchymal stem cell, UC-MSC)经PI3K/AKT信号通路对人肺腺癌A549细胞凋亡和增殖的影响及其作用机制。方法:采用酶消化法从人脐带组织中分离UC-MSC并进行体外培养,用流式细胞术鉴定所得到的UC-MSC的免疫表型。收集UC-MSC培养上清,建立UC-MSC条件培养基与肺腺癌A549细胞株的体外间接共培养体系。采用CCK-8法检测A549细胞增殖率,通过Annexin V/PI染色流式细胞术检测A549细胞的凋亡率,通过PI染色法判断肿瘤细胞的细胞周期分布;qPCR实验检测CyclinD1、BAX、Bcl-2等PI3K/AKT通路下游凋亡与增殖相关基因的转录水平;Wb测定PI3K/AKT通路相关蛋白质表达水平。结果:人脐带组织分离培养3周后,可见纤维状细胞铺满培养瓶,平行排列或呈旋涡状生长。流式细胞术检测发现所得细胞表达MSC标志分子CD73、CD90、CD105,不表达CD45和HLA-DR。UC-MSC条件培养基与肺腺癌A549细胞株在体外间接共培养后,与对照组比较,A549细胞的增殖率明显降低、凋亡率明显升高,其细胞周期明显停滞在G1期(均P<0.01)。PI3K/AKT信号通路相关分子CyclinD1和Bcl-2转录下调、BAX的转录上调(均P<0.01);UCMSC条件培养基培养的A549细胞总AKT水平不变,p-AKT蛋白表达呈剂量性依赖下降(P<0.01)。结论:UC-MSC明显影响肺腺癌A549细胞的增殖和凋亡能力,细胞周期停滞在G1期,其主要作用机制是UC-MSC抑制A549细胞PI3K/AKT信号通路,为探索UC-MSC临床应用的安全性和有效性提供实验依据。

microRNA let-7a对人晶状体上皮细胞凋亡的调控及其在白内障中的作用

目的探讨micro RNA let-7a对人晶状体上皮细胞凋亡的调控作用及其在白内障中的作用。方法利用Real time q-PCR方法,检测年龄相关性白内障患者晶状体前囊膜和正常人眼晶状体前囊膜、人晶状体上皮细胞凋亡模型和正常人晶状体上皮细胞系let-7a的表达情况;利用Lipofectamine 2000瞬时转染let-7a mimic和let-7a inhibitor,分别上调和下调人晶状体上皮细胞中let-7a的表达,并利用Real time q-PCR方法验证转染效率,利用流式细胞仪检测细胞凋亡率的变化。结果年龄相关性白内障患者晶状体前囊膜组let-7a的表达显著低于正常对照组;人晶状体上皮细胞凋亡模型组let-7a的表达显著低于正常对照组;let-7a mimic转染组let-7a的表达显著高于对照组,let-7a inhibitor转染组let-7a的表达显著低于对照组;let-7a mimic转染组细胞凋亡率显著低于对照组,let-7a inhibitor转染组细胞凋亡率显著高于对照组,差异均有统计学意义(P<0.01)。结论 micro RNA let-7a能够调控人晶状体上皮细胞凋亡,从而在白内障发病过程中发挥重要作用,micro RNA let-7a可能成为白内障非手术治疗的新靶点。

小鼠SPINK5基因重组过表达腺病毒载体构建及其对特应性皮炎小鼠模型皮损疗效的研究

目的构建表达小鼠SPINK5基因的重组腺病毒载体,观察其对特应性皮炎小鼠模型的治疗效果。方法采用DNA重组技术,将携带小鼠SPINK5基因的腺病毒穿梭质粒与携带腺病毒基因组的包装质粒共转染HEK293细胞,产生重组腺病毒。采用卵清蛋白,通过腹腔,皮下注射系统致敏结合皮肤局部外涂局部致敏Balb/c小鼠,建立特应性皮炎小鼠模型。将携带SPINK5基因的腺病毒载体注射至特应性皮炎小鼠模型皮损内,观测其对特应性皮炎小鼠模型的治疗效应。结果成功构建了表达小鼠SPINK5基因的重组腺病毒载体及小鼠特应性皮炎模型,该病毒载体注射于特应性皮炎小鼠模型皮损内,治疗2周可明显减轻皮损处潮红,水肿及炎性反应。皮损处病理检测显示,与模型对照相比较,皮损厚度,炎性细胞浸润明显改善。结论SPINK5基因治疗对特应性皮炎小鼠模型具有明显的治疗效果。SPINK5基因产物局部外用有望用于特应性皮炎的治疗。

