肾小球滤过率公式在中国慢性肾脏病儿童中的应用

目的:将国外学者提出的9种肾小球滤过率(GFR)评估公式与Tang等提出的2个中国儿童GFR评估公式进行对比,选择出适合慢性肾脏病(CKD)儿童的GFR评估公式。方法:回顾性分析2011-01-01~2021-12-31于中国医科大学附属盛京医院小儿肾脏风湿免疫科住院的CKD患儿资料。以99mTc-DTPA肾动态显像测得的GFR(iGFR)为金标准,比较各公式估算的肾小球滤过率(eGFR)与iGFR之间的偏差、精确度、准确度;比较各公式对CKD评估的准确性。结果:纳入CKD患儿949例,其中男性547例(58%)。男性和女性患儿中,不论青春期前后,均以Tang提出的中国儿童GFR评估公式2的准确度最高。男性患儿中,CKD 1期公式1准确性最高,CKD 2~4期公式2准确性最高,CKD 5期C-B公式准确性最高。在女性患儿中,CKD 1期公式1准确率最高,CKD 2~3期公式2准确性最高,CKD 4期C-G公式及Filler公式准确性较高,CKD 5期CKD-EPI-CysC公式准确性最高;以iGFR<60 mL/(min·1.73m^(2))为CKD诊断标准,公式2诊断CKD的准确性最高。结论:推荐Tang提出的中国儿童GFR评估公式2作为中国CKD儿童评估GFR的首选。

他克莫司治疗儿童难治性肾脏疾病的临床评估

目的评价他克莫司治疗难治性肾脏疾病患儿的疗效及安全性。方法分析2012年8月至2016年1月在我院应用他克莫司并保持随访的26例肾脏疾病患儿的临床资料,比较患儿治疗前及治疗6个月后尿蛋白、三酰甘油、胆固醇、血清白蛋白、淋巴细胞亚群、肾功能、白细胞、血糖水平的变化。结果 26例患儿经过他克莫司治疗3个月后,完全缓解12例,部分缓解9例,无效5例,总有效率81%。对曾用环磷酰胺、环孢素A、霉酚酸酯等免疫抑制剂无效的患儿,改用他克莫司后仍有效。与治疗前比较,治疗3个月及6个月后,尿蛋白、血胆固醇水平均下降(P<0.05),血清白蛋白水平升高(P<0.05);治疗3个月后T辅助细胞较治疗前下降(P<0.05);治疗6个月后总T细胞、T辅助细胞及总B细胞均较治疗前下降(P<0.05),而肾功能、血糖、白细胞治疗前、后比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论他克莫司短期疗效好,不良反应少,有较好的临床应用前景。

小儿水肿的鉴别诊断

水肿是小儿常见的症状及体征,除常见的肾性水肿外,还可由多病因引起,某些病因难以诊断易误诊或漏诊。介绍小儿水肿的鉴别诊断,以期对小儿水肿的临床诊断提供帮助。

小儿血尿的诊断

血尿是临床常见的症状,掌握科学的血尿诊断思路,合理地采用各种辅助检查,综合分析,才能正确地诊断血尿,减少漏诊和误诊。

儿童单发与再发性尿路感染病原菌分布及耐药性分析

目的探讨儿童单发尿路感染与再发性尿路感染的病原菌分布及耐药性,为合理使用抗生素提供依据。方法回顾性分析2015年1月1日至2019年12月31日我科单发和再发性尿路感染住院患儿的临床资料,包括性别、年龄、尿培养结果、耐药情况及抗生素使用情况。结果本研究共纳入尿路感染患儿777例,共987份病原学标本(单发组681份,再发组306份)。2组患者性别、年龄无统计学差异(P=0.180,P=0.055)。再发组泌尿系统畸形发生率(77.1%)显著高于单发组(20.1%),差异有统计学意义(P=0.001)。2组共检出515株病原菌(阳性检出率52.1%),其中86.4%为革兰氏阴性菌,12.0%为革兰氏阳性菌,1.5%为真菌。单发组与再发组最常见病原菌均为大肠埃希菌(70.1%vs 38.9%)。再发组非大肠埃希菌比例(61.1%)高于单发组(29.9%),差异有统计学意义(P=0.001)。药敏试验结果显示,2组大肠埃希菌、肺炎克雷伯杆菌对碳青霉烯类、β-内酰胺酶抑制剂复合制剂及磷霉素耐药性低。屎肠球菌、粪肠球菌对万古霉素、利奈唑胺、替加环素耐药性较低。多数抗菌药再发组耐药性高于单发组。临床经验性用药中,最常用的是头孢曲松钠/他唑巴坦钠。结论尿路感染住院患儿尿培养以大肠埃希菌为主,再发性尿路感染患儿非大肠埃希菌比例显著增高,且耐药性多于单发尿路感染。及时监测病原菌种类及药物耐药性分析,有助于选择合适抗生素控制尿路感染。

