大鼠胃平滑肌细胞收缩模型及其药物研究

目的 建立胃平滑肌收缩的实验模型并且对相应治疗药物的作用进行评价。方法 采用分离大鼠胃底平滑肌,用胶原酶和胰蛋白酶进行消化培养,得到离体平滑肌细胞悬液。用Trypan blue稀释法检查,通过带刻度显微镜观察和标测细胞的形态和长度,并观察在不同的时间范围内细胞形态和长度的变化情况,计算细胞存活率和存活时间。于细胞悬液加入各种神经介质乙酰胆碱(ACh)、5-羟色胺(5-HT、组织胺(His)引起刺激反应,同时加入其相应的拮抗剂阿托品(atropine)、多潘立酮(Domp)、苯海拉明(Diph)时,观察细胞形态和长度的前后变化,从而对模型和药物的作用进行评价。结果 每只大鼠胃底均能收获1×10~6以上个细胞,细胞存活率在95％以上,细胞至少可存活2.5 h。ACh能引起胃平滑肌细胞的收缩,具有明显的量效关系,1×10^(-8)mol·L^(-1)即可产生最大收缩反应(38.0％)。atropine对乙酰胆碱的拮抗作用有明显的量效关系。5-HT对大鼠胃底平滑肌细胞具有明显的收缩作用,井有明显的量效关系。Domp能够拮抗5-HT的细胞收缩作用,并具有一定的量效关系。5-HT的量效曲线比较平坦,可能至少有2种受体参与细胞的收缩作用,它们引起细胞收缩的最大效应分别为20.7％和10.5％。His引起的平滑肌细胞收缩,在1×10^(-13)～1×10^(-10) mol·L^(-1)内有?