六代相传显性遗传耳聋大家系:一个可能的新基因座?

收集了一个六代遗传性耳聋大家系，进行了病史、体检、纯音听力测试的综合分析，明确了该家系疾病的特征，在此基础上应用文献报道的常染色体显性遗传耳聋相关基因座的多态性标记进行等位基因共享分析，结果表明该家系的致病基因与已报道基因座不相关，连锁分析结果进一步确定这是一个尚未报道的新的基因座。

中国汉族群体19号染色体5个STR位点的多态性

短串联重复序列（ＳＴＲ）作为人类遗传图谱的第二代遗传标记正得以广泛应用。我们用Ａｍｐ－ＦＬＰ技术对２６名无关中国汉族人１９号染色体上平均间隔２０ｃＭ的四核苷酸重复序列的多态性进行了分析：ＧＧＡＴ２Ｈ０６位点检测到６种等位片段，常见片段长度为２０５ｂｐ（频率０．４８０８），ＰＩＣ为０．６３２４；ＧＡＴＡ６６Ｂ０４（Ｄ１９Ｓ７１４）位点检测到８种等位片段，常见片段为２４２ｂｐ（０．３６５４），ＰＩＣ为０．７２６５；ＧＡＴＡ２１Ｇ０５位点检测到４种等位片段，常见片段为２３０ｂｐ（０．５１９２），ＰＩＣ为０．５８９０；ＧＡＡＡ１Ｂ０３（Ｄ１９Ｓ６０１）位点检测到７种等位片段，常见片段为２１３ｂｐ（０．２３０８），ＰＩＣ为０．７９２６；Ｍｆｄ２３８（Ｄ１９Ｓ２５４）位点检测到７种等位片段，常见片段为１８４ｂｐ（０．４４２３），ＰＩＣ为０．７８５４。５个位点分别经χ２检验，符合Ｈａｒｄｙ－Ｗｅｉｎｂｅｒｇ平衡。我们选取的１９号染色体上５个ＳＴＲ多态性位点均为四核苷酸重复，它比二核苷酸重复较易扩增。这些位点相隔２０ｃＭ左右，条带清晰，易于判读。该５个位点分析结果表明多态性信息量高。若用于连锁分析，进行疾病相关基因定位，如?

遗传性痉挛性截瘫的遗传学研究进展

遗传性痉挛性截瘫是一种遗传学上很受关注的神经性遗传疾病 ,在遗传学和临床表现上都有很强的异质性。本文综述了遗传性痉挛性截瘫的分类和遗传特点 ;按遗传特点的不同对各种类型的痉挛性截瘫及其相关基因的研究进展进行了全面总结 ;

GM2神经节苷脂沉积症的临床特征及诊断

目的探讨以慢性进行性神经系统受累为主要表现的GM2神经节苷脂沉积症的临床特征、诊断及鉴别诊断。方法对3例以慢性进行性神经系统受累为主要表现的GM2神经节苷脂沉积症患儿进行详细病史询问、体格及辅助检查,3例均行眼底、头颅MRI、氨基己糖苷酶(Hex)活性、脑电图、听觉诱发电位检查。结果3例均表现为智力运动倒退,对声音刺激有异常惊跳反应;顽固性抽搐、共济失调各2例;锥体束征均阳性;眼底检查均发现樱桃红斑,视神经萎缩1例;头颅MRI示均有脑白质病变;脑干听觉诱发电位异常1例;脑电图见癫癎波2例;Hex活性均下降。其中2例Tay-Sachs病患儿仅Hex A降低,1例Sandhoff患儿Hex A及Hex B均降低。结论儿童进行性智力运动倒退伴异常惊跳反应、视力减退、眼底樱桃红斑、顽固性抽搐及共济失调是GM2神经节苷脂沉积症的临床特点。血白细胞Hex活性检测是确诊的重要依据。

