带棒链霉菌中头霉素C生物合成及调控机制的研究进展

本文介绍了近年来国内外在带棒链霉菌头霉素C生物合成和调控方面的研究进展,为我们使用遗传育种手段提高头霉素C产量提供了理论依据。

鼠麴草化学成分及药理活性研究进展

鼠麴草Gnaphalium affine D.Don系菊科鼠麴草属植物,其主要化学成分有黄酮类、三萜类、植物甾醇和咖啡酸衍生物等。现代药理学研究结果表明鼠麴草有显著的抗组胺、抗细菌和真菌、抗氧化、抗心衰、平喘、抗黄嘌呤氧化酶、抗补体和保肝等活性。本文总结了鼠麴草的化学成分和药理作用,为其开发和利用提供参考。

溶瘤病毒在肿瘤治疗中的研究进展

溶瘤病毒能特异性感染和裂解肿瘤细胞,且对正常细胞无损伤。其溶瘤特性和肿瘤靶向性在肿瘤治疗中的潜力值得关注。本文综述新城疫病毒、单纯疱疹病毒-1和溶瘤腺病毒治疗肿瘤的最新进展。

头孢菌素C酰化酶突变位点的研究

头孢菌素C酰化酶能直接将头孢菌素C(CPC)转化为7-氨基头孢烷酸(7-ACA),此一步酶法具有很大的经济价值,所以得到很多研究者的关注,特别是提高CPC酰化酶活性及专一性的研究。以CPC酰化酶基因ecs50为基础,利用重叠延伸PCR,对文献报道的活性提高的突变体酶S12的6个位点分别进行突变,将得到的6个突变体V122A、G140S、F297N、I314T、I415V、S710L进行诱导纯化后,检测酶活,以此来研究不同突变位点对酶活力的影响。结果 V122A的比活为106U/mg,它的转化效率比初始酶提高23.7%。

毕赤酵母高效表达外源蛋白的相关策略及研究进展

蛋白类药物和工业酶的异源表达在各类生物制药产业和工业应用中具有重要意义。巴斯德毕赤酵母(Pichia pastoris)作为最为成功的真核蛋白表达系统之一,近20年来经历飞速发展并受到广泛关注,产生了巨大的经济和社会价值。但另一方面,由于该系统受到包括外源基因本身特性、菌种特性、表达环境以及发酵工艺等在内的诸多因素的影响,其对于不同外源蛋白的表达情况也表现出较大差异。为解决这一难题,研究人员尝试使用了各种策略,如密码子优化、高拷贝菌株筛选、引导肽筛选、敲除蛋白酶基因和甘油运转体基因、共表达促折叠因子和透明颤菌血红蛋白,以及诱导条件、辅助表达物添加和发酵工艺的优化。本文对提高此系统外源蛋白表达量的相关策略及产业化研究进展进行了综述,并简要展望此系统的产业化发展前景。

基于血清药物化学研究香青兰抗心肌缺血活性部位的活性成分

建立了高效液相色谱法对香青兰抗心肌缺血活性部位进行化学成分指认,共指认了29个化合物。对该活性部位进行初步血清药物化学研究,在给药组血清中共发现20个成分峰,其中12个为代谢产物,8个为原型成分。主要入血原型成分为(+)methyl rabdosiin(1)、(+)rabdosiin(2)、迷迭香酸(5)、田蓟苷(13)、木犀草素-7-O-β-D-葡萄糖醛酸苷(18)、芹菜素-7-O-β-D-葡萄糖醛酸苷(19)、香叶木素-7-O-β-D-葡萄糖醛酸苷(20)和金合欢素-7-O-β-D-葡萄糖醛酸苷(21)。进一步对入血原型成分进行药效研究,发现黄酮类化合物13、18和19体外给予30μg/ml,对二磷酸腺苷(ADP)诱导的大鼠血小板聚集有抑制作用,聚集抑制率分别为8.11%、9.32%和3.27%;酚酸类化合物1、2和5在浓度为12.5μg/ml时,对H_2O_2诱导原代心肌细胞氧化损伤有保护作用,细胞存活率分别为82.79%、84.60%和88.48%。研究表明黄酮类和酚酸类化合物是香青兰抗心肌缺血活性部位中的活性成分。

德谷胰岛素与甘精胰岛素的研究进展

在过去40年中,糖尿病治疗药物有很大发展。重组人胰岛素类似物成为糖尿病治疗的主流药物,其中甘精胰岛素及德谷胰岛素为两种长效重组人胰岛素类似物,可模拟人体胰岛素的基础分泌,药效可持续24 h,但也有诸多不同之处。本文对甘精胰岛素与德谷胰岛素的结构机制及临床研究进行综述。

基于血清药物化学研究两色金鸡菊活性部位的降血脂活性成分

以小鼠高血脂症为模型,筛选两色金鸡菊提取物,得到能显著降低血清中甘油三酯(TG)和低密度脂蛋白(LDL-C)浓度的活性部位。对该活性部位进行血清药物化学研究,通过分析比较活性部位和含药血清样品,检测到含药血清中有12个入血成分,其中6个为代谢产物,6个为原型成分。主要入血原型成分为异奥卡宁-7-O-β-D-吡喃葡萄糖苷(1)、(Z)-6,7,3',4'-四羟基橙酮-6-O-β-D-吡喃葡萄糖苷(3)和马里苷(4)。经金黄地鼠高血脂模型筛选,结果显示1能显著降低动物血清中的TG、总胆固醇(CHOL)和LDL-C含量,4能显著提升高密度脂蛋白(HDL-C)水平。研究表明二氢黄酮类和查尔酮类化合物是两色金鸡菊中的降血脂活性成分。

