隐丹参酮滴丸制备及其体内药动学研究

目的制备隐丹参酮滴丸,并考察其体内药动学。方法熔融法制备滴丸。以PEG 4000与PEG 6000比例、基质与药物比例、冷凝温度、滴速、滴距为影响因素,成型率、质量差异为评价指标,单因素试验优化处方工艺。X射线粉末衍射进行晶型分析,在扫描电镜下观察微观形态,测定溶解度、体外释药、稳定性。18只家兔随机分为3组,分别灌胃给予隐丹参酮、物理混合物、滴丸的0.5%CMC-Na混悬液(40 mg/kg),于不同时间点采血,HPLC法测定隐丹参酮血药浓度,计算主要药动学参数。结果最优处方工艺为PEG 4000与PEG 6000比例1∶1,基质与药物比例7∶1,滴速35滴/min,冷凝温度12℃,滴距7 cm,成型率为(94.86±1.18)%,质量差异为(8.89±0.72)%。隐丹参酮在滴丸中以无定形状态存在,溶解度提高至40.55倍,45 min内累积溶出度达94.74%。滴丸在6个月内外观、水分、最大质量差异、溶散时限符合2020年版《中国药典》要求。与原料药、物理混合物比较,滴丸t max缩短(P<0.05),C_(max)、AUC_(0~t)、AUC_(0~∞)升高(P<0.01),相对生物利用度与原料药相比增加至2.70倍。结论滴丸可促进隐丹参酮体外溶出、体内吸收。

多拉菌素有机杂质的纯化与结构鉴定

目的分离与鉴定多拉菌素中有机杂质,对改进生产工艺,提高产品质量具有重要意义。方法采用制备液相色谱技术,对多拉菌素中有机杂质进行分离制备,并通过质谱和核磁共振技术鉴定杂质结构。结果经制备液相分离得到5个主要杂质,经核磁共振光谱和质谱分析鉴别为12-乙基多拉菌素,14-去甲基多拉菌素,5-甲氧基多拉菌素,5-酮多拉菌素和25-环己基-阿维菌素B2。其中12-乙基多拉菌素未见文献报道。结论建立了多拉菌素有机杂质的制备方法,并进行了结构鉴定,为多拉菌素的质量控制提供了参考。

基于PMP柱前衍生化-HPLC法的淫羊藿多糖的单糖指纹图谱研究

建立了淫羊藿多糖酸水解的柱前衍生化单糖HPLC指纹图谱方法。淫羊藿多糖经2.0 mol/L盐酸水解,再经1-苯基-3-甲基-5-吡唑啉酮(PMP)衍生化处理后,用HPLC法测定其单糖组成。采用YMC-Pack ODS-A柱(4.6 mm×250 mm,5μm),以磷酸盐缓冲液-乙腈为流动相,流速为0.8 mL/min,检测波长为254 nm。采用2012年版《中药色谱指纹图谱相似度评价系统》,建立了40批淫羊藿样品的共有指纹图谱,确立了10个共有峰,通过与对照品比对,指认了8个共有峰,分别为D-甘露糖、D-葡萄糖醛酸、鼠李糖、半乳糖醛酸、D-无水葡萄糖、半乳糖、木糖和阿拉伯糖。通过相似度结合正交偏最小二乘法,对7批巫山淫羊藿进行分析。结果显示,相似度小于0.9,并得到4个差异性单糖成分。建立的指纹图谱方法简单、易操作,可为淫羊藿药材的质量评价提供参考。

PLK1抑制剂的设计、合成及抗肿瘤活性研究

目的设计合成一类新型PLK1抑制剂,并测试其对PLK1激酶的抑制活性,探讨初步构效关系,为后续相关研究提供参考。方法以化合物HBST145为基础,通过生物电子等排等方法,设计、合成新型PLK1抑制剂,分别采用均相时间分辨荧光法和CCK-8法测定化合物对PLK1激酶的抑制活性以及抗肿瘤细胞增殖活性。结果与结论共合成了10个新化合物,其结构均经ESI-MS和^(1)H-NMR确证。抑酶活性结果表明化合物5a~5d、5j对PLK1抑制活性的IC_(50)值分别为2.58、3.09、7.08、3.61、8.99 nmol·L^(-1),活性优于化合物HBST145。目标化合物5a~5j对HL-60和THP-1细胞的抗增殖活性均明显提高,其中化合物5d的抗细胞增殖活性较好,可作为优选化合物进行深入研究。