78例非全身型幼年特发性关节炎临床特点分析

目的分析78例非全身型幼年特发性关节炎(JIA)患儿的临床特点,为儿童JIA临床诊治提供依据。方法收集2013年1月至2020年1月中国医科大学附属盛京医院小儿风湿免疫科住院治疗的78例初诊非全身型JIA病例资料,包括一般情况、实验室检查及治疗等,并对其临床特点进行分析。结果78例患儿中,男女比例为0.66︰1,少关节型JIA 10例,多关节型JIA 45例,与附着点炎症相关的关节炎23例。少关节型JIA患儿多为幼儿期发病,炎症指标(C反应蛋白及红细胞沉降率)可无明显升高。多关节型JIA多为学龄前期和学龄期发病,与附着点炎症相关的JIA患儿多为青春前期和青春期发病,二者炎症指标均有明显升高,前者可有贫血表现。大部分患儿关节症状为关节活动障碍(59.0%),其次为关节肿胀(33.3%)。影像学常见表现为关节积液(71.8%)及滑膜增生(79.5%),同时,30.8%的患儿有骨质破坏。55例(70.5%)患儿初诊时即使用生物制剂治疗,多关节型JIA及与附着点炎症相关的JIA患儿使用生物制剂较未使用患儿的关节活动障碍好转时间明显缩短(P<0.05)。结论不同类型JIA患儿的一般情况、关节症状及炎症指标等临床特点存在差异。应用生物制剂可缩短部分患儿关节活动障碍好转时间。

中国血液净化患儿血压管理专家共识

血液净化技术已广泛应用于儿童危重症的救治和儿童终末期肾脏病的替代治疗。血压稳定是保证血液净化顺利进行的重要因素。儿童生长发育尚未成熟,体重小,血容量低,代偿能力弱,血压波动大。在不同病理状态下,血压的影响因素繁多,机制复杂。迄今为止,国内外尚缺乏儿童血液净化过程中血压管理的共识或指南。鉴于此,中国医师协会儿科医师分会儿童血液净化学组于2021年7月启动了共识撰写工作,旨在为我国血液净化患儿全周期血压的规范化管理提供指导性建议。学组根据临床工作经验、会议讨论和文献查阅确定共识内容,主要包括识别血压异常及达标标准、血液净化患儿全周期血压管理措施。血液净化模式包括维持性血液透析、腹膜透析、血浆置换、血液灌流及危重症患儿的血液净化。同时较详细阐述血液净化对相关药物的影响。经过3次线下会议、2次线上会议及微信群内的反复讨论和修订,最终拟定本共识,希望在保护血液净化患儿安全方面发挥重要作用。

KIM-1和NGAL对儿童紫癜性肾炎后急性肾损伤的诊断价值

目的探讨新型标志物肾损伤分子-1(KIM-1)和中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白(NGAL)对儿童紫癜性肾炎后急性肾损伤(A-on-HSPN)的早期诊断价值。方法选择2018年1月至2018年10月在中国医科大学附属盛京医院小儿肾脏风湿免疫科住院的紫癜性肾炎(HSPN)肾病综合征型患儿16例及A-on-HSPN患儿9例,留取血、尿和肾脏病理组织,采用ELISA方法检测血及尿KIM-1、NGAL含量,免疫组化法检测KIM-1、NGAL在患儿肾脏中的表达。结果A-on-HSPN组患儿血、尿KIM-1、NGAL水平明显高于HSPN组(P<0.05);KIM-1、NGAL表达于肾小管上皮细胞,且A-on-HSPN组患儿肾脏组织中KIM-1、NGAL表达明显高于HSPN组(P<0.05);尿KIM-1、NGAL水平和肾小球滤过率(GFR)呈负相关,而与24 h尿蛋白定量无明显相关性。结论KIM-1和NGAL可作为早期诊断儿童A-on-HSPN的生物标志物。