人胰高血糖素样肽-1受体激动剂索马鲁肽的研究进展

索马鲁肽是一种长效的人胰高血糖素样肽-1(GLP-1)受体激动剂,用于辅助饮食控制和运动以改善2型糖尿病患者的血糖。该药有皮下注射和口服两种剂型,皮下注射剂型目前已获美国食品药品管理局批准,口服剂型尚处于临床Ⅲ期开发阶段。本文通过文献检索,综述索马鲁肽作用机制、药理学、药动学和临床研究进展。

丝状真菌蛋白质组学研究进展

丝状真菌不仅是致病菌,而且在异源表达工业酶、化学制品以及药物活性物质中发挥着越来越重要的作用。随着人类基因组计划的实施和推进,生命科学研究已进入了功能基因组时代,特别是蛋白质组学,在蛋白质水平对丝状真菌细胞生命过程中蛋白质功能和蛋白质之间的相互作用以及特殊条件下的变化机制进行研究,对生命的复杂活动进行深入而又全面的认识也为丝状真菌工业酶制剂和重组药物的开发提供广阔的创新空间。本文综述了蛋白质组学的研究内容和方法,总结了其在丝状真菌致病菌、抗生素产生菌和纤维素酶产生菌中的应用现状。不同层次的功能基因组学分析可以从各个角度掌握生物体的代谢网络和调控机制,本文还对蛋白质组学以及功能基因组学各部分内容的整合运用进行了展望。

鸡矢藤提取物对尿酸钠诱导的大鼠急性痛风性关节炎的影响

为探讨鸡矢藤提取物是否具有良好的治疗痛风性关节炎的效果,将SD大鼠分为模型(0.9%氯化钠溶液)组、鸡矢藤提取物低、中、高剂量(50、100、200 mg/kg)组和秋水仙碱(0.2 mg/kg)组,给予微晶型尿酸钠混悬液造模,测定关节肿胀度、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)和白介素-1β(IL-1β)的含量,观察关节组织的病理学变化。结果显示与模型组相比,不同剂量的鸡矢藤提取物均可降低大鼠尿酸钠晶体导致的关节肿胀,并呈现一定的时间和剂量依赖性,且高剂量组的抑制关节肿胀效果与阳性对照相似;鸡矢藤提取物能降低TNF-α和IL-1β的表达水平,对关节病理损伤也有一定的改善作用。以上结果提示鸡矢藤提取物对尿酸钠晶体诱导的大鼠急性痛风性关节炎具有一定的防治作用。

顶头孢霉中过表达AcveA提高头孢菌素C产量

与构巢曲霉veA基因同源的AcveA是近年来在顶头孢霉Acremonium chrysogenum中发现的一个全局性调控子,主要调控头孢菌素C(CPC)生物合成基因的转录水平。本研究通过从顶头孢霉高产菌基因组DNA中扩增AcveA序列构建了一个AcveA表达载体pYG280,将其导入顶头孢霉高产菌株中,荧光实时定量PCR检测阳性转化子中AcveA的相对转录水平,结果比出发菌株提高了165%。同时检测到AcveA基因导入后的转化子中CPC合成限速步骤中的早期基因pcbC、晚期基因cefEF以及cefG基因的mRNA转录水平分别较出发菌株提高了825%、353%和25%。HPLC分析结果显示,转化子CPC的发酵水平较出发菌株提高了22.7%。证明AcveA是CPC生物合成中的一个正向调控子。

CRISPR/Cas9技术及其在药物研发中的应用

CRISPR/Cas是新近在细菌及古细菌中发现的一种可以降解外源核酸的获得性免疫调节系统,它由成簇规律间隔的短回文重复序列(Clustered regularly interspaced short palindromic repeats,CRISPR)和蛋白质Cas组成,其中Ⅱ型CRISPR/Cas9系统成分最简单,包括:cr RNA(CRISPR RNA)、tracr RNA(trans-activating cr RNA)、Cas9(CRISPR-associated protein),tracr RNA通过RNaseⅢ功能促进cr RNA的成熟,由cr RNA通过碱基配对识别并向导Cas9结合靶标DNA,最后Cas9蛋白通过自身内切核酸酶的活性剪切DNA,达到定点编辑DNA的作用。该技术已被广泛应用于多项科研领域,仿效CRISPR/Cas9作用机理,人工构建融合了tracr RNA和cr RNA序列的一种特殊小向导RNA(small guide RNA,sg RNA)与Cas9的复合体,即能实现定点编辑基因的效果,且操作简捷、高效。文章综述了CRISPR/Cas9技术在药物研发中的应用,如细胞株改造、基因修复、动物模型构建、药物靶点筛选、遗传疾病治疗等。

头孢菌素C酰化酶的固定化

本研究采用传统的包埋法、吸附法和共价结合法固定化头孢菌素C酰化酶,以表观酶活力回收率为指标,结果显示共价结合法的固定效果较好,其中ES-1载体固定化酶的表观酶活力回收率约30.9%。优化ES-1载体固定化条件,当酶的载量为150 u/g,磷酸钾缓冲液浓度1.0 mol/L,p H 9.5,25℃轻微振荡12 h,固定化效果较好,表观酶活力为60.73 u/g,表观酶活力回收率约40.5%。