多倍体肿瘤细胞的建立及其生物学特性的研究

目的:建立多倍体肿瘤细胞,研究其增殖、分裂和药物敏感性。方法:将鼠纤维肉瘤细胞株Meth-A经270 nmol/L秋水仙碱、800nmol/L K-252a、100nmol/L Staurospo-line和100nmol/L紫杉醇处理60h后继续培养,台盼蓝染色计数细胞,经碘化丙啶染色后流式细胞仪检测细胞DNA含量;并测定肿瘤细胞对3种化疗药物的半数抑制浓度(IC50)。结果:建成了可稳定生长47d的多倍体细胞,DNA含量为4倍体。此细胞呈指数增殖,但比2倍体Meth-A细胞株生长缓慢。柔红霉素对2倍体和4倍体细胞的IC50分别为(0.022±0.002)和(0.023±0.003)μg/mL,顺铂的IC50分别为(0.108±0.035)和(0.173±0.086)μg/mL,两者差异无统计学意义,t值分别为0.85和1.23,P均>0.05;但紫杉醇的IC50分别是(39.812±0.116)和(21.385±0.660)μg/mL,4倍体细胞明显低于2倍体细胞,t=6.16,P<0.01。Gimsa染色显示,多倍体细胞体积大,多核。结论:4倍体细胞可连续地增殖和分裂,对抗肿瘤药物仍然敏感,此细胞可以用于研究多倍体化后的生物学行为。

恶性肿瘤患者化疗前后免疫功能状况及胸腺五肽等的调节作用

目的:研究恶性肿瘤患者的免疫功能状态和调节免疫功能的治疗方法。方法:分别用免疫细胞化学法和生化法检测95例恶性肿瘤患者和18名健康人的细胞免疫功能(CD3、CD4、CD8和CD56)和体液免疫功能(C3、C4、IgA、IgM和IgG);比较不同治疗方法对患者免疫指标的影响。结果:38例初诊和47例化疗后恶性肿瘤患者与18名健康人的细胞免疫功能比较,肿瘤患者的CD3、CD4和CD4/CD8明显低于健康人,CD8(除生物治疗后)和CD56明显高于健康人,但初诊和化疗后患者间差异无统计学意义,P<0·05。经胸腺五肽(欧宁)治疗后的22例患者,CD3比例略有上升,CD4和CD4/CD8明显上升,CD8明显下降,CD56略有下降。经中药治疗的16例患者,CD4略有上升,CD8比例明显降低,CD4/CD8明显增高。肿瘤患者与健康人比较,IgG明显高于健康人;经胸腺五肽和中药治疗后,体液免疫功能无明显变化。结论:恶性肿瘤患者细胞免疫功能低下,体液免疫功能基本正常;胸腺五肽和中药治疗后均明显改善了患者的细胞免疫功能,但仍达不到健康人水平;两种治疗方法对体液免疫功能影响不大。

肺癌组织蛋白激酶C活性和亚型的测定及其临床意义

目的 研究肺癌组织蛋白激酶C活性、亚型及其临床意义。方法 从23例肺癌患者4种类型的新鲜组织取材，测定其蛋白激酶C活性及亚型，并与正常肺组织作比较。结果 肺癌组织蛋白激酶C活性明显高于正常肺组织（t=2．46，P〈0．05），而且以细胞膜的升高更为明显（t=4．63，P〈0．01），表现出典型的转膜现象；4种类型肺癌组织的蛋白激酶C活性未见统计学差异（P〉0．05）。肺癌各年龄组、吸烟组与非吸烟组的蛋白激酶C活性无统计学差异（P〉0．05）。按pTNM分期比较，自Ⅰ期～Ⅲb期，细胞质和细胞膜的蛋白激酶C活性逐渐升高，但各期间差异无显著性（P〉0．05）。肺癌组织蛋白激酶C活性随分化程度增高而降低，以未分化癌为最高。另外，蛋白激酶C—a在肺癌组织胞浆的表达较正常肺组织胞浆明显增高（P〈0．05）。结论 蛋白激酶C活性显著增高可能在肺癌发生中有重要作用，可能是一种判断肺癌进展和分化程度的重要标志物。

十字孢碱促进多柔比星诱导的多药抗药性肿瘤细胞系的凋亡

目的明确蛋白激酶 C(PKC)活性的抑制是否能促进化疗药物诱导的多药抗药肿瘤细胞系的凋亡。方法选用口腔鳞癌细胞 KB/S 及其多药抗药株 KB/VCR,常规细胞培养,比较在单独或联合 PKC 抑制剂十字孢碱的情况下,多柔比星(ADM)诱导这2种细胞的凋亡情况。凋亡采用流式细胞术和吖啶橙荧光染色检测,并经电子显微镜观察证实。结果 ADM 0.04μg/ml,作用36h 有96.68%KB/S 细胞凋亡,作用48h 有64.99%的 KB/VCR 细胞凋亡;将 ADM 质量浓度增加到0.4μg/ml 和2.0μg/ml 时,KB/VCR 细胞凋亡比例分别为69.74%和37.18%;合用十字孢碱后,凋亡细胞比例分别增加到82.58%和47.65%,经统计学处理,前者 X^2=4.5,P<0.05;后者 X^2=2.2,P>0.05。这些结果均经电镜和吖啶橙染色证实。结论耐受凋亡可能是肿瘤细胞多药抗药的机制之一,而 PKC 抑制剂可解除这种耐受。