玉米根萤叶甲在中国的潜在适生区域与检疫措施研究

玉米根萤叶甲(Diabrotica virgifera virgiferaLeconte)是一种原产北美洲南部和中美洲北部并于1992年以来在欧洲快速传播扩散的危险性玉米害虫。该虫对我国玉米生产构成严重威胁。为了防范其入侵,本文在概述其生物学和传播蔓延趋势的基础上,利用基于生态位概念的GARP软件对该虫在我国的潜在适生区域进行了预测。研究显示适生区广布于黑龙江、吉林、辽宁、内蒙古、新疆、河北、北京、天津、山东、山西、陕西、宁夏、甘肃、江苏、安徽、河南、湖北、四川、云南和西藏等省区,其中最适生区主要位于东北平原的南部、华北平原的南部、渭河平原及其南北附近地区。据此结果,对其远距离传入中国的可能途径做了分析,对高危地区进行了分析判断,最终提出了检疫与防范建议。

检疫性实蝇体内共生菌Wolbachia的研究展望

Wolbachia是一类广泛分布于节肢动物 (包括实蝇 )生殖组织中的共生细菌。该菌通过卵的细胞质进行传播 ,形成包括诱导胞质不亲和在内的多种调控其宿主生殖活动的机制。本文在分析昆虫Wolbachia分布、作用和检测研究的基础上 ,对实蝇Wolbachia感染特点和生殖调控作用的最新研究和未来发展进行了论述和展望。

桔小实蝇在中国的适生性研究

对桔小实蝇Bactrocera dorsalis Hendel在中国的适生性进行了研究，结果表明，该虫的世代发育起点温度和有效积温分别为10．6757℃、501．7240日度．根据桔小实蝇的致死温度、有效积温和生物气候相似距，构建了桔小实蝇适生性分析计算机模型．用中国670个气象站30年的气候资料运行该模型，将桔小实蝇在中国的定殖风险区划分为高度危险区、危险区、轻度危险区和安全区，分布北界为（30±2）°N，适生区面积占全国的31．64％，1年发生3～11代，以4～8代为主．

泡菜等产品中寄生虫卵的检验方法研究

泡菜等相关产品中携带寄生虫卵的潜在威胁不容忽视。在调查、取样的基础上,本研究进行了泡菜等产品中寄生虫卵分离方法的研究,并用模拟阳性泡菜样品进行了猪蛔虫卵的回收率实验。经采用泡菜、辣椒酱等样品进行验证,本研究建立了包括过滤、离心、漂浮、麦克马斯特(McMaster)虫卵计数板观察等程序的虫卵检验操作规程。回收率实验表明,本方法对泡菜样品中猪蛔虫卵的回收率为35.49%,可以满足相关产品的检验需求。

基于植物病害传入风险的种苗引种限量模拟研究

本研究利用基于Monte Carlo模拟理论开发的有害生物风险评估系统PRAS,采取场景分析、数学模型构建和随机模拟方法对引种限量进行了模拟研究。有害生物随不同引种数量、不同带毒率的种苗传入的风险模拟显示,在现有检测水平和种植条件下,1万次引种模拟中,达到种苗传毒零风险需要满足:种苗带毒率在小于1%时,引种限量应在0～250株;种苗带毒率在1.1%～2%时,种苗引种限量在0～100株;种苗带毒率在2.1%～5%时,种苗引种限量应为0～50株;在国家现行规定的引种限量内,果树种苗带毒率≤0.4%、木本花卉种苗带毒率≤1%时,有害生物随种苗传入风险为零。结果表明基于风险分析基础上的引种限量,对于防范有害生物传入具有重要意义。

生物信息学及其在检验检疫中的应用

在对生物信息学概述的基础上介绍了其在生物及其产品风险评估、检疫检测技术、预警机制建立、检验检疫资源共享平台建设、物种资源查验、生物鉴定监测、分子可视化自动比对、检疫性生物阳性参比物质研究、检疫性生物流行病学研究中的应用,并展望了生物信息学在检验检疫中的应用前景。

转基因水稻“科丰6号”实时荧光PCR定性定量检测方法研究

旨在建立转基因水稻"科丰6号"外源基因和边界序列的实时荧光PCR检测方法,为科丰6号定性定量检测提供技术支持。根据外源基因和边界序列信息,设计实时荧光PCR探针引物,优化体系,对不同转基因产品和不同转基因含量的"科丰6号"水稻进行检测。结果显示,所设计的引物探针具有很好的特异性,与其他转基因水稻品系、转基因玉米、转基因棉花、转基因番茄和非转基因水稻均无非特异性反应,对转基因水稻"科丰6号"的检测灵敏度达到0.01%。建立的科丰6号实时荧光PCR检测方法重复性好、灵敏度高,能够达到目前国际上转基因产品定量检测的标准,为该水稻品系的定性定量检测提供技术支持。

