miR-204调控SIRT1在人晶状体上皮细胞凋亡中机制研究

目的探讨miR-204的表达水平对人晶状体上皮细胞SRA01/04凋亡活动的影响及其靶向调控SIRT1的机制。方法实验研究。对2016年6~11月在人晶状体上皮细胞系SRA01/04进行培养，利用过氧化氢（H2O2）构建SRA01/04细胞体外凋亡模型，实时荧光定量PCR法检测miR-204表达水平的变化；向SRA01/04转染miR-204模拟物（mimic）、miR-204抑制物（inhibitor）及其两者的阴性对照（negative control），分别上调和下调其miR-204的表达水平，转染48h后采用实时荧光定量PCR的方法验证转染效率；流式细胞仪检测miR-204对人晶状体上皮细胞凋亡过程的影响；通过文献及microRNA数据库，预测miR-204可能靶向调控SIRT1基因的表达；并采用实时荧光定量PCR法检测各组细胞SIRT1表达水平。结果与正常人晶状体上皮细胞相比，miR-204在凋亡模型中的相对表达量显著增加。在人晶状体上皮细胞系SRA01/04中，上调miR-204的表达水平可以促进过氧化氢诱导的人晶状体上皮细胞凋亡，并显著降低SIRT1基因表达水平；而下调miR-204的表达水平可以减少过氧化氢诱导的人晶状体上皮细胞凋亡，并显著升高SIRT1基因的表达水平。差异均有统计学意义（P〈0.05）。结论miR-204在人晶状体上皮细胞系SRA01/04凋亡模型中表达上调，miR-204可能通过调控SIRT1表达影响人晶状体上皮细胞SRA01/04凋亡，从而在以晶状体上皮细胞凋亡为基础的白内障发病机制中发挥作用。

四种仪器用于白内障术前生物学测量的比较

目的比较波前像差仪OPD—Scan Ⅲ、三维眼前节分析仪Pentacam、光学生物测量仪Lenstar L900和自动电脑验光仪KR-8100P测量角膜曲率、角膜散光、人工晶状体度数的差异性和一致性。方法前瞻性临床研究。选取2015年11月至2016年3月在中国医科大学附属第四医院眼科行白内障手术的患者109例（118只眼），应用四种仪器分别测量角膜曲率、散光轴位，并计算J0（cylinder at 0-degree meridian）、J45（cylinder at 45-degree meridian）、平均角膜曲率Km、人工晶状体度数，所测数据间的差异性对比采用配对t检验，一致性对比采用Bland-Altman分析。结果配对f检验结果显示四种仪器测量值间差异无统计学意义（P〉0．05）。在测量角膜曲率和计算人工晶状体度数时四种仪器一致性较好，在散光的测量时OPD—Scan Ⅲ与Pentacam一致性较好，其余仪器间一致性较差。结论在测量角膜曲率和计算人工晶状体度数时四种仪器差异小，一致性好，可以相互替换，但涉及散光的测量或如果植入的人工晶状体与散光轴位有关时，OPD—Scan Ⅲ与Pentacam可以相互替换，其余仪器需结合临床对仪器的适用范围加以判断。

miR-204调控Bel-2家族在年龄相关性白内障发病过程中机制研究

目的探讨miR-204靶向调控Bcl-2家族的机制及其在年龄相关性白内障发病过程中的作用。方法临床实验研究。于2014年10～12月在中国医科大学附属第四医院眼科，收集年龄相关性白内障患者晶状体前囊膜标本36例为实验组，选取新鲜人眼透明晶状体前囊膜标本12例为对照组。利用生物信息学软件，预测miR-204可能调控的Bel-2家族关键基因；应用Realtimeq-PCR方法，检测年龄相关性白内障患者晶状体前囊膜和正常人眼晶状体前囊膜间miR-204及其预测靶基因的表达；利用Lipofectamine 2000瞬时转染miR-204 mimic和inhibitor，分别上调和下调人晶状体上皮细胞中miR-204的表达，利用Realtimeq-PCR方法验证转染效率，并检测预测靶基因的表达变化。结果3种不同的生物信息学软件预测到Bcl-2家族中bcl-2、mcl-1可能为miR-204的靶基因。与对照组相比，年龄相关性白内障患者晶状体前囊膜组，miR-204的表达显著升高，bcl-2、mcl-1的表达显著降低。miR-204mimic转染组，miR-204的表达显著升高，bcl-2、mcl-1的表达显著降低；miR-204 inhibitor转染组，miR-204的表达显著降低，bcl-2、mcl-1的表达显著升高。差异均有统计学意义（P〈0．01）。结论miR-204在年龄相关性白内障晶状体组织中呈高表达，miR-204可能通过靶向调控Bcl-2家族成员bcl-2、mcl-1的表达，在年龄相关性白内障发病过程中发挥重要角色，miR-204可能成为白内障非手术治疗的新靶点。