颈舒颗粒中三七皂苷R_(1)、人参皂苷Rg_(1)和人参皂苷Rb_(1)在脊髓型颈椎病模型大鼠中的药代动力学研究

颈舒颗粒在临床上已被证明对脊髓型颈椎病(CSM)有较好的治疗效果,其主要活性成分为三七皂苷R1(1)、人参皂苷Rg1(2)和人参皂苷Rb1(3)。该研究建立了超高效液相色谱-质谱联用(UPLC-MS)法检测CSM模型大鼠血浆中的1、2和3浓度,用于研究颈舒颗粒在大鼠体内的药代动力学特征。结果显示,大鼠灌胃给予颈舒颗粒后,1的血浆浓度较低(<8.892 ng/mL),2和3的c_(max)、AUC_(0→t)和t_(1/2)分别为(27.75±4.13)和(123.60±8.56)ng/mL、(255.41±38.59)和(1344.32±122.52)h·ng·mL^(–1),以及(11.97±3.75)和(14.54±2.71)h。该检测方法灵敏、可靠,可用于1、2和3在CSM模型大鼠体内的药代动力学研究。

吡仑帕奈关键中间体有关物质研究

目的研究吡仑帕奈关键中间体5-(2-吡啶基)-1,2-二氢吡啶-2-酮(4)有关物质的来源与合成方法,为其质量控制提供依据并为其质量研究提供有关物质的对照品。方法根据已报道的吡仑帕奈的合成工艺路线,分析关键中间体4的生产过程中可能存在的有关物质并进行定向合成;采用高效液相-紫外检测色谱法建立中间体4及其有关物质的分析方法。结果与结论发现关键中间体4生产过程中可能存在的7个有关物质(A~G),并定向合成其中5个有关物质(B、D~G),其结构均经^(1)H-NMR、^(13)C-NMR和ESI-MS谱确证,初步建立了吡仑帕奈关键中间体4及其有关物质的高效液相色谱分析方法。本研究为吡仑帕奈关键中间体4及吡仑帕奈原料药的质量控制提供一定的参考。

抗抑郁候选新药SIPI6116手性异构体的合成及大鼠体内药动学研究

目的设计合成对5-HT/NE/DA再摄取有抑制作用的抗抑郁候选化合物SIPI6116的两个手性异构体,并对SIPI6116、(+)-SIPI6116和(-)-SIPI6116在大鼠体内的药动学特征进行研究。方法以邻二氯苯(1)和3-氯丙酰氯(2)为原料,经Friedel-Crafts酰基化反应得到3-氯-1-(3,4-二氯苯基)-1-丙酮(3),3与二甲胺盐酸盐经取代反应得到1-(3,4-二氯苯基)-3-二甲氨基-1-丙酮(4),4经硼氢化钠还原得到1-(3,4-二氯苯基)-3-二甲氨基-1-丙醇(5),5经手性拆分后与对甲苯磺酰氯、吗啉采用“一锅法”制得(+)-SIPI6116和(-)-SIPI6116。采用高效液相-串联质谱(LC-MS/MS)测定大鼠血浆和脑组织中SIPI6116消旋体及其两个手性异构体的浓度,并考察其在大鼠体内的药动学特征以及在体内是否发生构型转化。结果与结论合成并考察了SIPI6116及其两个手性异构体在大鼠体内的药动学特征,结果显示(-)-SIPI6116的药动学数据更理想,且两个光学异构体在体内未发生构型转化,研究结果为(-)-SIPI6116的后续开发提供了依据。

多肽类PLK1-PBD抑制剂的研究进展

Polo样激酶1(PLK1)作为polo样激酶家族的重要成员,对细胞有丝分裂具有重要调控作用,其过度表达与多种肿瘤密切相关。PLK1-PBD结构域可在有丝分裂的不同时期定位于不同的细胞结构,发挥相应的作用,可通过调控PLK1激酶的定位,导致有丝分裂紊乱,最终促进肿瘤细胞凋亡。研发人员通过模拟与PBD结合的磷酸化底物结构,报道了一系列多肽类抑制剂,本文对该类抑制剂的最新研究进展进行综述,并对其未来发展趋势予以展望。

