目的:检测传代后的视网膜色素上皮细胞(retinal pigment epithelial,RPE)MERTK基因表达的变化,明确传代的异体RPE移植的可行性。方法:离体培养原代的人视网膜色素上皮细胞,将原代细胞以1∶3比例进行传代至第6代,以SYBRGreen I real ti...目的:检测传代后的视网膜色素上皮细胞(retinal pigment epithelial,RPE)MERTK基因表达的变化,明确传代的异体RPE移植的可行性。方法:离体培养原代的人视网膜色素上皮细胞,将原代细胞以1∶3比例进行传代至第6代,以SYBRGreen I real time RT-PCR方法检测不同传代数的RPE细胞MERTK基因表达的水平,采用2-ΔΔCT方法计算定量PCR的数值进而比较各代MERTK基因表达的的变化。结果:原代及传代的RPE细胞均表达MERTK基因。第二代RPE细胞MERTK基因表达水平与原代相同,第3~6代RPE细胞MERTK基因表达水平均明显低于原代。结论:传代的RPE细胞可以作为异体视网膜色素上皮细胞移植的细胞来源,但以第二代的RPE细胞为最佳选择。展开更多
基金National Natural Science Foundation of China(No.39800167)~~
文摘目的:检测传代后的视网膜色素上皮细胞(retinal pigment epithelial,RPE)MERTK基因表达的变化,明确传代的异体RPE移植的可行性。方法:离体培养原代的人视网膜色素上皮细胞,将原代细胞以1∶3比例进行传代至第6代,以SYBRGreen I real time RT-PCR方法检测不同传代数的RPE细胞MERTK基因表达的水平,采用2-ΔΔCT方法计算定量PCR的数值进而比较各代MERTK基因表达的的变化。结果:原代及传代的RPE细胞均表达MERTK基因。第二代RPE细胞MERTK基因表达水平与原代相同,第3~6代RPE细胞MERTK基因表达水平均明显低于原代。结论:传代的RPE细胞可以作为异体视网膜色素上皮细胞移植的细胞来源,但以第二代的RPE细胞为最佳选择。