单核苷酸多态性分析技术及其在肿瘤研究中的应用

单核苷酸多态性 (SNP)是第 3代遗传标记 ,由于其在基因组中分布的高密度性 ,被认为在多基因疾病的诊断及治疗方面有着广阔的应用前景。

HLA-A02基因型与中国高发区肝细胞癌的密切关联

目的：探讨ＨＬＡＡ０２型及其亚型与启东肝细胞癌的相关性。方法：用ＰＣＲＳＳＰ法分析启东肝细胞癌和正常人中ＨＬＡＡ０２型及其亚型的分布。结果：１０３例经病理诊断的肝细胞癌中５７例为ＨＬＡＡ０２型，其比例达到５５％，显著高于启东正常人群ＨＬＡＡ０２型３２％（３３／１０２）的比例，Ｐ＜０．００１。同时揭示包括ＨＬＡＡ０２型在内的ＨＬＡＡ位点的等位基因多为杂合型。启东肝细胞癌ＨＬＡＡ０２型中Ａ０２０１亚型所占的比例稍高于正常人群，但没有显著差异。分析比较表明，启东肝细胞癌中ＨＬＡＡ０２型的相对集中与当地肝癌中ｐ５３基因２４９密码子突变的高频度发生并没有关联。结论：在乙肝病毒和黄曲霉毒素均为危险因子的启东地区，ＨＬＡＡ０２型与肝细胞癌密切相关。

CpG ODN的免疫活性及其在肿瘤治疗中的作用

含有未甲基化CpG基序的寡核苷酸序列(CpG ODN)能激活宿主的免疫系统,引起先天免疫应答和获得性免疫应答。CpG ODN诱导产生的细胞因子、活化的各种免疫细胞有明显的抗肿瘤作用。CpG ODN可通过多种途径发挥抗肿瘤作用,包括作为单独治疗剂、免疫佐剂或和其他免疫疗法共同治疗,也可以与放疗、化疗以及外科手术联合应用治疗肿瘤。CpG ODN的抗肿瘤活性已经在动物模型中得到证明,目前正以CpG ODN的这一特性为基础开发新型的抗肿瘤药物。有几种CpG ODN新药已经进入临床试验阶段,为肿瘤患者的治疗提供新的途径。

磁性药物靶向治疗肿瘤

近年来 ,随着生物技术、纳米技术和物理化学等多学科的飞速发展 ,磁性药物靶向治疗有了长足进步。本文对其历史。

线粒体在细胞凋亡中的作用及分子机制

本文综述了线粒体在细胞凋亡的启动和调控方面的最新进展。细胞受凋亡刺激,Bcl-2家族BH3蛋白(Bim,Bad,Bid等)和其他可能的途径将凋亡信号转入线粒体中,与Bcl-2家族凋亡诱导蛋白共同调节,诱导释放线粒体凋亡蛋白细胞色素c、caspase的二级线粒体激活蛋白Smac、凋亡诱导蛋白、内核酸酶G和Omi/HtrA2等,进而通过caspase依赖途径和非依赖途径诱导细胞凋亡。

DNA甲基化与肺癌关系研究进展

DNA异常甲基化是一种表观遗传改变,常发生在启动子区的CpG岛。某些基因甲基化与肺癌发生密切相关,且 是肺癌发生中的早期事件。可能发生在肺癌早期,可以通过去甲基化药物发生逆转。

EMP-1基因对人食管癌细胞系生长的影响

背景与目的:本室曾用正常食管粘膜上皮细胞和食管癌细胞进行微阵列分析,得到一批在正常食管粘膜上皮细胞和食管癌细胞中差异表达的基因,其中包括上皮膜蛋白-1(EMP-1)基因,EMP-1基因的mRNA水平表达差异有6倍。本文进一步研究EMP-1基因在食管癌发生发展中的作用;方法:构建人EMP-1基因的真核表达载体,并转染人食管癌细胞系,Westernblot检测转染效果,RT-PCR检测转染后EMP-1的表达情况,绘制生长曲线,流式细胞检测细胞周期的变化;结果:EMP-1基因成功转入人食管癌细胞系EC9706,EMP-1基因表达量变高,细胞生长变慢,S期减少;结论:EMP-1基因与食管癌发生有一定关系。

食管鳞癌组织中SPARC蛋白表达的临床意义

目的:探讨基质蛋白SPARC在食管鳞癌的增殖、侵润和转移中的作用。方法:应用免疫组化技术研究SPARC在食管鳞癌组织和其相邻的正常粘膜组织的表达差异,同时对蛋白表达进行定位。结果:36例食管鳞癌手术标本中30例SPARC蛋白表达阳性,正常食管上皮组织表达阴性(P<0.01)。SPARC蛋白在不同分化程度的食管鳞癌组织中的表达阳性率基本相同(P>0.05)。有淋巴结转移的食管鳞癌组织与无淋巴结转移癌组织的表达间有显著差异(P<0.05)。4例癌组织细胞核有表达,其余均为细胞浆表达。结论:SPARC和食管癌的发生与发展密切相关。食管癌出现转移时SPARC蛋白表达升高。