脆性X综合征的筛查、诊断和治疗

目的为简化筛查标准，提高对脆性Ｘ综合征（ＦＲＡＸＡ）筛查、诊断和治疗能力。方法采用九条标准，智力低下、智力低下家族史、长脸、大（或突出）耳朵、注意力不集中及多动、孤独行为、通贯掌、巨睾和关节过度伸展。对 ２０８例可疑 ＦＲＡＸＡ（男 １９０例，女 １８例）的筛查进行回顾性分析。用 ＰＣＲ方法扩增（ＣＧＧ）ｎ 三核苷酸重复序列作筛查，用 ＰＣＲ－Ｓｏｕｔｈｅｒｎ杂交作诊断；用叶酸及早期干预进行治疗。结果用 ＰＣＲ－Ｓｏｕｔｈｅｒｎ杂交法诊断ＦＲＡＸＡ７例。分析通贯掌、巨睾及关节过度伸展在ＦＲＡＸＡ的筛查中出现的频率低，与诊断相关不甚密切，故采用简化的六项标准，如果评分≥６分，应作进一步检测；评分＜６分，６０％以上的病例可以除外ＦＲＡＸＡ，且不遗漏任何阳性病例。对６／７例用叶酸进行治疗，治疗有效，未发现副作用。结论 简化的六项标准明显提高了ＦＲＡＸＡ的临床筛查的阳性率；而ＩＣＲ方法快捷、简便，适用于ＦＲＡＸＡ的筛查。叶酸治疗此综合征有效。

SmaRT──一种简便、有效的PCR产物直接克隆技术

ＳｍａＲＴ──一种简便、有效的ＰＣＲ产物直接克隆技术宋莉，李明月，张秀清，但美霞，刘国仰，杨焕明（中国医学科学院基础医学研究所，中国协和医科大学基础医学院医学遗传室，北京１００００５）ＰＣＲ已成为医学与生物学、特别是医学遗传学领域中最重要的技术。在序...

中国人遗传性慢性舞蹈病病因的确定

国外报道的亨廷顿病有１／３的家系可追溯到共同的祖先，而国内报道的亨廷顿病多为散发病例。为了查明国内报道的遗传性慢性舞蹈病与国外报道的亨廷顿病是否属同一种病因。方法应用聚合酶链反应（ＰＣＲ）方法分析了中国正常人和遗传性慢性舞蹈病家系成员的ＩＴ１５基因中（ＣＡＧ）ｎ重复序列。结果２５个正常人拷贝数为１６～２６，来自４个家系的７名患者的拷贝数为４４～５３，显著增大。结论从基因水平第１次确定了中国人遗传性慢性舞蹈病与白种人的享廷顿舞蹈病一样，是由ＩＴ１５基因中（ＣＡＧ）ｎ重复序列扩增所致。

酶制剂Cerezyme治疗高雪氏病效果观察

目的 酶制剂cerezyme替代疗法治疗高雪氏病 4年小结。方法 Cerezyme初剂量 6 0U/kg ,每 2周 1次静脉滴注 ,2年后疗效好转剂量改为 30U/kg。结果 1 5例用药 4年以上的患者 ,血红蛋白平均增加 2 1g/L ,1 4例血小板近 1 2月恢复正常 ;脾功能亢进得到改善 ,肝脾回缩 9.3%和 6 0 .6 % ,肝功能治疗 6个月后大多恢复正常 ;身高平均增长 2 5 6厘米 ,体重平均增加 1 4 5公斤 ,生活质量明显提高。结论 在基因治疗尚未广泛应用之前 。

中国10例戈谢病基因型与临床表型的相关性

目的 了解中国人戈谢病 (GD)基因型及其与临床表型的相关性。方法 10例中国GD患儿 (男 9,女 1。其中 5例Ⅰ型 ,2例Ⅱ型 ,3例Ⅲ型 ) ,来自无关的家庭 ,年龄 1 5～ 13岁。所有GD患儿的诊断是根据白细胞或成纤维细胞中 β 葡萄糖苷酶活性明显缺乏及骨髓象中出现戈谢细胞确定。采用巢氏聚合酶链反应扩增葡萄糖脑苷脂酶功能基因 ,产物覆盖了全部编码区 ;再分别扩增 11个外显子 ,用于限制酶切片断多态性 (RLFP) ,单链构像多态性 (SSCP)及序列分析。结果 5例Ⅰ型GD患儿的基因型是R48W R12 0W、G46E L44 4P、F37V L44 4P、N188S L44 4P及Y2 0 5C L44 4P ;2例Ⅱ型GD均为F2 13I L44 4P ;3例Ⅲ型GD为D40 9H D40 9H、G2 0 2R D40 9H及L44 4P L44 4P。检出了 2个新生突变F37V及Y2 0 5C。结论 中国GD患儿的L44 4P突变的等位基因频率最高 (40 % )。它同时出现在有神经病变及无神经病变的表型中。F2 13I、D40 9H及G2 0 2R突变基因型与有神经病变表型相关。

积极开展遗传病的预防工作

积极开展遗传病的预防工作施惠平近年来，随着医学的发展、妇幼保健工作的开展、预防接种的普及，我国营养不良性疾病、感染性疾病和传染病的发病率明显下降，遗传性疾病比例上升，预防遗传性疾病发病的问题日益重要。全国统计资料表明，目前我国有残疾人约５１００多万，...

