肝癌组织中Livin蛋白的表达及其与临床病理特征的关系

目的探讨Livin蛋白在肝癌组织中的表达及其意义。方法采用免疫组化SP法检测78例肝癌及33例肝血管瘤旁正常肝组织中Livin蛋白的表达;光镜下计数阳性细胞数并根据不同临床特征进行统计学分析。结果肝癌组织中Livin蛋白的表达明显高于正常肝组织(P<0.001);Livin蛋白的表达与患者的性别、年龄以及是否患有乙肝、丙肝、TNM临床分期均无明显关系,而与肝癌是否发生转移有明显关系;肝癌发生转移者Livin蛋白的表达率明显高于未转移者(P<0.05)。结论Livin蛋白的过度表达可能在肝癌的发生、发展中起重要作用,并与肝癌的转移密切相关。

胆管癌中Livin蛋白和血管内皮生长因子的表达及与Caspase-3的相关性研究

目的:探讨凋亡抑制因子Livin蛋白和血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)在胆管癌组织中的表达及与Caspase-3的相关性。方法:采用免疫组化SP法检测80例胆管癌及30例正常胆管组织(取自其他良性疾病行胆管切除者)中Livin蛋白、VEGF及Caspase-3的表达。结果:胆管癌组织中Livin蛋白和VEGF的表达明显高于正常胆管组织(P=0.00),Caspase-3的表达低于正常胆管组织(P=0.04);在胆管癌组织中Livin蛋白、VEGF的表达具有正相关性(r=0.532,P=0.00),Livin蛋白、VEGF的表达均与Caspase-3的表达呈负相关关系(r=-0.668,P=0.00;r=-0.371,P=0.01)。结论:Livin蛋白、VEGF在胆管癌组织中均高表达及两者呈正相关性,表明两者在胆管癌的发生发展中可能起重要作用并且可能发挥协同作用,二者的表达均与Caspase-3的表达呈负相关关系,提示二者均可能是通过抑制凋亡来参与胆管癌的发生发展。

PTEN、HER-2/neu和PKB在胆管癌组织中的表达及其意义

目的:观察PTEN、HER-2/neu和PKB在胆管癌组织中的表达,并探讨其与胆管癌发生、发展的关系及其意义.方法:应用免疫组织化学SP法检测80例胆管癌组织和24例正常胆管组织(取自其他良性疾病行胆管切除者)中PTEN、HER-2/neu和PKB的表达.结果:胆管癌组织中PTEN表达显著低于正常胆管组织(40.00%vs79.17%,χ2=11.33,P=0.001),HER-2/neu的表达显著高于正常胆管组织(73.75%vs33.33%,χ2=13.16,P=0.000),PKB的表达显著高于正常胆管组织(80.00%vs54.17%,χ2=6.41,P=0.01).PTEN和HER-2/neu蛋白表达呈明显负相关(r=-0.456,P=0.000);PTEN与PKB蛋白表达呈明显负相关(r=-0.355,P=0.001);HER-2/neu与PKB蛋白表达呈明显正相关(r=0.374,P=0.001).结论:PTEN表达的缺失和HER-2/neu过表达可能导致细胞增殖失控,与胆管癌的发生、发展密切相关,二者均与PKB呈相关性,提示二者均可能通过PI3K-PKB信号转导参与胆管癌的发生发展.

