原核细胞中人神经生长因子基因的克隆

目的:克隆人神经生长因子cDNA,为神经生长因子cDNA的表达作准备。方法:采用大肠杆菌JM 109菌株作为宿主菌,以pUC 118作为克隆载体,使用限制性内切酶BamHI,PstI酶切DNA片段,采用磷酸钙转染法转化细菌,α互补和限制性酶切图谱鉴定转化细菌。结果:βNGF cDNA经BamHI和PstI 双酶切后,经过重组,与载体连接在一起,转化大肠杆菌后,形成了克隆。结论:应用JM 109作为宿主,pUC 118为克隆载体,成功克隆了人神经生长因子cDNA。