地氯雷他定辅助糖皮质激素治疗儿童肾病综合征疗效观察

目的探讨地氯雷他定辅助糖皮质激素治疗儿童原发性肾病综合征激素依赖型的疗效。方法筛选2018年1月至2019年1月在中国医科大学附属盛京医院诊断为肾病综合征小剂量激素依赖且IgE升高的患儿35例,单纯给予醋酸泼尼松(0.5 mg/kg)隔日晨起口服(单纯激素治疗组,n=15)连续6个月,或给予小剂量激素连续6个月的基础上加用地氯雷他定连续口服2个月(地氯雷他定组,n=20),治疗后随访9个月。监测患儿尿蛋白定量、肝肾功能、血胆固醇、血IgE和复发次数。结果2组血肌酐、IgE水平较治疗前明显下降,差异均有统计学意义(均P<0.01),单纯激素治疗组肾小球滤过率(eGFR)与治疗前无明显差异;与单纯激素组比较,地氯雷他定组治疗后eGFR升高,血IgE下降更明显,复发率降低,差异有统计学意义(P<0.05)。结论对于IgE升高有特应性体质表现的激素依赖型肾病综合征患儿,地氯雷他定辅助糖皮质激素治疗可减少复发,改善肾功能。

儿童再发性泌尿道感染危险因素分析

目的评价儿童泌尿道感染再发率以及危险因素,为儿童反复泌尿道感染诊疗提供依据。方法回顾性分析我院小儿肾脏科2015年1月1日至2020年1月1日期间因泌尿道感染住院患儿777例的临床资料,包括年龄、性别、是否存在便秘、是否为过敏体质、IgA水平、IgG水平、血肌酐、尿培养病原菌、血红蛋白水平以及泌尿系统彩超、排泄性膀胱尿路造影、静脉肾盂造影结果。所有患者随访至少1年,或截止至发生再发性泌尿道感染。采用logistic回归分析再发性泌尿系感染的危险因素。结果777例患儿中,96例(12.4%)发生了再发性泌尿道感染。再发性泌尿道感染组患儿泌尿系统畸形、过敏体质、便秘、贫血、IgA水平减低者比例明显高于非再发组。logistic分析提示,泌尿系统畸形(OR=9.637,95%CI:3.548~20.213,P=0.001)、过敏体质(OR=2.175,95%CI:1.222~3.871,P=0.008)和贫血(OR=2.876,95%CI:1.630~5.075,P=0.001)是再发性泌尿道感染的独立危险因素。结论约1/8初次泌尿道感染患儿会发生再发性泌尿道感染,再发性泌尿道感染的危险因素是泌尿系统畸形、过敏体质和贫血。

