温度对HIV-1附着和侵入细胞的影响

目的研究不同温度下,HIV1对细胞的附着和侵入的强弱。方法不同浓度(0.5～10ng)的HIV1(ⅢB株)病毒对细胞(GHOST/CXCR4、MAGI)在不同温度条件下(4、25、37、40℃)进行感染,48h孵育后,进行FACS can和MAGIAssay分析。结果在一定温度范围内(4～40℃),HIV1对细胞的附着和侵入随温度的升高而加强。4℃时病毒的附着和侵入最弱,40℃最强,且比37℃时几乎高出1倍。结论温度升高(4～40℃)使细胞膜流动性加大,HIV1易于与细胞膜融合,附着和侵入增强。

献血者发生丙型肝炎后的转归

通过对丙型肝炎病毒感染献血者追踪调查结果的分析,从血清学和病理学变化方面对献血者发生丙型肝炎后的转归作一综述。

HIV-1 CN54 Gag P55和P24蛋白的高效表达、纯化和鉴定

目的 探讨HIV 1中国株CN5 4GagP5 5和P2 4重组蛋白的高效表达并纯化 ,为研究HIV疫苗和诊断试剂创造条件。方法 分别将CN5 4GagP5 5和P2 4基因克隆至 pBV2 2 0和 pThioHisC载体 ,构建非融合表达载体 ;将重组质粒转化大肠杆菌BL2 1codonplus RIL ,对工程菌进行诱导表达。Western Blot检测目的蛋白 ,用DEAE SeparoseFF阴离子交换层析柱纯化目的蛋白 ;纯化的P5 5和P2 4抗原蛋白分别包被酶标板作ELISA检测。结果 P5 5以包涵体的形式表达 ,表达量占菌体总蛋白的 30 % ,P2 4实现了可溶性表达 ,表达量占总菌体总蛋白的4 0 % ;纯化后P5 5纯度达到 80 % ,P2 4纯度超过 90 %。Western Blot和ELISA检测均显示了良好的的灵敏度和特异性。结论 HIV 1CN5 4GagP5 5和P2 4抗原蛋白可在大肠杆菌中高效表达 ,纯化的抗原蛋白具有良好抗原性 。

几种因素对重组大肠杆菌目标蛋白表达的影响

应用基因工程技术 ,获得能表达蛋白B的重组大肠杆菌 .在摇床条件下 ,研究了几种因素———IPTG浓度、接种不同初始浓度的菌种及培养温度对目标蛋白表达的影响 .结果表明 ,IPTG浓度在常规用量 1mmol/L的基础上降低至 0 .2mmol/L时 ,目标蛋白的表达量无显著差异 ;菌种初始浓度并非越大越好 ,结合表达量 ,作者认为 ,在 1∶80时较适宜 ;培养温度为 37℃对菌株目标蛋白的表达明显好于 30℃ .

FⅧ生产工艺中S/D病毒灭活法的初步评价

ＦⅧ生产工艺中Ｓ／Ｄ病毒灭活法的初步评价６１００８１中国协和医科大学中国医学科学院输血研究所汪涛吕慎诚由于以大混合血浆为原料制备的ＦⅧ浓制剂存在传播病毒性疾病的危险性，因而卫生部明文规定：ＦⅧ的生产过程必须包括有效的病毒灭活步骤。基于ＦⅧ是一种不稳定...

凝血因子制品中Tween-80残留量测定方法的对比分析

目的探讨测定Tween80残留量的两种比色法(分别是以二氯甲烷和氯仿为有机相)之间的差异性。方法分别考察两种方法的灵敏度和线性以及PEG6000和乙醇对测定结果的干扰。结果以二氯甲烷为有机相的方法具有相对较高的灵敏度和线性。PEG6000和乙醇对两种方法均有干扰,而且PEG6000对以氯仿为有机相的方法的干扰相对更为严重。结论乙醇对两种方法具有相似的干扰。在灵敏度、线性和抗PEG6000干扰方面,以二氯甲烷为有机相的方法相对较好。

重组人Endostatin在甲醇酵母Pichia Pastoris中的分泌表达

为了获得高效表达分泌型重组人Endostatin菌株 ,利用基因工程技术 ,将目的基因连接到Pichia表达载体 pPIC9K中 ,将该重组质粒转入GS115菌株后筛选His阳性菌株 ,并用G4 18筛选高拷贝阳性克隆菌 .重组表达的Endostatin经SDS PAGE电泳 ,可在分子量 2 2kD处见到单一目标带 .经体外生物学活性检测 ,Pichia菌株表达的Endostatin能有效地抑制培养的ECV30 4细胞及P6 1细胞的生长 .