染色体畸变的微细胞遗传学研究

用细胞遗传学、分子细胞遗传学及分子遗传学的有关方法对Prader-Willi综合征、环状标记小染色体、15p+和22p+家系、der(15)等病例进行研究,确定了其染色体改变,并结合临床表现对其关键片段、表型效应等问题展开了讨论,为临床及基础理论研究提供了重要信息。进一步证明微细胞遗传学在遗传病的诊断及研究中具有重要作用。

苯丙氨酸羟化酶基因内短串联重复序列多态性的分析及应用

在苯丙氨酸羟化酶基因内含子３中有一４核苷酸（ＴＣＴＡ）串联重复序列，作者分析了中国人中这一位点的多态性，聚合酶链反应扩增产物经聚丙烯酰胺凝胶电泳分离后，经银染色显示结果，在中国人群中检出７种等位片段。在３６例正常人中这些等位片段的频率分别为０．０２８、０．０４２、０．０１４、０．１３８、０．５４２、０．２０８和０．０２８，多态性信息量（ＰＩＣ）为０．５８５；在１６个苯丙酮尿症家庭中，频率为０．０１６、０．０７８、０．０４７、０．３１２、０．３７５、０．１５６和０．０１６，ＰＩＣ为０．６９３，在苯丙酮尿症产前基因诊断中应用价值极高。短串联重复序列多态性连锁分析简化了苯丙酮尿症基因诊断的途径，有利于向基层推广。作者应用连锁分析成功地进行了２例产前诊断。

猫叫综合征关键区域定位于5p15.2的D5S713-D5S18区域

猫叫综合征是由５号染色体短臂缺失引起的染色体缺失综合征。根据染色体综合征“关键区域”的概念，以及近１０年来对１０６例５ｐ缺失病例的临床诊断、细胞遗传学及分子遗传学分析，将猫叫综合征的关键区域定位于５ｐ１５．２，位于Ｄ５Ｓ７１３和Ｄ５Ｓ１８两个遗传标记之间的区域。为研究该病提供了遗传学资料。

同时显示杂交信号和荧光R带的FISH技术

目的建立直接将ＤＮＡ探针定位于显示Ｒ带染色体上的简便方法。方法正常人外周血淋巴细胞培养６７小时，同时加入Ｈｏｅｃｈｓｔ３３２５８和ＢＵｄＲ继续培养５～６小时，常规方法制片。标本浸于２×ＳＳＣ中，在距其１０ｃＭ的２０Ｗ紫外灯下７５℃照射２０分钟。此标本以生物素标记的ｃｏｓｍｉｄ和ＹＡＣ克隆以及ｐＢａｍＸ７进行原位杂交，Ａｖｉｄｉｎ－ＦＩＴＣ和Ａｎｔｉａｖｉｄｉｎ进行信号的检测与放大，ＰＩ复染。于Ｏ１ｙｍｐｕｓＢＸ６０型荧光显微镜下，通过ＷＩＢ滤光镜同时观察显示Ｒ带的染色体和杂交信号。结果在显微镜下，黄绿色杂交信号直接定位于红色并显示Ｒ带的染色体上。

睑裂狭小、倒转型内眦赘皮和上睑下垂综合征Ⅰ型相关基因的定位

目的 对一个常染色体显性遗传的睑裂狭小、倒转型内眦赘皮和上睑下垂综合征(blepharophimosis epicanthus inversus and ptosis,BPES)家系的致病基因进行定位研究。方法 对染色体3q区域 4个微卫星位点 D3S30 45、D3S176 4、D3S30 5 3和 D3S2 436进行连锁分析。结果 未见患者在这 4个位点有缺失 ,各多态性位点 L od最大值 D3S30 45为 0 .77(θ=0 .0 0 ) ;D3S176 4为 3.6 1(θ=0 .0 0 ) ;D3S30 5 3为 0 .11(θ=0 .3) ;D3S2 436为 - 0 .0 3(θ=0 .4)。结论 在该家系中 ,BPES 与 3q2 2 - q2 4区域的D3S176