WNT4基因沉默对PAX2诱导肾小管上皮细胞间充质转分化的影响

目的:观察体外转染配对盒基因2(PAX2)对WNT4通路的激活作用及WNT4通路对PAX2诱导转分化的作用,探讨PAX2转分化机制。方法:应用脂质体介导将重组质粒pEGFP-PAX2转染入体外培养的大鼠肾小管上皮细胞,经G418筛选,建立稳定表达PAX2细胞系。细胞分为稳定转染PAX2组、空载组和对照组。Western blotting法和实时荧光定量(Real-time)PCR法检测各组细胞WNT4和β-catenin表达。应用靶向WNT4基因的siRNA沉默稳定转染PAX2细胞的WNT4,应用荧光显微镜观察转染效率,进行沉默鉴定筛选出最佳干扰链。将最佳干扰链WNT4siRNA转染至稳定转染PAX2细胞。在沉默24、48、72和96h应用Westernblotting法和Real-time PCR法检测β-catenin、正常肾小管上皮细胞表型标志物E-钙黏蛋白(E-cadherin)和成纤维细胞表型标志物α-肌动蛋白(α-SMA)表达,同时筛选出沉默最佳时间点。应用免疫组织化学染色法检测沉默最佳时间点组E-cadherin和α-SMA蛋白表达。结果:Western blotting和Real-time PCR检测,稳定转染PAX2细胞组WNT4和β-catenin蛋白及mRNA表达水平较空载组和对照组明显增加(P<0.05)。阴性siRNA转染入稳定转染PAX2细胞24h后荧光显微镜观察,转染效率为47.46%±4.48%。3条WNT4干扰链分别转染至稳定转染PAX2细胞,Real-time PCR和Western blotting结果显示第3干扰链沉默效果最佳,WNT4mRNA表达抑制率为66.9%±3.8%(P<0.05);WNT4蛋白表达抑制率为63.7%±2.5%(P<0.05)。将最佳干扰链转染至稳定转染PAX2细胞,干扰24、48、72和96h后,各时间点细胞中的β-catenin mRNA及蛋白表达水平较对照组下调,72h组下调明显(P<0.05);各时间点细胞中E-cadherin mRNA及蛋白表达水平较对照组明显上调,72h组上调明显(P<0.05);各时间点细胞中α-SMA mRNA及蛋白表达水平较对照组明显下调,72h下调明显(P<0.05)。结论:PAX2转染至肾小管上皮细胞后激活了WNT4通路,PAX2在体外诱导正常肾小管上皮细胞间充质转分化可能是通过WNT4/β-catenin通路完成。

PAX2稳转细胞系构建及对细胞迁移和侵袭能力的作用研究

目的探讨PAX2稳转细胞系构建及生物学作用。方法选择处于对数生长期大鼠肾小管上皮细胞,实验分为稳转组、空载组、对照组。稳转组采用阳离子脂质体转导将p EGFP-PAX2转入大鼠肾小管上皮细胞,空载组采用同样方法配置空载质粒转染溶液,对照组不添加质粒转染溶液。经G418筛选,建立稳定转染细胞系。通过细胞划痕实验及Transwell实验检测PAX2稳转细胞系的细胞迁移率及细胞侵袭作用。结果应用G418筛选14 d,稳转组大鼠肾小管上皮细胞有明显克隆长出,建立PAX2基因稳定转染肾小管上皮细胞系。稳转组在荧光显微镜下可见绿色荧光,基因融合表达获得成功。稳转组细胞PAX2条带密度与β-action吸光度比值为(1.00±0.04),空载组为(0.83±0.03),对照组为(0.85±0.04),3组吸光度比值比较,差异有统计学意义(F=398.7,P<0.05);其中稳转组吸光度比值高于空载组和对照组,差异均有统计学意义(P<0.05)。细胞划痕后18 h,对照组、空载组和稳转组细胞迁移率分别为(39.34±5.34)%、(40.56±7.54)%和(83.72±7.12)%,3组细胞迁移率比较,差异有统计学意义(F=431.8,P<0.05);其中稳转组细胞迁移率高于对照组和空载组,差异均有统计学意义(P<0.05)。各组细胞培养48 h后,对照组、空载组和稳转组迁移细胞分别为(23.33±3.63)、(22.00±8.14)、(45.67±7.14),3组迁移细胞数比较,差异有统计学意义(F=248.5,P<0.05);其中稳转组迁移细胞数高于对照组和空载组,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论 p EGFP-PAX2质粒成功转染大鼠肾小管上皮细胞,并成功筛选出高效稳定表达PAX2的稳转细胞系。PAX2稳转增加了肾小管上皮细胞的迁移及侵袭能力。

