家畜寄生虫学多媒体教学研究

家畜寄生虫学是以生物学和医学为内容的综合性学科,传统将其纳入形态学的范畴,在教学过程中涉及到大量的形态、结构、生活史、显微镜及大体标本图片及影像.兽医寄生虫学又是一门古老的学科,寄生虫病原的形态学一直是本科教学的重点之一.针对这一特点,笔者多年来在完成教学科研任务的同时不断摸索适合本专业的教学方法.在教学科研过程中收集和积累了各种类型的标本(各种蠕虫、昆虫、节肢动物、原虫、软体动物等及其相关的病理标本),在原收藏和保存标本的基础上制备了大量虫体标本和组织病理标本,现有标基本上涵盖了本学科的全部内容.并将标本通过实物拍照、显微摄影、图片扫描、上网下载等方式进行采集照相、制作了各类图片、显微镜用玻片、幻灯片、POWERPOINT图片等,以此为基础建立了本学科图片库和制作成多媒体课件,为课程教学提供了最直接形象的材料,从而提高了教学质量.

克隆表达的犬吉氏巴贝斯虫重组GST-P130kDa用于血清学诊断

利用抗体法(picoBlueTMImmunscreeningKit,应用B.gibsoni感染血清)从犬吉氏巴贝斯虫(B.gibsoni)裂殖子mRNA制备的吉氏巴贝斯虫cDNA文库中进行免疫筛选,选出目的基因相cDNA片段(阳性克隆)。测序验证后将该cDNA(基因)克隆至原核表达载体pGEX4T3,构建重组质粒,在大肠杆菌E.coli(DH5a)中以GST融合蛋白的形式表达(SDSPAGE分析证明);表达产物为130kDa的可溶性融合蛋白。免疫学分析(Westernblot和ELISA)结果表明,犬吉氏巴贝斯虫重组GSTP130kDa融合蛋白(rBgGSTP130kDa)能与犬吉氏巴贝斯虫(B.gibsoni)感染血清起反应,且与犬巴贝斯虫(B.canis)无交叉反应。本试验利用犬吉氏巴贝斯虫重组BgGSTP130kDa融合蛋白(作为重组抗原)检测巴西(n=310)、日本(n=100)和中国(n=114,n=30)等国随机采集的自然感染狗血清,其结果为巴西狗血清阳性率为55%、日本为8%、中国为1～9%;其结果与间接荧光抗体法(IFAT)结果为一致(作为验证)。结果表明重组BgGSTP130kDa融合蛋白具有较强的免疫原性和特异性,可用于吉氏巴贝斯虫病的诊断,这为吉氏巴贝斯虫病的早期诊断和深入研究犬吉氏巴贝斯虫病的特异性重组抗原及重组疫苗奠定基础。