紧密连接蛋白-2表达及定位变化与胰腺癌细胞解离的关系

目的:探讨紧密连接蛋白-2(Tjp-2)表达及定位变化与胰腺癌细胞解离的关系.方法:采用RT-PCR和Western blot分别检测解离型高转移株(PC-1.0)和非解离型低转移株(PC-1)胰腺癌细胞中Tjp-2的基因和蛋白表达,利用免疫细胞化学方法确定PC-1.0和PC-1细胞中Tjp-2的细胞内定位变化.最后分析Tjp-2的表达及细胞内定位变化与胰腺癌细胞解离的相关性.结果:Tjp-2mRNA和蛋白在PC-1.0细胞中过度表达,在PC-1细胞中表达均较弱.U0126(丝裂原活化蛋白激酶激酶抑制剂)抑制PC-1.0细胞中Tjp-2mRNA的表达,含细胞解离因子的培养液上清(DF-CM)则诱导PC-1细胞中Tjp-2mRNA表达增加.在PC-1.0细胞中Tjp-2蛋白主要分布于细胞质(FI=3273.7±131.2),U0126处理后细胞边缘部位的Tjp-2表达显著增强(FI=2814.8±297.0,P=0.003).在PC-1细胞中Tjp-2蛋白主要分布于细胞间连接部位(FI=401.5±41.3),经DF-CM处理后细胞间连接部位Tjp-2表达明显减弱(FI=135.6±15.8,P=0.024),再经U0126处理后Tjp-2蛋白再次向细胞间连接部位聚集(FI=382.6±34.1,P=0.072).结论:Tjp-2基因表达及蛋白的细胞内定位变化参与调控胰腺癌细胞解离.Tjp-2可作为抗胰腺癌侵袭转移分子靶向治疗的新靶点.

胰腺癌细胞解离中occludin和MEK/ERK信号通路的作用

目的:明确occludin及MEK/ERK信号转导通路参与胰腺癌细胞解离的调节机制。方法:以免疫荧光法检测人及仓鼠胰腺癌细胞高转移株(Aspc-1、PC-1.0)和低转移株(Capan-2、PC-1)中occludin蛋白的表达变化,分析其与MEK/ERK信号转导通路的关系及相应细胞的形态学变化。结果:MEK抑制剂U0126可明显诱导细胞间连接处的occludin表达,并抑制仓鼠胰腺癌高转移株细胞中磷酸化MEK和ERK的表达,在光镜下可观察到高转移株细胞聚集成团,伪足消失。细胞解离因子(dissociation factor,DF)破坏occludin在细胞连接处的表达,同时诱导仓鼠胰腺癌低转移株细胞中磷酸化MEK和ERK的表达,光镜下可观察到低转移株细胞呈单个细胞、解离方式生长。而先经DF处理后,再加入U0126培养的低转移株细胞中,occludin表达较前恢复,磷酸化MEK和ERK的表达减少,光镜下观察到低转移株细胞从解离状态重新恢复为岛样细胞克隆方式生长。结论:MEK/ERK信号转导通路可能通过影响occludin的细胞内定位与表达,调控胰腺癌细胞的解离状态。

胰腺癌细胞解离中紧密连接蛋白claudin-1的表达和定位变化

目的:探讨claudin-1的表达及定位与胰腺癌细胞解离状态的关系。方法:利用免疫细胞化学和Western blot分别检测胰腺癌高、低转移株细胞中claudin-1、丝裂原活化蛋白激酶激酶2(MEK2)和磷酸化MEK1/2(p-MEK1/2)的表达变化,并观察其及相应细胞的形态学变化,探讨MEK2信号通路在胰腺癌细胞解离中的作用。结果:细胞解离因子能诱导胰腺癌低转移株细胞(PC-1、Capan-2)中MEK2和p-MEK1/2表达增加和细胞解离,并破坏claudin-1在细胞膜的定位。相反,U0126(MEK1/2抑制剂)可诱导胰腺癌高转移株(PC-1.0、AsPC-1)细胞膜claudin-1的表达和细胞克隆形成,并明显抑制MEK2和p-MEK1/2的表达。结论:claudin-1表达及定位与胰腺癌细胞解离状态密切相关,其可能的分子机制是激活了MEK2信号通路。

U0126在胰腺癌细胞解离中作用机制的实验研究

胰腺癌具有很强的侵袭转移能力,因此开发针对侵袭、转移的新型治疗方法将有助于提高胰腺癌的治疗效果。癌细胞从原发部位解离、游走是癌细胞侵袭、转移过程中最为关键的第一步。因此,揭示胰腺癌细胞解离的细胞及分子生物学过程有利于加深对胰腺癌侵袭、转移分子机制的了解．同时为开发针对胰腺癌侵袭、转移的分子靶向治疗提供了具有重要价值的新靶标。

