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人bFGF基因克隆表达及表达产物的纯化和生物学活性分析
被引量:
2
1
作者
王莉馨
李永勇
+3 位作者
张娅捷
范洪学
张金三
林剑
《白求恩医科大学学报》
CAS
CSCD
1999年第1期11-13,共3页
目的:通过融合蛋白表达方式将编码人碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)cDNA在大肠杆菌DH5α中的表达,为bFGF进一步研究提供材料来源。方法:用多聚酶链反应(PCR)及DNA重组技术将PCR产物克隆到pGEM-5Z...
目的:通过融合蛋白表达方式将编码人碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)cDNA在大肠杆菌DH5α中的表达,为bFGF进一步研究提供材料来源。方法:用多聚酶链反应(PCR)及DNA重组技术将PCR产物克隆到pGEM-5Z载体并测序,然后克隆到表达载体pXH上。结果:转化重组质粒pLX1的大肠杆菌经42℃温控诱导45h,SDS-PAGE分析显示融合蛋白的分子量约35000,薄层扫描分析表明该蛋白占菌体总蛋白量的99%。经FactorXa酶切后得到分子量约为17000的bFGF,其生物学活性ED50为229ng/ml。结论:经PCR方法扩增的bFGF可在大肠杆菌中高效表达。
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关键词
BFGF
基因克隆
纯化
高效表达
下载PDF
职称材料
题名
人bFGF基因克隆表达及表达产物的纯化和生物学活性分析
被引量:
2
1
作者
王莉馨
李永勇
张娅捷
范洪学
张金三
林剑
机构
白求恩医大预防
医学
院毒理教研室
白求恩医大一院检验科
中国医科院医学分子生物学国家重点实验室
暨南大学
生物
工程研究所
出处
《白求恩医科大学学报》
CAS
CSCD
1999年第1期11-13,共3页
文摘
目的:通过融合蛋白表达方式将编码人碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)cDNA在大肠杆菌DH5α中的表达,为bFGF进一步研究提供材料来源。方法:用多聚酶链反应(PCR)及DNA重组技术将PCR产物克隆到pGEM-5Z载体并测序,然后克隆到表达载体pXH上。结果:转化重组质粒pLX1的大肠杆菌经42℃温控诱导45h,SDS-PAGE分析显示融合蛋白的分子量约35000,薄层扫描分析表明该蛋白占菌体总蛋白量的99%。经FactorXa酶切后得到分子量约为17000的bFGF,其生物学活性ED50为229ng/ml。结论:经PCR方法扩增的bFGF可在大肠杆菌中高效表达。
关键词
BFGF
基因克隆
纯化
高效表达
Keywords
human basic fibroblast growth factor
efficient expression
purification
分类号
R392.2 [医药卫生—免疫学]
下载PDF
职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
人bFGF基因克隆表达及表达产物的纯化和生物学活性分析
王莉馨
李永勇
张娅捷
范洪学
张金三
林剑
《白求恩医科大学学报》
CAS
CSCD
1999
2
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职称材料
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参考文献
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