阿达木单抗治疗幼年特发性关节炎的疗效分析

探讨阿达木单抗治疗幼年特发性关节炎(JIA)的有效性和安全性。选取2019年1月至2021年1月中国医科大学附属盛京医院小儿风湿免疫科收治的诊断明确(JIA,除外全身型),常规治疗无效,且既往应用其他生物制剂疗效不佳或存在预后不良因素或并发症(重要关节受累或出现骨破坏、伴有眼虹膜睫状体炎等)的7例患儿。患儿均给予阿达木单抗治疗(24 mg/m,1次/2周,皮下注射),同时口服甲氨蝶呤和(或)来氟米特。比较患儿治疗前、治疗12周后C反应蛋白(CRP)、红细胞沉降率水平;患儿治疗后4、12、24周采用28处关节疾病活动度评分(DAS28)和幼年关节炎活动性系统评分(JADAS)评估病情,同时监测不良反应发生情况。结果显示,与治疗前比较,治疗12周后患儿CRP、红细胞沉降率均显著降低(P <0.05),其中6例(85.71%) DAS28评分提示达到临床缓解,关节疼痛和肿胀症状明显缓解,治疗24周后5例患儿JADAS评分提示达到临床缓解。骨破坏患儿骨破坏明显好转,关节腔积液消失,滑膜增生面积减少,血流消失。虹膜睫状体炎患儿眼部体征好转。治疗过程中患儿均耐受良好,没有严重不良反应发生。因此认为阿达木单抗治疗JIA疗效良好,不良反应轻微,值得临床上推广应用。

增殖细胞核抗原和caspase-3在单侧输尿管梗阻大鼠模型中的表达及其意义

目的探讨增殖细胞核抗原(PCNA)和caspase-3在单侧输尿管梗阻大鼠模型中的表达及其意义。方法 2011年5—12月选取清洁级Wistar大鼠48只进行随机对照试验,采用随机数字表法分为两组,假手术组(sham组)和模型组(UUO组)各24只,sham组分离输尿管不结扎,UUO组行左侧输尿管结扎术。每组术后3、7、14 d分为3组,每组8只,生化分析仪检测大鼠尿β2微球蛋白和血肌酐水平;苏木素-伊红(HE)染色,光镜观察肾脏病理形态改变;免疫组织化学染色(SABC)法、蛋白印迹(Western blot)法检测PCNA和caspase-3的表达。采用SPSS 13.0统计软件进行统计学处理。结果术后3、7 d两组尿β2微球蛋白水平比较,差异均无统计学意义(P>0.05);术后14 d两组尿β2微球蛋白水平比较,差异有统计学意义(P<0.05)。术后3、7、14 d两组血肌酐水平比较,差异均无统计学意义(P>0.05)。HE染色显示,sham组大鼠肾脏肾小管排列紧密、整齐;UUO组术后3 d,可见肾小管肿胀,部分肾小管轻度扩张,小管间质区域出现炎性浸润;术后7 d肾小管壁扩张,肾间质水肿;术后14 d肾小管结构已经完全被破坏,管腔塌陷。SABC法结果显示,两组术后3、7、14 d,肾小管内PCNA阳性细胞百分率比较,差异无统计学意义(P>0.05);肾间质内PCNA阳性细胞百分率比较,差异均有统计学意义(P<0.05)。两组术后3、7、14 d,肾小管内caspase-3阳性细胞百分率比较,差异均有统计学意义(P<0.05);肾间质内caspase-3阳性细胞百分率比较,差异均有统计学意义(P<0.05)。Western blot法结果显示,sham组肾皮质中有微量PCNA、caspase-3表达;UUO组术后PCNA、caspase-3表达增加,梗阻时间延长表达增加。结论 PCNA表达增加导致肾间质细胞过度增殖,参与梗阻性肾病病理过程。caspase-3活性明显增强,加速细胞凋亡,在梗阻性肾病中对起着重要作用。细胞的增殖与凋亡参与UUO大鼠模型肾纤维化过程,PCNA和caspase 3是这一过程的两个重要参数。

EGCG对梗阻性肾病大鼠肾小管上皮细胞转分化的干预作用及机制

目的探讨表没食子儿茶素没食子酸酯(EGCG)对大鼠肾间质纤维化和肾小管上皮细胞转分化的作用及其机制。方法雄性Wistar大鼠56只随机分为正常对照组(n=8)、单侧输尿管梗阻(UUO)模型组(n=24,以单侧输尿管结扎制作肾间质纤维化模型)和EGCG治疗组(n=24,单侧输尿管结扎术后每日给予腹腔注射EGCG 5 mg/kg)。于3,7,14 d分别处死UUO模型组和EGCG治疗组中各8只大鼠,进行HE染色和Masson染色观察肾组织病理变化,免疫组化法检测肾组织中α平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、细胞角蛋白18(CK-18)、转化生长因子β(1TGF-β1),Western blot法测定肾组织胞核内核转录因子κB(NF-κB)蛋白表达。结果 UUO组出现肾小管损伤和肾间质纤维化,肾组织中CK-18表达减少,α-SMA和TGF-β1表达增多,肾组织胞核内NF-κB表达增多,而EGCG治疗组较UUO模型组上述改变减轻。结论 EGCG能维持肾小管上皮细胞表型,减轻UUO大鼠模型中肾小管上皮细胞转分化和肾间质纤维化。在体内,EGCG能通过减少TGF-β1的表达和减少NF-κB的活化而减轻肾小管上皮细胞转分化和肾间质纤维化。