Livin蛋白和血管内皮生长因子在肿瘤中的表达

Livin是抑制凋亡蛋白家族（IAP）的新成员，在多数恶性肿瘤组织中高表达，其主要功能是抑制细胞凋亡。细胞凋亡与肿瘤细胞的发生、发展密切相关，肿瘤的生存更有赖于血管的生成。血管内皮生长因子（VEGF）是目前所知作用最强的一种促血管生长因子，几乎在所有的人体肿瘤和肿瘤细胞株中皆有表达。现就Livin和VEGF在肿瘤中的表达作一综述。

肝外胆管癌中Livin的表达及其与临床病理特征的关系

目的探讨Livin蛋白在胆管癌组织中的表达及其意义。方法采用免疫组化SP法检测80例胆管癌及30例正常胆管组织(取自其他良性疾病行胆管切除者)中Livin蛋白的表达;分析其表达与临床病理特征的关系。结果胆管癌组织中Livin蛋白的表达明显高于正常胆管组织(P=0.00);Livin蛋白的表达与患者的性别、年龄、肿瘤大小、TNM临床分期、分化程度均无明显关系,但与淋巴结转移关系密切,胆管癌淋巴结转移者中Livin蛋白的表达率明显高于未转移者(P=0.00);结论Livin蛋白的过度表达可能在胆管癌的发生、发展中起重要作用,并与胆管癌的淋巴结转移密切相关。

CXC趋化因子受体2在肝细胞癌中的表达及意义

目的探讨CXC趋化因子受体2（CXCR2）在肝细胞癌中的表达及与肝细胞癌发生、发展的关系。方法采用半定量逆转录．聚合酶链反应（RT—PCR）、Western blot检测42例肝细胞癌组织及相应癌旁组织和23例正常肝组织中CXCR2mRNA和蛋白表达水平，分析表达水平与肝细胞癌生物学特征的关系。结果肝细胞癌组织、癌旁组织和正常肝组织中CXCR2mRNA和蛋白表达分别为（1．18±0．32、0．83±0．23和0．72±0．23）和（1．78±0．20、0．98±0．13和0．90±0．18），同癌旁组织和正常肝组织比较，肝细胞癌组织中CXCR2mRNA和蛋白表达水平明显升高（P〈0．05）。肝内转移、门静脉癌栓和低分化组中CXCR2mRNA和蛋白表达水平分别为（1．37±0．26、1．45±0．34、1．31±0．28）和（1．87±0．20、1．934-0．13、1．86±0．18），无肝内转移、无门静脉癌栓和高分化组CXCR2mRNA和蛋白表达水平分别为（1．08±0．33、1．08±0．27、1．06±0．33）和（1．73±0．18、1．73±0．20、1．71±0．19），差异有统计学意义（P〈0．05）。CXCR2蛋白表达与TNM分期相关，Ⅲ－Ⅳ期和Ⅰ－Ⅱ期表达水平分别为1．86±0．20和1．72±0．19，差异有统计学意义（P〈0．05）。结论CXCR2在肝细胞癌组织中高表达，其高表达可能与肝细胞癌发生、侵袭和转移相关。

肝癌组织中livin蛋白与突变型p53蛋白的表达及相关性研究

目的 研究livin蛋白与突变型p53蛋白在肝癌组织中的表达和意义以及探讨两者间相关性.方法 采用免疫组织化学SP法检测80例肝癌、39例肝硬化、33例肝血管瘤旁正常肝组织中livin蛋白和突变型p53蛋白的表达,并通过显微图像分析方法进行结果观察.结果 livin蛋白的表达强度依次为肝癌组织(Median=5.09;P25～P75=3.06～8.28)、肝硬化组织(Median=3.05;P25～P25=2.49～4.25)、正常肝组织(Median=1.99;P25～P75=1.54～2.54)(P<0.001);突变型p53蛋白表达强度为肝癌组织(Median=43.13;P25～P75=20.41～78.53)高于肝硬化组织(Median=20.30;P25～P75=14.90～28.08)和正常肝组织(Median=15.52;P25～P75=12.81～21.80)(P<0.001),肝硬化组织与正常肝组织间差异无统计学意义.肝癌组织中livin蛋白与突变型p53蛋向的表达呈正相关(r=0.241,P<0.05).结论 肝癌组织中livin蛋白及突变型p53蛋白的高表达以及两者呈正相关,表明两者可能对肝癌的发生与发展起着协同作用.

