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TNF—α通过PKCα信号通路诱导人系膜细胞IP3R1表达
1
作者
王育蓉
章欢
+1 位作者
孙辉
刘沛
《中华急诊医学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2013年第2期153-157,共5页
目的探讨肿瘤坏死因子(TNF—α)对人。肾小球系膜细胞(HMCs)I型1,4,5-三磷酸肌醇受体(IP,R1)蛋白和mRNA表达的影响及其分子机制,以期为肝肾综合征(HRS)肾小球滤过率下降的发生机制和防治思路提供理论依据。方法用实时定量PC...
目的探讨肿瘤坏死因子(TNF—α)对人。肾小球系膜细胞(HMCs)I型1,4,5-三磷酸肌醇受体(IP,R1)蛋白和mRNA表达的影响及其分子机制,以期为肝肾综合征(HRS)肾小球滤过率下降的发生机制和防治思路提供理论依据。方法用实时定量PCR和免疫印迹法检测TNF-α刺激HMCs0、2、4、8、24h的IP3R1mRNA和蛋白表达的情况。以TNF-α刺激HMCs8h为对照,应用D609,U73122,PP1,Safingol和Rottlerin预处理HMCs后,实时定量PCR法检测JJTNF-α对IP3R1mRNA表达的影响;以TNF-α刺激HMCs24h组为对照,免疫印迹法检测上述抑制剂预处理后,TNF-α对IP3R1蛋白表达的影响。此外,应用非放射性测活法检测0、4、8、24hTNF-α对PKC-α的活化影响,并予D609、Safingo干预后,检测TNF-α对PKC-α的活化的影响。结果TNF-α刺激HMCs2h到8hIP3R1mRNA表达明显增加,于8h达高峰(P〈0.01),而于24h有所下降(P〈0.01);而IP3R1蛋白表达于TNF-α刺激4h开始升高,至24hIP3R1蛋白升高达高峰(P〈0.01)。与8h组比较,抑制剂+TNF-α各组中,Safingol+TNF-α组和D609+TNF-α组IP3R1mRNA的表达明显下降,差异具有统计学意义(3.30±0.81)vs.(1.95±0.13),P〈0.05;(2.10±0.49),P〈0.01。与24h相比,Safingol+TNF-α组和D609+TNF-α组,IP3R1蛋白的表达亦明显下降(3.09±0.13)vs.(1.86+0.39),P〈0.01;(1.98±0.02),P〈0.01。非放射性测活检测显示TNF-α处理8h使PKC—α自动磷酸化而活化,而D609或Safingol预处理后,可抑制TNF-α对PKC-α的活化。结论TNF-α能上调IP3R1mRNA及蛋白的表达,PC-PLC/PKC—α信号途径可能在TNF-α上调1只R1的表达中起重要作用。
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关键词
肿瘤坏死因子-α
肝肾综合征
人肾小球系膜细胞
I型1
4
5-三磷酸肌醇受体
蛋白
激酶C-α
磷脂酰胆碱特异性磷脂酶C
原文传递
PKCα在人系膜细胞IP_3Rl蛋白表达中的调控作用
2
作者
王育蓉
章欢
+1 位作者
孙辉
刘沛
《临床消化病杂志》
2013年第2期93-97,共5页
目的探讨肿瘤坏死因子α(TNFα)对人肾小球系膜细胞(HMCs)IP3R1蛋白和mRNA表达的影响及PKC在此信号通路中的作用,以期为肝肾综合征(HRS)肾小球滤过虑下降的发生机制和防治思路提供理论依据。方法用实时定量PCR和免疫印记法检测IP3Rl mRN...
目的探讨肿瘤坏死因子α(TNFα)对人肾小球系膜细胞(HMCs)IP3R1蛋白和mRNA表达的影响及PKC在此信号通路中的作用,以期为肝肾综合征(HRS)肾小球滤过虑下降的发生机制和防治思路提供理论依据。方法用实时定量PCR和免疫印记法检测IP3Rl mRNA和蛋白表达的情况,并分别用PMA耗竭内源性蛋白激酶C(PKC),PKCα特异性抑制剂Safingol和PKCδ特异性抑制剂Rottlerin及HA-DN-PKCα质粒转染干预上述诱导实验。同时,用免疫印记法检测TNFα对PKCα和p-PKCα表达的影响。用非放射性测活检测TNFα对PKCα的活化及抑制剂对PKCα活化的影响。结果 TNFα作用HMCs后,IP3R1蛋白和mRNA表达均明显增加。PMA,PKCα抑制剂Safin-gol,HA-DN-PKCα质粒转染均能明显阻断TNFα诱导的IP3R1蛋白的上调,而PKCδ抑制剂Rottlerin无明显阻断作用。TNFα刺激HMCs,各不同时间组总PKCα蛋白表达无明显差异,而TNFα刺激8h p-PKCα蛋白表达明显增加。此外,非放射性测活表明TNFα活化PKCα,Safingol可阻断PKCα的活化。结论 TNFα能上调HMCs中IP3R1蛋白及IP3RlmRNA的表达。活化的PKCα在TNFα上调IP3Rl的表达中起重要作用。
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关键词
肝肾综合征
肿瘤坏死因子Α
Ⅰ型1
4
5-三磷酸肌醇受体
蛋白激酶C
原文传递
题名
TNF—α通过PKCα信号通路诱导人系膜细胞IP3R1表达
1
作者
王育蓉
章欢
孙辉
刘沛
机构
九江市第一人民医
院
消化内
科