聚醚醚酮及其复合材料作为骨科植入物的研究进展

文章总结了聚醚醚酮及其复合材料的生物活性和相容性的最新研究进展,同时综述了聚醚醚酮及其复合材料作为骨科植入物的应用现状,并分析其发展前景。

细胞凋亡在STZ诱导糖尿病大鼠早期视网膜病变中的作用机制

目的观察链脲佐菌素(STZ)诱导的糖尿病大鼠早期视网膜细胞凋亡情况及血管形态变化,分析细胞凋亡在糖尿病早期的作用机制。方法Wistar大鼠随机分为实验组及对照组各28只,实验组一次性腹腔注射1%STZ诱发糖尿病模型,成模后4、8、16、24周行视网膜形态学检测,TUNEL法原位检测凋亡细胞。结果实验组大鼠早期视网膜血管无明显变化,24周时出现内界膜水肿,各层细胞排列不整,视网膜部分血管管径粗细不一。TUNEL阳性细胞最早于发病4周时出现在视网膜神经节细胞(RGCs),数量呈时间信赖性,至24周时涉及到内核层的双极细胞、血管内皮细胞、周细胞等,凋亡指数与对照组相比,差异有统计学意义(P<0.01)。视神经节细胞层的凋亡指数明显高于内核层细胞(P<0.05)。结论糖尿病所致的视网膜凋亡的损伤要远远早于微血管病变的发生,对抗凋亡的发生机制有可能成为预防及治疗糖尿病视网膜病变(DR)的新策略。

新型全自动免疫组化染色机在临床病理工作中高标准化应用体会

探讨新型全自动免疫组化染色机在临床病理工作中高标准化操作的应用,为临床病理诊断提供有力依据。

普罗布考对阿霉素肾病大鼠足细胞nephrin和podocin表达的影响

目的研究普罗布考对阿霉素大鼠足细胞相关分子nephrin及podocin表达的影响。方法将36只SD大鼠分为正常对照组(12只)、肾病模型组(12只)和普罗布考干预模型组(12只),采用鼠尾静脉注射阿霉素的方法建立阿霉素大鼠肾病模型。4周末检测各组大鼠24 h尿蛋白定量,光镜下观察肾脏病理学改变,Western blot技术检测nephrin及podocin的表达。结果肾病模型组和普罗布考干预组24 h尿蛋白定量均高于正常对照组(P<0.05),但普罗布考干预组24 h尿蛋白定量低于肾病模型组(P<0.05)。肾病模型组和普罗布考干预组肾小球nephrin、podocin的表达均低于正常对照组(P<0.05),且普罗布考干预组高于肾病模型组(P<0.05)。结论普罗布考可能通过减轻足细胞损伤实现对阿霉素肾病大鼠肾脏的保护作用。

奥曲肽对伊立替康化疗后迟发性腹泻小鼠肠黏膜损伤的预防作用

目的:观察奥曲肽对伊立替康化疗引起的迟发性腹泻小鼠肠黏膜损伤的预防作用。方法:健康昆明小鼠20只,随即分成对照组,伊立替康组,奥曲肽组,伊立替康及奥曲肽预防组。观察迟发型腹泻发生情况,实验开始后第8天将小鼠处死,取小肠及结肠组织。光镜下根据Chiu标准对肠黏膜损伤程度进行分级。结果:与伊立替康组比较,伊立替康及奥曲肽预防组小鼠腹泻发生率和肠黏膜损伤程度显著降低。结论:奥曲肽可以对伊立替康引起的迟发型腹泻起到一定程度的预防作用。

