安丝菌素P-3的发酵工艺

考察了珍贵橙色束丝放线菌SIPI-3-21生产安丝菌素P-3(AP-3)的发酵工艺。首先优化了摇瓶发酵培养基配方,在含葡萄糖20.0 g/L、玉米淀粉30.0 g/L、棉籽饼粉30.0 g/L、CaCl2 10.0 g/L和CaCO3 5.0 g/L的发酵培养基中发酵培养9 d,AP-3产量为123.2 mg/L。进一步在摇瓶中考察了前体异丁醇对AP-3合成的影响,结果表明,添加异丁醇可以显著提高AP-3的产量。当其添加浓度为54 mmol/L时,AP-3的产量为307.8 mg/L,同时发酵液中AP-3的含量从57.2%提高到86.5%。

EchinocandinB微生物转化工艺优化

犹他游动放线菌产生的酰基水解酶可以将echinocandin B(ECB)水解脱去酰基侧链得到ECB母核,用于化学合成抗真菌药阿尼芬净。本研究考察并优化了犹他游动放线菌产酶的发酵培养基组分和ECB转化反应体系的有机溶剂、底物浓度,建立了ECB的微生物转化工艺。结果表明,在含麦芽糖30 g/L和麦芽浸粉20 g/L的发酵培养基中,犹他游动放线菌发酵培养72 h后,加入终浓度为2.55 g/L的ECB和7.5%甲醇,转化18 h,ECB的转化率为97.8%。进一步在5 L发酵罐中进行发酵培养和微生物转化,结果表明该微生物转化工艺可用于制备ECB母核。

非达霉素的菌种选育及发酵工艺优化

对产非达霉素的出发菌株桔橙指孢囊菌(Dactylosporangium aurantiacum)-18进行紫外(UV)和亚硝基胍(NTG)诱变,并通过链霉素抗性模型筛选,获得突变菌株D.aurantiacum N-61,非达霉素摇瓶发酵产量为1 141 mg/L。进一步优化该菌株在5 L发酵罐上的培养工艺,通过调整发酵培养基处方(g/L),在乳糖75.0、甘油20.0、棉籽饼粉10.0、酵母粉10.0、CaCO_3 4.0和MgSO_4·7H_2O 2.0的条件下,非达霉素产量达到3 343 mg/L。

珍贵橙色束丝放线菌生产安丝菌素P-3的发酵工艺

将安丝菌素P-3(1)产生菌珍贵橙色束丝放线菌(Actinosynnema pretiosum)的紫外诱变高产菌株A.pretiosum SIPI-U-7 6,通过5 L发酵罐进行小试工艺研究,表明搅拌剪切力对1产量有明显的影响。采用降低搅拌转速、减少种子培养时间和调整发酵配方的方法,在5 L发酵罐上1的发酵单位可优化达到378 mg/L。将优化后的小试工艺放大至500 L和1 000 L罐上,发酵单位分别达到288和317 mg/L,较未优化的5 L发酵罐上的1发酵单位(23 mg/L)提高了11.5倍和12.8倍,实现了1的规模化生产。

糖肽类抗生素A40926B产生菌的培养基优化及菌种选育

以A40926 B产生菌野野村放线菌SIPI-D-30为出发菌株,通过UV诱变及乙酸钠和甘氨酸抗性平板筛选,获得A40926 B产量提高的突变株SIPI-U-157。经优化,确定摇瓶发酵培养基(g/L)为:葡萄糖5.0、麦芽糊精30.0、可溶性淀粉10.0、玉米淀粉30.0、大豆蛋白胨5.0、肉蛋白胨10.0、酵母浸粉5.0、冷榨黄豆饼粉10.0、棉籽饼粉5.0、L-缬氨酸1.0,发酵培养7 d,突变株的A40926 B发酵单位为893 mg/L。该突变株在5 L发酵罐中培养180 h,A40926 B的产量最高为583 mg/L。