中国医科大学附属院一院传染科
出处
《中华急诊医学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2013年第2期153-157,共5页
基金
江西省卫生厅科研基金资助项目(20123192)
文摘
目的探讨肿瘤坏死因子(TNF—α)对人。肾小球系膜细胞(HMCs)I型1,4,5-三磷酸肌醇受体(IP,R1)蛋白和mRNA表达的影响及其分子机制,以期为肝肾综合征(HRS)肾小球滤过率下降的发生机制和防治思路提供理论依据。方法用实时定量PCR和免疫印迹法检测TNF-α刺激HMCs0、2、4、8、24h的IP3R1mRNA和蛋白表达的情况。以TNF-α刺激HMCs8h为对照,应用D609,U73122,PP1,Safingol和Rottlerin预处理HMCs后,实时定量PCR法检测JJTNF-α对IP3R1mRNA表达的影响;以TNF-α刺激HMCs24h组为对照,免疫印迹法检测上述抑制剂预处理后,TNF-α对IP3R1蛋白表达的影响。此外,应用非放射性测活法检测0、4、8、24hTNF-α对PKC-α的活化影响,并予D609、Safingo干预后,检测TNF-α对PKC-α的活化的影响。结果TNF-α刺激HMCs2h到8hIP3R1mRNA表达明显增加,于8h达高峰(P〈0.01),而于24h有所下降(P〈0.01);而IP3R1蛋白表达于TNF-α刺激4h开始升高,至24hIP3R1蛋白升高达高峰(P〈0.01)。与8h组比较,抑制剂+TNF-α各组中,Safingol+TNF-α组和D609+TNF-α组IP3R1mRNA的表达明显下降,差异具有统计学意义(3.30±0.81)vs.(1.95±0.13),P〈0.05;(2.10±0.49),P〈0.01。与24h相比,Safingol+TNF-α组和D609+TNF-α组,IP3R1蛋白的表达亦明显下降(3.09±0.13)vs.(1.86+0.39),P〈0.01;(1.98±0.02),P〈0.01。非放射性测活检测显示TNF-α处理8h使PKC—α自动磷酸化而活化,而D609或Safingol预处理后,可抑制TNF-α对PKC-α的活化。结论TNF-α能上调IP3R1mRNA及蛋白的表达,PC-PLC/PKC—α信号途径可能在TNF-α上调1只R1的表达中起重要作用。
关键词
肿瘤坏死因子-α
肝肾综合征
人肾小球系膜细胞
I型1
4
5-三磷酸肌醇受体
蛋白
激酶C-α
磷脂酰胆碱特异性磷脂酶C
Keywords
TNF-α
Hepatorenal syndrome
HMCs
IP3R1
PKC-α
PC-PLC
分类号
R285.5 [医药卫生—中药学]
原文传递
题名
PKCα在人系膜细胞IP_3Rl蛋白表达中的调控作用
2
作者
王育蓉
章欢
孙辉
刘沛
机构
江西省九江市第一人民医
院
消化内
科
中国医科大学附属院一院传染科
出处
《临床消化病杂志》
2013年第2期93-97,共5页
基金
江西省卫生厅科研基金资助项目(20123192)
文摘
目的探讨肿瘤坏死因子α(TNFα)对人肾小球系膜细胞(HMCs)IP3R1蛋白和mRNA表达的影响及PKC在此信号通路中的作用,以期为肝肾综合征(HRS)肾小球滤过虑下降的发生机制和防治思路提供理论依据。方法用实时定量PCR和免疫印记法检测IP3Rl mRNA和蛋白表达的情况,并分别用PMA耗竭内源性蛋白激酶C(PKC),PKCα特异性抑制剂Safingol和PKCδ特异性抑制剂Rottlerin及HA-DN-PKCα质粒转染干预上述诱导实验。同时,用免疫印记法检测TNFα对PKCα和p-PKCα表达的影响。用非放射性测活检测TNFα对PKCα的活化及抑制剂对PKCα活化的影响。结果 TNFα作用HMCs后,IP3R1蛋白和mRNA表达均明显增加。PMA,PKCα抑制剂Safin-gol,HA-DN-PKCα质粒转染均能明显阻断TNFα诱导的IP3R1蛋白的上调,而PKCδ抑制剂Rottlerin无明显阻断作用。TNFα刺激HMCs,各不同时间组总PKCα蛋白表达无明显差异,而TNFα刺激8h p-PKCα蛋白表达明显增加。此外,非放射性测活表明TNFα活化PKCα,Safingol可阻断PKCα的活化。结论 TNFα能上调HMCs中IP3R1蛋白及IP3RlmRNA的表达。活化的PKCα在TNFα上调IP3Rl的表达中起重要作用。
关键词
肝肾综合征
肿瘤坏死因子Α
Ⅰ型1
4
5-三磷酸肌醇受体
蛋白激酶C
Keywords
HRS
TNFα
IP3R1
PKCα
TNFR
分类号
R363 [医药卫生—病理学]
原文传递
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
TNF—α通过PKCα信号通路诱导人系膜细胞IP3R1表达
王育蓉
章欢
孙辉
刘沛
《中华急诊医学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2013
0
原文传递
2
PKCα在人系膜细胞IP_3Rl蛋白表达中的调控作用
王育蓉
章欢
孙辉
刘沛
《临床消化病杂志》
2013
0
原文传递
已选择
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