TNF-α对肠上皮细胞PIgR、NF-κB亚单位表达影响

目的:研究肿瘤坏死因子-α(TNF-α)对Caco-2细胞表达多聚免疫球蛋白受体(pIgR)和核因子-κB(NF-κB)亚单位RelA/RelB的影响。方法:采用Real-time PCR方法检测肠上皮细胞表达pIgR、RelA和RelB的变化。结果:与无TNF-α刺激比较,用不同浓度TNF-α刺激后pIgR、RelA和RelB基因的表达明显增加(P<0.01)。结论:TNF-α促进肠上皮细胞表达pIgR、NF-κB亚单位基因表达,TNF-α通过NF-κB通路激活pIgR基因的转录。

NO对肠上皮Caco-2细胞表达分泌片的影响

目的研究NO对肠上皮Caco-2细胞表达分泌片(SC)的影响。方法采用MTT方法观察一氧化氮(NO)对Caco-2细胞的杀伤作用;采用免疫组化、Western blot、real-time PCR方法检测NO对肠上皮细胞表达SC的变化影响。结果高浓度NO对Caco-2细胞有直接杀伤作用。与无NO刺激组比较,用不同浓度NO刺激后SC阳性细胞、Caco-2细胞SC蛋白和SC基因的表达明显减少(P<0.01)。结论NO可直接引起Caco-2细胞损伤,抑制肠上皮细胞分泌SC,因此NO可能削弱肠道免疫防御。

肿瘤免疫逃逸机制的研究新进展

目的:探讨肿瘤免疫逃逸的机制,指导肿瘤治疗理论研究。方法:应用NCBI的PubMed文献数据库,以"肿瘤免疫逃逸、T淋巴细胞、髓源性抑制性细胞,免疫抑制因子,胸腺萎缩"等为关键词,检索2005至2010相关文献。最后纳入分析40余篇文献。结果:肿瘤细胞可通过多种途径逃避机体免疫系统的监视,包括肿瘤对T淋巴细胞的功能抑制,诱导分化出免疫抑制细胞如髓源性抑制细胞,调节性T细胞等。同时肿瘤可导致免疫抑制因子如IL-10,IL-4、TGF-β、VEGF、IDO、COX-2的上调。促进免疫器官胸腺的萎缩。结论:肿瘤免疫逃避机制十分复杂,深刻认识肿瘤免疫逃逸机制,有助于肿瘤防治研究的深入。

表型正常的纯合型额外小染色体1例分析

通过对染色体G显带和N显带分析,发现1例男性不育患者为纯合型47,XY,+mar,且mar为银染阳性,含有两个随体,可能来源于D、G组染色体近端着丝粒,考虑患者的不育症状可能与mar有关。

呼吸道分泌型IgA研究进展

人体粘膜是病原微生物等抗原性异物入侵机体的主要途径,机体近50%的淋巴组织分布于粘膜系统。粘膜相关淋巴组织（Mucosal-associated lymphoidtissue,MALT）是发生局部特异性免疫应答的主要部位,MALT中的B细胞多为产生分泌型IgA（SecretoryIgA,SIgA）的B细胞,

miR-181调控人晶状体上皮细胞凋亡的机制研究

目的:探讨miR-181在白内障晶状体组织中的表达情况,及其对人晶状体上皮细胞凋亡的调控机制。方法:利用Real time q-PCR方法,检测年龄相关性白内障患者晶状体前囊膜和人晶状体上皮细胞凋亡模型中miR-181的表达情况;利用Lipofectamine 2 000瞬时转染miR-181 mimic和inhibitor调节人晶状体上皮细胞中miR-181的表达,利用Real time q-PCR方法验证转染效率,利用流式细胞仪检测细胞凋亡率的变化。结果:与对照组相比,年龄相关性白内障患者晶状体前囊膜组和人晶状体上皮细胞凋亡模型组,miR-181的表达显著升高;miR-181 mimic转染组,miR-181的表达显著升高,细胞凋亡率显著升高;miR-181 inhibitor转染组,miR-181的表达显著降低,细胞凋亡率显著降低,差异均有统计学意义(P<0.01)。结论:miR-181在年龄相关性白内障晶状体组织中呈高表达,miR-181能够促进人晶状体上皮细胞凋亡,从而可能在年龄相关性白内障的发病过程中发挥一定作用,miR-181可能成为白内障非手术治疗的一种新途径,但具体机制有待进一步研究。