胰体尾切除术后胰瘘的相关性因素分析

目的探讨胰体尾切除术后胰瘘发生的相关性因素。方法回顾性总结了82例行胰体尾切除的患者术前、术中操作以及术后并发症和死亡率发生的情况,并分析和术后胰瘘发生的相关性因素。结果术后有36名患者出现并发症占43.9%(36/82)。其中胰瘘是最常见的并发症,发生率为37.8%(31/82)。其中是否结扎主胰管和术后胰瘘的发生具有明显的相关性(P=0.010),而性别、年龄、是否并存糖尿病、胰腺的质地、术中失血量、是否预防性应用奥曲肽、是否用生物胶封闭胰腺断端、术后低蛋白血症和是否联合其它脏器切除均和胰瘘的发生无明显的相关性。结论胰体尾切除术后最常见的并发症仍然是胰瘘,术中单独结扎胰管可以减少胰瘘的发生率。

表柔比星及RNAi对乳腺癌细胞系c—FLIP表达的影响

恶性肿瘤化疗失败的主要原因是耐药，化疗药物和死亡受体有着共同的诱导细胞凋亡的途径，并对凋亡表现出交叉抵抗。因此采用RNAi技术沉默癌基因的同时有可能抑制耐药相关基因表达。本研究探讨表柔比星及RNAi共同作用对乳腺癌细胞系c—FLIP表达的影响。

保留十二指肠的胰头切除术13例

目的 总结保留十二指肠的胰头切除术的适应证和效果。方法同顾性分析2002年1月至2007年9月13例行保留十二指肠的胰头切除术患者的临床资料，总结手术技巧、并发症和预后。结果术后发生1例胰漏，1例胆漏。10例获得随访，慢性胰腺炎患者术后症状缓解明显，肿瘤患者无复发征象。结论保留十二指肠的胰头切除术对于慢性胰腺炎和其他局限性良性病变有较好疗效。

表柔比星抑制乳腺癌细胞c-FLIP表达的时间窗和量效关系

目的探讨表柔比星抑制乳腺癌细胞中c-FLIP表达的时间窗和量效关系。方法将MCF-7及MDA-MB-231乳腺癌细胞株分成两组:处理组中加入终浓度分别为4.0,2.0,1.0,0.5,0.25 mg/L的表柔比星,对照组加入等量生理盐水。各组分别作用24,48,72 h后采用RT-PCR技术检测两组细胞株中c-FLIP的表达,流式细胞仪检测细胞凋亡百分率。结果随着表柔比星浓度的增加和作用时间的延长,c-FLIP的表达整体呈下降趋势;随着表柔比星浓度的升高及作用时间的延长,乳腺癌细胞凋亡率逐渐增加,呈剂量和时间依赖性。其中以浓度为2 mg/L作用72 h凋亡率最高。结论表柔比星化疗诱导乳腺癌细胞的凋亡可能系通过抑制c-FLIP的表达,且其效果以浓度为2 mg/L作用72 h时为最佳。

表柔比星对乳腺癌细胞c-FLIP表达的影响

目的:探讨表柔比星对乳腺癌细胞中c-FLIP表达的影响。方法:以MCF-7及MDA-MB-231乳腺癌细胞株为对象分两组:处理组中加入2 mg/L的表柔比星分别作用24 h、48 h和72 h,对照组加入等量生理盐水。采用RT-PCR技术检测两组细胞株中c-FLIP的表达,流式细胞仪检测细胞凋亡百分率。结果:MCF-7及MDA-MB-231乳腺癌细胞中有c-FLIP的表达;与对照组相比,表柔比星作用24 h,乳腺癌细胞中c-FLIP的表达明显下降,48 h时c-FLIP表达有所升高,72 h时表达最低。随着表柔比星作用时间延长,细胞凋亡率逐渐增加,72 h达到最高。结论:表柔比星通过抑制c-FLIP的表达促进乳腺癌细胞的凋亡。