短重复序列PCR产物变性胶电泳影子带新解——正负链电泳行为的差异

目的 探讨短重复序列 Ｐ Ｃ Ｒ 产物变性胶的电泳影子带形成机理，并设法消除影子带。方法采用 Ｐ Ｃ Ｒ和不对称 Ｐ Ｃ Ｒ，通过变性聚丙烯酰胺凝胶电泳观察影子带产生的情况。结果 利用不对称 Ｐ Ｃ Ｒ，某些二核苷酸（ Ｃ Ａ）ｎ 重复序列的影子带减少一半，四核苷酸重复序列的影子带消除；正负链的电泳速度有差异。结论 正负链电泳行为的差异是影子带产生的原因之一，利用不对称 Ｐ Ｃ Ｒ 可部分或完全消除影子带。

我国人睑裂狭小综合征患者FOXL2基因突变检测

目的研究分析我国人睑裂狭小综合征(BPES)两家系及6例散发病例的基因突变。方法选取染色体3q区域5个微卫星位点D3S3696、D3S1549、D3S3586、D3S1764和D3S1744进行家系连锁分析,应用聚合酶链反应(PCR)和DNA测序技术对提示连锁的染色体区域内候选基因FOXL2进行突变筛查。结果家系连锁分析,将致病基因定位在3q23区D3S3696至D3S1744之间9.88cM范围,其中位点D3S1549、D3S3586的LOD最大值为2.11(θ=0.00),D3S1764为1.51(θ=0.00);对FOXL2基因突变筛查发现,2例散发患者有909～938dup30重复突变,1例散发患者有1041～1042insC移码突变,但两个家系中无突变。结论两个家系与3q23区域的D3S1549、D3S3586和D3S1764位点存在连锁。首次在散发患者中发现两种FOXL2基因突变,其中909～938dup30突变被认为是BPES综合征FOXL2基因两大突变热点之一。尚未发现突变的家系,其致病机制可能与FOXL2基因周围的位置效应,或是与提示连锁的3q23区域内其他基因相关。

儿童期脊肌萎缩症的基因诊断及产前基因诊断

为建立脊肌萎缩症（ＳＭＡ）产前诊断方法，应用３个与ＳＭＡ基因紧密连锁的ＣＡ重复序列位点ＪＫ５３ＣＡ１／２、５ＤＳ６３７、ＣＡＴＴ１，对１８个ＳＭＡ家系进行了连锁分析；应用聚合酶链反应－单链构型多态性（ＰＣＲ－ＳＳＣＰ）分析，对３７例ＳＭＡ患儿作了ＳＭＡ基因缺失的检测；并作２例ＳＭＡ产前诊断。结果：１８个家系通过ＪＫ５３ＣＡ１／２位点诊断１２个（可诊断率６６．７％），通过５ＤＳ６３７位点诊断１４个（７．８％），１０个ＳＭＡ家系通过ＣＡＴＴ１位点诊断９．５个（９５．０％）；３７例患儿中３２例（８６．５％）有端粒侧ｅｘｏｎ７的纯合性缺失；２例接受产前诊断者，１例胎儿患病，１例胎儿为正常。结论：应用ＳＭＡ基因旁侧ＣＡ重复序列联合ＰＣＲ－ＳＳＣＰ检测进行ＳＭＡ基因诊断和产前诊断简便、准确、可应用于临床。

一个异染性脑白质营养不良家系ARSA基因突变分析

目的分析并确定一个异染性脑白质营养不良(metachromaticleukodystrophy,MLD)家系芳基硫酸酯酶A(arylsulftaseA,ARSA)的基因(ARSA)突变及遗传特征。方法收集先证者及其家系成员临床资料,采用聚合酶链反应和DNA直接测序方法进行ARSA突变检测,确定基因突变的位点,分析基因型与表型的关系。结果该家系先证者的ARSA基因同时存在第2外显子G251A(R84Q)与G296T(G99V)两个杂合突变,具有相似表型的胞弟与先证者的测序结果完全一致,先证者之父母分别携带ARSA基因第2外显子G251A(R84Q)与G296T(G99V)的杂合突变,表型正常的先证者之姐未发现这些突变。结论该家系中两位患儿均为ARSA基因复合杂合突变致病,其G251A(R84Q)突变来自父亲,G296T(G99V)突变来自母亲,其父母均为表型正常的基因突变携带者。

用人鼠杂交细胞株探针进行染色体描绘

用人鼠杂交细胞株探针进行染色体描绘曾瑄，赵蓥，高春生，赵非非，刘国仰，杨焕明，程在玉荧光原位杂交（ｆｌｕｏｒｅｓｃｅｎｃｅｉｎｓｔｉｕｈｙｂｒｉｄｉｚａｔｉｏｎ，ＦＩＳＨ）是目前广泛应用的一种非同位素原位杂交技术，在基因定位、标记染色体的识别、染色体...