散发食管癌组织3,9号染色体部分位点杂合性丢失和频发的微卫星DNA不稳定

采用10对来自3,9号染色体不同位点的引物,以微卫星DNA长度多态性-PCR-银染法检测36对散发食管癌标本该位点处的杂合性丢失和微卫星DNA不稳定。结果发现在9p22～23,3p23,3p14.2,3p21.3和3q21～22等处有较高频率的杂合性丢失,提示这些位点附近有可能存在抑癌基因。同时,在某些位点发现了较高程度的微卫星序列不稳定,这说明广泛的微卫星序列不稳定不仅存在于家族性肿瘤,而且存在于散发食管癌病例中。

喉鳞癌组织中SPARC基因的差异表达

目的探讨富含半胱氨酸的酸性蛋白(SPARC)在喉鳞癌的增殖、侵润和转移中的作用及指导意义。方法用半定量逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)分析SPARC在不同的喉鳞癌组织和其相邻的正常粘膜组织的差异表达量。利用免疫组化技术研究SPARC在喉鳞癌组织和其相邻的正常粘膜组织的表达差异,同时对蛋白表达进行定位。结果RT-PCR分析SPARC在20对配对标本中的表达,在其中16对喉鳞癌组织中的表达明显高于其相应的正常粘膜组织,在4对中差异表达不明显,R=80.0%(有差异的例数/总例数)。免疫组化技术分析了30对配对喉鳞癌手术标本的石蜡切片(肿瘤组织和正常粘膜组织),其中25对SPARC蛋白在癌巢细胞中的表达高于相邻的正常粘膜组织,5例在癌巢细胞中和相邻的正常粘膜组织内表达不明显,R=83.3%。同时对SPARC蛋白在不同分化程度的喉癌组织中的表达进行分析,发现SPARC在中低分化喉癌中的表达与高分化喉癌无显著差异(P>0.05)。而在有淋巴结转移的喉癌的表达比无淋巴结转移的高(P=0.036)。细胞核和细胞浆均有表达。结论通过mRNA和蛋白水平分析得出,SPARC和喉鳞癌的发生密切相关,喉鳞癌淋巴结转移时SPARC表达升高。

辐射杂种细胞系图的原理和应用

辐射杂种细胞系作为定位基因的一种常用方法 ,本文综述了辐射杂种细胞系图的原理、发展、种类和使用过程 ,并和荧光原位杂交 (FISH)

接力简并PCR

在扩增序列未知DNA的PCR——简并PCR的基础上,设计了使用简并引物5′端简并序列扩增简并PCR中低严谨复性步骤产物的方法,即接力简并PCR.此法扩增人外周血白细胞DNA,得到0.25—2.5kb范围的连续DNA片段,同时对显微切割染色体所获得的超微量DNA亦能有效扩增.接力简并PCR能迅速、有效的扩增DNA,在基因组分析中,有较好的应用前景.

人类疾病基因克隆的两种不同策略

人类疾病基因克隆的两种不同策略李卫东，吴旻自从１９１１年色盲基因被定位在Ｘ染色体上以来，人类基因的定位经历了３个不同的发展阶段。第１阶段为１９１１年至６０年代末，主要依靠家系分析的方法。由于缺乏必要的基因标志，至１９６８年仅有６８个基因被定位在Ｘ染色...

食管鳞癌组织和细胞系中富含半胱氨酸的酸性分泌蛋白表达分析

目的研究富含半胱氨酸的酸性蛋白(SPARC)在食管鳞癌的增殖、浸润和转移中的作用及临床意义。方法用免疫印记法(WB)分析食管鳞癌组织和其相邻的正常黏膜组织及食管鳞癌不同细胞系,研究SPARC蛋白表达的趋势。结果WB分析SPARC在30份配对组织标本中的表达,其中22份食管鳞癌组织中的表达明显高于其相应的正常黏膜组织,8份中差异表达不明显[R=73·3%(有差异例数/总例数)];食管鳞癌组织中的表达与其相应正常黏膜组织分化程度方面的差异无统计学意义(P>0·05),而与淋巴结转移组的差异有统计学意义(P<0·05)。食管鳞癌不同细胞系中SPARC表达与组织分化程度无关。结论食管鳞癌组织中的SPARC表达与淋巴结转移明显相关,而其在食管鳞癌不同细胞系中的表达与组织分化程度无关。