西南桦节间茎段植株再生体系的建立

[目的]探究西南桦间接器官发生过程的愈伤组织诱导、不定芽分化、生根诱导等各阶段的适宜培养基配方,建立西南桦高频再生体系,为其遗传转化和良种繁育提供理论依据和技术支持。[方法]以西南桦TC2号无性系的节间茎段为外植体开展愈伤组织诱导、不定芽分化以及生根培养基筛选试验,并优化了预培养条件,揭示了愈伤组织诱导阶段基本培养基、激素浓度、暗培养时间,愈伤组织分化阶段激素组合,以及预培养条件等因素对不定芽分化的影响。[结果](1)预培养的适宜条件为:弱光培养(1000 lx)15 d后转至暗培养7 d,再正常光照(2000 lx)培养8 d,该条件下可获得适度黄化的植株,其平均株高和节间长度分别为6.6 cm和3.1 cm;(2)适合西南桦节间茎段愈伤组织诱导的培养基为WPB5+1.0 mg·L^(-1) TDZ+0.2 mg·L^(-1) NAA+20 g·L^(-1)蔗糖+5.8 g·L^(-1)琼脂(pH5.8),适宜暗培养时间为15 d;(3)适合愈伤组织分化的培养基为WPM+0.8 mg·L^(-1)6-BA+0.5 mg·L^(-1) GA3+30 g·L^(-1)蔗糖+5.8 g·L^(-1)琼脂(pH5.8);(4)采用上述最优方案,其茎段诱导的愈伤组织分化率和净增殖系数为88.9%和6.2以上,平均每个预培养植株可产生56.8个不定芽;(5)适宜生根培养基为WPM+0.1 mg·L^(-1) NAA+20 g·L^(-1)蔗糖+5.8 g·L^(-1)琼脂(pH5.8),培养30 d后生根率可达100%。[结论]本研究完整构建了高效稳定、重复性好的西南桦节间茎段高频再生体系,该体系不仅愈伤组织分化率和增殖系数较高,还可提升节间茎段取材的效率,为今后开展西南桦组培快繁以及利用基因工程进行其遗传性状改良奠定了基础。

油榄仁种胚高质量组培快繁体系

【目的】探究油榄仁组培快繁各阶段的最佳培养基配方以及硅酸钾对苗高整齐度的影响,建立油榄仁高质量组培快繁体系,为油榄仁良种繁育和定向培育提供理论和技术支持。【方法】以油榄仁优良家系种子为试验材料,开展消毒方法以及增殖和生根阶段培养基配方筛选试验,探讨硅酸钾对增殖苗整齐度的调控方法,分析不同处理间种子消毒效果、增殖质量以及生根情况的差异,确定适宜的消毒方法以及增殖和生根培养基。【结果】合适的种子消毒方法为:油榄仁种子经浓硫酸浸泡7 h后,用0.1%升汞溶液消毒种胚8 min,无菌胚萌芽率超过80%。增殖培养中,6-BA与IBA质量浓度比值为10,且KH_(2)PO_(4)和MgSO_(4)·7H_(2)O的质量浓度分别为MS培养基的2倍和1.5倍时,油榄仁的增殖效果最好,表现为增殖系数高且生长状态好,接种培养30 d其增殖系数、增殖苗高度和叶绿素含量分别可达5.6、3.75 cm和2.51 mg·g-1。油榄仁的最佳增殖培养基为改良MS(KH_(2)PO_(4)和MgSO_(4)·7H_(2)O的质量浓度分别为255 mg·L^(-1)和740 mg·L^(-1))+1.0 mg·L^(-1)6-BA+0.1 mg·L^(-1)IBA+30 g·L^(-1)蔗糖。硅酸钾可以提高增殖苗的整齐度,其最佳浓度为1.5 mmol·L^(-1),整齐度比对照高2.63倍。通过生根培养筛选出最佳生根配方为WPM+0.2 mg·L^(-1)NAA+20 g·L^(-1)蔗糖,生根率达94%以上。【结论】构建了油榄仁的组培快繁体系,尤其是通过培养基中添加适宜浓度的硅酸钾可改善油榄仁组培苗的整齐度。该体系不仅可获得优质组培苗,还能提高组培苗的整齐度,降低育苗成本,为油榄仁优良种质组培苗产业化生产提供技术支撑。

不同截干高度下米老排促萌效果

为完善米老排Mytilaria laosensis采穗圃营建技术,重点探究不同截干高度对2年生米老排无性系苗促萌效果的影响。试验共设置3种截干高度处理,即20(T1)、30(T2)、40 cm(T3),采取主干和萌条2次截干法。结果表明:第一次截干后T2和T3的萌芽数和萌条数显著大于T1,且T3>T2>T1,T3平均每株萌芽数和萌条数分别达10.72个和4.17条,但T1的萌条转化率最高;二次截干后,各处理间萌条数差异不显著。截干高度对萌条基径影响不显著,对二次截干后的萌条长度影响显著,但T1的萌条基径均最大,其萌条质量相对来说更优。两次截干后T1的单位萌条数均极显著大于其他两个处理,其促萌效果最佳,且越靠近根部的萌条,其幼态化程度也越高,分化能力越强。综合来看,截干高度20 cm更适合米老排的截干促萌。

基于油楠(Sindora glabra)转录组测序的SSR分子标记的开发

油楠(Sindora glabra)作为极具开发潜力的能源植物,在分子水平上的研究仅局限于ISSR分子标记。本研究利用Trinity软件对油楠转录组数据进行组装,共得到总长为48307806 bp的283998条Unigenes。利用MISA软件寻找到97443个含有SSR的重复基元。SSR位点中主要重复序列为单核苷酸和二核苷酸,分别占总SSR位点的67.68%和22.56%,其次是三核苷酸,占8.54%。利用Primer 3.0设计引物,并从中随机选择200对引物进行PCR扩增,其中有13对扩增出清晰条带,多态性高,重复性好。油楠SSR分子标记的开发对于研究其遗传多样性、重要性状基因定位及分子标记辅助选择育种等起到重要的推动作用。