小分子MPS1抑制剂的研究进展

单极纺锤体1(MPS1)是一种双特异性蛋白激酶,在细胞有丝分裂过程中起着非常重要的作用,是参与着丝粒定位和纺锤体组装检查点(SAC)的主要激酶之一。癌细胞通常因细胞周期SAC功能失调而导致染色体不稳定。MPS1在多种癌细胞中过度表达,从而调控异常的染色体和中心体。因此,MPS1是一种潜在的癌症治疗新靶点。目前,部分MPS1抑制剂已被批准开展晚期非血液系统恶性肿瘤(如三阴性乳腺癌)治疗的临床试验。本文作者介绍了MPS1蛋白的生物学功能,并综述了近年来典型的小分子MPS1抑制剂的研究进展,以期为更多潜在的MPS1抑制剂的探索提供参考。

SGLT-1/2双靶点抑制剂索格列净的合成工艺研究

目的研究索格列净的合成工艺,并对其进行优化。方法以Weinreb酰胺和4-(2-氯-5-溴苄基)苯乙醚为起始原料,经过格氏反应、羰基还原、扩环、乙酰基保护、异头碳基团改造、脱保护,共6步反应得到索格列净原料药。结果与结论确定了合成的起始原料,优化后的工艺路线降低了部分原料的成本,简化了相关反应条件,避免了危险化学品的使用,改进了后处理方法。制得的索格列净纯度达99.92%,总收率为50.0%(以Weinreb酰胺计)。该路线后处理操作简便,可适用于工业化生产,具有较好的应用前景。

抗流感病毒药物玛巴洛沙韦的合成工艺研究

目的优化玛巴洛沙韦的合成工艺。方法以3-苄氧基-4-氧代-4H-吡喃-2-羧酸为原料,经酯化和肼解反应得到化合物4;以N-羟乙基邻苯二甲酰亚胺为原料,经取代和脱保护反应得到化合物7;化合物4与7经胺酯交换、关环、手性拆分、水解、缩合、脱保护和取代反应制得玛巴洛沙韦。结果通过对化合物4的制备方法进行优化,收率由77.00%提高至82.44%;化合物8的合成以2-甲基四氢呋喃为溶剂时,可减少化合物7的投料量,并使反应时间由24 h缩短至6 h;采用光延反应合成化合物13,可提高目标产物的光学纯度;目标产物玛巴洛沙韦纯度为99.59%,非对映体过量值(de)由52.70%提高至98.46%,总收率为15.70%。结论优化后的合成路线具备纯化操作简便,反应条件温和,生产成本低等优点,更利于大规模生产。

吡啶氧烷基苯基(高)哌嗪类多巴胺D_(2)/D_(3)、5-HT_(1A)受体激动剂的设计合成及活性研究

目的设计合成吡啶氧烷基苯基(高)哌嗪类多巴胺D_(2)/D_(3)、5-HT_(1A)三重受体激动剂。方法以取代苯基哌嗪为原料,经氯烷基化、缩合反应得到吡啶氧烷基苯基哌嗪类化合物;以2-氰基-5-羟基吡啶为原料,经羟烷基化、酯化、缩合反应得到吡啶氧烷基苯基高哌嗪化合物;对目标化合物进行体外受体功能实验和肝微粒体稳定性实验,以考察其体外活性及初步代谢稳定性。结果与结论共合成15个未见文献报道的新化合物,其结构经MS、1H-NMR确证;体外受体功能实验结果表明,化合物1、6、7、8、10具有三重受体激动活性,其中化合物10对多巴胺D_(2)/D_(3)及5-HT受体均具有高激动活性;体外大鼠和人肝微粒体实验结果表明,化合物10代谢稳定性较好;化合物10具有作为新型多靶点抗帕金森病活性分子进行深入研究的价值。

