微小RNA-194-5p与cullin4A在肺结核病人中的表达及意义

目的探讨微小RNA-194-5p(miR-194-5p)与泛素连接酶cullin4A(CUL4A)在肺结核病人中的表达及其意义。方法选取2016年12月至2018年12月中国平煤神马集团职业病防治院结核病病人为研究对象,确诊为肺结核病人50例作为肺结核组,潜伏结核感染病人50例作为潜伏结核感染组,同期该院体检健康者50例作为对照组。实时荧光定量逆转录聚合酶链反应(qRT-PCR)检测miR-194-5p、CUL4A mRNA、鸟苷酸结合蛋白5(GBP5)mRNA的表达;酶联免疫吸附测定(ELISA)检测可溶性Tim-3(sTim-3)、可溶性Gal-9(sGal-9)水平;采用Pearson相关性分析检验肺结核病人miR-194-5p、CUL4A表达量与GBP5、sTim-3、sGal-9的相关性。结核分枝杆菌(Mtb)感染人巨噬细胞系U937,ELISA检测白细胞介素-6(IL-6)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)水平。蛋白质印迹法(Western blotting)检测Wnt/β-连环素(Wnt/β-catenin)信号通路相关蛋白T细胞因子(TCF)、糖原合成酶激酶-3(GSK-3β)、β-catenin表达量。结果与对照组相比,潜伏结核感染组与肺结核组病人血清miR-194-5p、GBP5 mRNA的表达水平升高(P<0.05),其中miR-194-5p:(1.01±0.23)比(2.32±0.53)比(3.35±0.20),sTim-3、sGal-9水平升高(P<0.05),CUL4A mRNA的表达水平显著降低[(1.03±0.11)比(0.73±0.12)比(0.41±0.15),P<0.05],潜伏结核感染组与肺结核组各指标间相比差异有统计学意义(P<0.05);miR-194-5p与CUL4A呈负相关(r=-0.421,P<0.001),miR-194-5p与GBP5、sTim-3、sGal-9呈正相关(P<0.05);Mtb感染细胞后,IL-6、TNF-α的表达水平升高(P<0.05),TCF、GSK-3β、β-catenin表达量升高(P<0.05)。结论miR-194-5p在肺结核病人中表达上调,CUL4A表达下调,二者可能参与肺结核发生及发展过程。