促甲状腺激素对大鼠脂肪组织中瘦素、脂联素、TNF-α及IL-6表达水平的影响

目的观察促甲状腺激素(TSH)对大鼠脂肪组织中瘦素、脂联素、TNF-α及IL-6表达水平的影响。方法将24只Wistar大鼠随机分为3组、每组8只。完全甲减组手术完全切除甲状腺,皮下注射生理盐水。正常对照组行甲状腺切除假手术,皮下注射生理盐水。亚临床甲减组手术完全切除甲状腺,于颈背部每日皮下注射左甲状腺素钠溶液建立亚临床甲减模型。建模成功后,留取各组附睾周围的内脏脂肪组织,分别采用Western blotting、Real-time PCR法检测其瘦素、脂联素、TNF-α、IL-6蛋白及mRNA表达水平。结果亚临床甲减组及完全甲减组脂肪组织瘦素、TNF-α及IL-6蛋白及mRNA表达水平高于正常对照组(P均<0.05),而脂联素蛋白及mRNA表达水平低于正常对照组(P均<0.05)。完全甲减组脂肪组织瘦素、TNF-α及IL-6蛋白及mRNA表达水平高于亚临床甲减组(P均<0.05),而脂联素蛋白及mRNA表达水平低于亚临床甲减组(P均<0.05)。结论 TSH能促进大鼠脂肪组织瘦素、TNF-α、IL-6表达,抑制脂联素表达。

瘦素基因3′非翻译区对基因表达的调控作用

目的探讨人类瘦素(hLEP)基因3′非翻译区(3′-UTR)对基因表达的影响,为调控瘦素(LEP)的表达提供分子生物学依据。方法应用生物信息学软件预测hLEP基因3′-UTR中潜在的miRNA结合位点;通过基因重组构建含有hLEP基因3′-UTR的荧光素酶报告载体pGL3-LEP,在人肝癌HepG2细胞中通过瞬时转染法观察报告基因的表达变化,并应用化学发光法检测荧光素酶的活性。结果预测到hLEP基因3′-UTR中含有miR-296的结合位点,通过过表达miR-296观察到含有hLEP 3′-UTR的报告基因表达被抑制,与阴性对照组比较,miR-296使含有hLEP基因3′-UTR片段的报告载体pGL3-LEP荧光素酶的活性下降50%(P<0.05),其荧光素酶活性显著高于不含有该片段的对照载体(P<0.05)。结论 hLEP基因3′-UTR参与了LEP的表达调控。