溶出条件对富马酸贝达喹啉片溶出行为的影响

建立了具有良好区分力的富马酸贝达喹啉(1)片体外溶出方法。通过考察1在不同pH介质中的平衡溶解度,证实了1的溶解度在生理pH范围内呈现pH依赖性。在此基础上,以溶出曲线差异因子(f1)为评价指标,片剂的崩解性能为辅助指标,通过测定采用不同粒径1原料药制备的自研制剂在各溶出介质中的溶出曲线,筛选出最具区分力的溶出方法,即采用篮法,以pH 1.0盐酸为溶出介质,转速为100 r/min,介质体积为900 mL。建立并优化的溶出方法可有效区分不同质量属性的自研制剂,为该类仿制药的开发提供了有效参考。

盐酸罂粟碱降解有关物质的合成

在考察盐酸罂粟碱原料药稳定性的过程中,经强制降解试验发现了6种有关物质,其中有关物质1~4未被各药典收录。以相应的去甲基胺或酸为起始原料,经缩合、环合、还原、脱氢4步反应,分别可得罂粟碱中4个甲氧基分别脱去1个甲基的产物:1-(3,4-二甲氧基苄基)-6-羟基-7-甲氧基异喹啉(有关物质1)、1-(3,4-二甲氧基苄基)-6-甲氧基-7-羟基异喹啉(有关物质2)、1-(3-羟基-4-甲氧基苄基)-6,7-二甲氧基异喹啉(有关物质3)、1-(3-甲氧基-4-羟基苄基)-6,7-二甲氧基异喹啉(有关物质4)。另外合成了《欧洲药典》收录的(6,7-二甲氧基异喹啉-1-基)-(3,4-二甲氧基苯基)甲酮(IMP-D)和(6,7-二甲氧基异喹啉-1-基)-(3,4-二甲氧基苯基)甲醇(IMP-B)。这6个化合物均经^(1)H NMR、^(13)C NMR和HRMS确证结构。

盐酸纳曲酮有关物质的合成

为了有效控制盐酸纳曲酮的质量,该研究合成了7个有关物质:17-(1-丁烯基)-4,5-环氧-3,14-二羟基吗啡烷-6-酮(有关物质C)、双纳曲酮(有关物质D)、3-环丙甲氧基-17-(环丙甲基)-4,5-环氧-14-羟基吗啡烷-6-酮(有关物质E)、17-正丁基-4,5-环氧-3,14-二羟基吗啡烷-6-酮(有关物质H)、17-(环丙甲基)-3-甲氧基-4,5-环氧-14-羟基吗啡烷-6-酮(有关物质J)、17-(环丙甲基)-4,5-环氧-3,14-二羟基吗啡-7-烯-6-酮(有关物质K)、纳曲酮氮氧化物(有关物质L)。其中,有关物质K、L未收录进《欧洲药典》10.0中,有关物质C、D、H的合成路线未见文献报道。上述有关物质结构均经MS、1H NMR、13C NMR确证。

连续流微反应器在盐酸伊伐布雷定关键中间体合成中的应用

盐酸伊伐布雷定是首个窦房结I_(f)电流选择特异性抑制剂,临床主要用于稳定型心绞痛的治疗。l-甲胺基-4,5-二甲氧基-苯并环丁烷(3)是盐酸伊伐布雷定合成路线中的关键中间体,由1-氰基-4,5-二甲氧基苯并环丁烷(2)还原得到,反应在传统高压氢化釜中进行。采用连续流微反应器替代氢化釜,在氨-甲醇溶液中进行,优化后的条件是:雷尼镍为催化剂,化合物2浓度为0.5 mol/L,温度为41~47℃,流速为8 mL/min。化合物3的收率为99.83%,纯度99.58%,为中试放大奠定了基础。

利非斯特有关物质的合成

为优化利非斯特(1)原料药的质量控制,基于原研工艺合成了5个工艺杂质,分别是(S)-2-氨基-3-[3-(甲磺酰基)-苯基]丙酸盐酸盐(有关物质A)、5,7-二氯-1,2,3,4-四氢异喹啉-2,6-二羧酸-6-(3H-[1,2,3]噻唑并[4,5-b]吡啶-3-基)-酯-2-(叔丁基)酯(有关物质B)、(S)-2-(5,7-二氯-1,2,3,4-四氢异喹啉-6-甲酰胺基)-3-[3-(甲磺酰基)苯基]丙酸乙酯盐酸盐(有关物质C)、(S)-2-(5,7-二氯-1,2,3,4-四氢异喹啉-6-甲酰胺基)-3-[3-(甲磺酰基)苯基]丙酸盐酸盐(有关物质D)及2-(苯并呋喃-6-羰基)-5,7-二氯-1,2,3,4-四氢异喹啉-6-甲酸(有关物质E),其中有关物质B与有关物质C未见文献报道。另外,合成了对映异构体(R)-1,过程中得到7个对应的异构体中间体,可作为1原料药质量控制的杂质对照品。