20例儿童急性间质性肾炎的临床与病理分析

回顾性分析经肾活检确诊为急性间质性肾炎(AIN)的20例儿童的临床病理特点及预后情况。儿童AIN发病原因以感染和药物最常见,临床表现上均有尿常规异常,易发生急性肾损伤,肾脏病理以肾小管间质轻度病变为主,经药物及对症治疗后,绝大部分预后良好。预防感染及合理用药是减少AIN发生的关键。

EGCG对肾小管上皮细胞转分化过程中MMP9与Cyclin D1表达的影响及意义

目的探讨表没食子儿茶素没食子酸酯(EGCG)对肾小管上皮细胞转分化的作用机制。方法培养大鼠肾小管上皮细胞株NRK-52E,将其分成4组。1组:正常对照组(N),以DMEM培养液为空白对照。2组:转化生长因子(TGF-β1)诱导组;3组:EGCG200μg/L干预组;4组:EGCG400μg/L干预组。各细胞组在作用48 h后,应用免疫组化检测平滑肌肌动蛋白(α-SMA)和角蛋白(CK-18),Western-blot分析胞浆蛋白细胞周期素D1(Cyclin D1)、基质金属蛋白酶9(MMP9)含量,实时荧光定量PCR法测Cyclin D1、MMP9mRNA的相对表达量。结果 NRK细胞被TGF-β1诱导48 h后,胞浆中出现α-SMA蛋白高表达,CK-18蛋白表达明显减少;Cyclin D1、MMP9蛋白及其mRNA出现了高表达;EGCG干预组上述改变明显减轻。结论 EGCG以剂量依赖方式抑制TGF-β1诱导的NRK细胞的转分化,其机制可能是通过抑制Cyclin D1、MMP9蛋白及mRNA表达而实现的。

儿童重症风湿免疫性疾病的血液净化治疗

儿童常见的风湿免疫性疾病包括系统性红斑狼疮、抗中性粒细胞胞浆抗体相关血管炎、血栓性微血管病、过敏性紫癜、格林巴利综合征、重症肌无力等,危重病例有生命危险,药物治疗有时不能有效控制病情。近年来,血液净化治疗在儿科风湿免疫性疾病领域得到了越来越广泛的应用。该文对国内外较新的临床研究及共识、指南等文献进行综述。

生物制剂在儿童风湿免疫性疾病中的应用

生物制剂开辟了靶向治疗风湿免疫性疾病的先河，为经传统抗风湿药物治疗无效的风湿免疫性疾病儿童提供了新的选择。本文介绍了细胞因子拮抗剂及细胞靶向生物制剂的种类、用法、疗效、不良反应及注意事项，为指导临床合理用药提供参考。

与过敏相关的单纯关节痛患儿35例临床分析

收集2019年1月至2019年12月于本科室就诊的与过敏相关的35例单纯关节痛患儿的临床资料,男19例,女16例。82.86%患儿疼痛关节数>1,疼痛关节以膝关节(51.43%)、踝关节(45.71%)等下肢关节为主。患儿既往有湿疹、牛奶蛋白过敏、荨麻疹、皮肤瘙痒、气道高反应、过敏性结膜炎病史,血IgE水平[(150.61±109.83)IU/mL]高于正常值。与无关节积液患儿比较,有少量关节积液患儿血清总IgE水平更高(P<0.05)。控制饮食,口服抗组胺药(地氯雷他定)治疗后关节疼痛症状均缓解。因此认为,对于病程<6周的单纯关节疼痛患儿,若存在过敏体质且血清总IgE水平升高时可尝试应用抗组胺药物治疗。