作用于DA/5-HT受体亚型的反式-4-(2-(4-(吡啶-2-基)哌嗪-1-基)乙基)环己烷-1-胺衍生物的设计、合成及生物活性评价

目的设计合成反式-4-(2-(4-(吡啶-2-基)哌嗪-1-基)乙基)环己烷-1-胺衍生物,进行体外DA/5-HT受体结合实验及肝微粒体代谢稳定性实验,评价其体外抗精神分裂症活性和初步代谢特性。方法以反式-2-(4-氨基环己基)乙酸乙酯盐酸盐为起始原料,经酰胺化、硼氢化钠还原、甲磺酰化反应,再与吡啶基哌嗪片段进行烷基化反应制备目标化合物。经药效靶点(D_(2)、D_(3)、5-HT_(1A)、5-HT_(2A)受体)、副作用靶点(H_(1)受体)结合实验(单浓度抑制率)进行体外活性初筛,确定优选化合物后,再进行体外受体亲和力(K_(i)值)复测及人、大鼠肝微粒体代谢稳定性测定。结果与结论共设计合成24个新化合物,其结构经ESI-MS、^(1)H-NMR确证。体外受体结合实验结果显示,化合物1p、1v对D_(2)、D_(3)、5-HT_(1A)、5-HT_(2A)受体均具有较强的亲和力(1p:K_(i)=0.40、0.43、61.00、3.80 nmol·L^(-1);1v:K_(i)=6.70、5.80、22.00、7.60 nmol·L^(-1));对副作用靶点H_(1)受体的作用较低(10μmol·L^(-1)下抑制率分别为81.2%、83.6%)。同时,1p在肝微粒体上的代谢较稳定(human:t_(1/2)=30.40 min,CL=45.60μL·min^(-1)·mg^(-1);rat:t_(1/2)=51.40 min,CL=27.00μL·min^(-1)·mg^(-1)),具有作为新型多靶点抗精神分裂症活性分子进一步研究的价值。

卡培他滨有关物质的制备

目的加强对抗肿瘤药物卡培他滨原料药的质量控制,进行强制降解试验,研究产生的降解产物,同时合成欧洲药典收录的7个有关物质A~G,并确证其结构。方法对卡培他滨原料药分别进行热破坏、酸降解、碱降解、氧化降解,分离降解产物,并进行结构确证和纯度测定。以1,2,3-三-O-乙酰基-5-脱氧-β-D-核糖(8)为起始原料,经Silyl-Hibert-Johnson反应得到杂质B和C;杂质C进一步水解得到杂质A,接入不同的酯基得到杂质D、E、G;杂质G经水解、碳酸酯缩合得到杂质F。结果与结论强制降解试验得到7个降解产物,合成7个药典收录杂质,共计得到12个不同类型的有关物质,结构经^(1)H-NMR、LC-MS确证,纯度均大于95%,可作为卡培他滨原料药质量控制的杂质对照品。

替格瑞洛中间体有关物质的合成及结构确证

目的 依据替格瑞洛的关键中间体(1R,2S)-2-(3,4-二氟苯基)环丙胺(1)的合成路线及结构特征,合成4个有关物质并进行来源分析。方法 以(1R,2R)-2-(3,4-二氟苯基)环丙基甲酸乙酯(4)为原料,经氢氧化钠溶液水解得到有关物质Imp-1;化合物4在Witting-Horner反应中发生酯交换得到有关物质Imp-2;以(1R,2R)-2-(3,4-二氟苯基)环丙基甲酰胺(5)为原料,经次氯酸钠氧化得到有关物质Imp-3;以化合物5为原料,在霍夫曼重排反应中的副产物为有关物质Imp-4。结果与结论通过定向合成及柱色谱分离纯化得到了4个有关物质,其结构经HR-ESI-MS、1H-NMR和C-NMR确证。