桔小实蝇在西藏自治区的适生性研究

桔小实蝇Bactrocera dorsalisHendel是重要的世界性检疫害虫之一,对热带和亚热带的250余种水果和蔬菜造成危害。本研究在中国760气象站点(西藏有39个气象站点)的气象数据和桔小实蝇的生物学数据以及该虫的已知分布地信息的基础上,利用CLIMEX和ArcGIS软件对桔小实蝇在中国,尤其是西藏自治区的适生性进行了研究。结果表明:桔小实蝇在中国的适生范围涉及21个省、市(区);在西藏自治区,桔小实蝇的适生站点有15个,其中加查和察隅处于中度适生区。本研究明确了桔小实蝇在我国的适生性,为科学制定我国(尤其是西藏地区)针对桔小实蝇的检疫政策和措施、防止该实蝇入侵和进一步的扩散等提供了理论依据和技术支持。

苹果茎沟病毒研究进展

苹果茎沟病毒在仁果类果树上的感染较普遍,且一般不产生明显症状,给生产带来严重损失。对于该病毒病害,较为可行的控制措施是实行检疫控制其扩展和培育与栽培无病毒苗木。较为系统地综述了国内外苹果茎沟病毒的分布与危害、生物学特性、基因组结构与序列分析及检测方法等方面的研究进展。

生物传感器在转基因产品检测中的研究进展

生物传感器因快速、低耗和易于操作等优点在基因序列测定中受到了广泛的关注。概述了生物传感器的基本原理、分类以及几种主要生物传感器在转基因产品检测中的研究进展,分析了其在应用中存在的问题,并对今后的发展趋势提出一些看法。

香蕉穿孔线虫双重PCR快速检测技术研究

香蕉穿孔线虫(Radopholus similis)是国际上公认的植物检疫性有害生物之一,是热带地区果树上最重要的线虫。通过设计的属水平上的特异性引物R1、R2(R1/2)和种水平上的特异性引物RS1、RS2(RS1/2)进行双重PCR扩增香蕉穿孔线虫,可扩增出长度为362和291 bp的2个特异性片段谱带。同时分别对检测体系中反应参数进行优化,最佳延伸温度为51.4℃,引物R1/2与RS1/2最佳浓度配比为0.2μm o.lL-1/1.2μmol.L-1,并测试检测引物的灵敏度,能进行有效检测的最低起始核酸量为100 pg;同时,也能对单条线虫进行检测以及样品中线虫的检测。专化性测试证明,2对引物能有效地进行香蕉穿孔线虫的快速分子诊断。

葡萄的两种检疫性病毒的多重RT-PCR检测

本研究利用多重RT-PCR技术,对葡萄的检疫性病毒中番茄环斑病毒(ToRSV)和烟草环斑病毒(TRSV)进行检测, 并研究了反应体系中各个参数对多重RT-PCR的影响。结果表明:可以在同一反应体系中实现对ToRSV和TRSV的RT- PCR检测,但模板浓度、引物浓度、循环数等3个因素对检测结果的准确性有较大的影响,3个参数的增加都会导致非特异性扩增的增多,而dNTP以及Taq酶的浓度对实验结果并无较大影响。

应用TaqMan探针进行马铃薯金线虫实时荧光PCR检测技术研究

马铃薯孢囊线虫是全球性的植物检疫性线虫,亦是我国重点关注的有害生物。针对马铃薯金线虫ITS序列,设计了引物和TaqMan探针,使用15个马铃薯孢囊线虫群体和4个其他孢囊线虫样品进行验证,可高度灵敏地检测单个马铃薯金线虫的孢囊或幼虫,并可进行定量;最高检测灵敏度达到10fg;同时开展了混合样品和未知样品的检测,证明了引物的专化性和TaqMan探针的特异性。该检测方法可自动化检测马铃薯金线虫并进行定量,适合进行标准化的常规检测。

舞毒蛾种群分子系统学初步研究

本文以线粒体COI基因片段为分子标记,扩增了舞毒蛾部分种群的DNA序列,结合GenBank上发表的世界舞毒蛾种群相关序列,重建了舞毒蛾不同地理种群的系统发育关系。结果表明:世界舞毒蛾分成4支:冲绳舞毒蛾、北海道舞毒蛾地理种群、欧亚大陆舞毒蛾地理种群(包括日本大陆地区)和北美舞毒蛾地理种群。其中世界地理种群在COI基因上变异为0%～7%,中国种群在COI基因上没有差异。

假病毒在RNA病毒检测中的应用研究进展

由于核酸检测对于病毒感染的早期诊断和抗病毒治疗疗效的动态观察具有重要价值，近年来，基于RNA的核酸检测技术，如RT—PCR扩增（Mulder，1994）、核酸依赖的序列扩增（NASBA）（Van Gemen，1994）、分枝链DNA（Pachl，1995）、转录调控扩增等技术快速发展起来并广泛应用于RNA病毒的检测。在RNA病毒的定性和定量核酸检测中，实验人员操作中的随机误差、扩增仪孔间温度的差异、标本核酸提取后抑制物的残留、待扩增靶核酸的浓度和逆转录的效率及试剂的问题等，

基于PCR及焦磷酸测序技术的单孢子虫鉴定技术研究与应用

为适应口岸单孢子虫快速、准确、高通量检测的需求,建立一种基于PCR及焦磷酸测序技术平台的单孢子虫鉴定方法。以OIE推荐的PCR扩增方法获得单孢子虫特异基因,根据此基因的保守序列利用焦测序软件PyroMarkQ96ID设计专用引物进行PCR扩增及焦磷酸测序,测得序列经比对分析确定为单孢子虫序列。同时采用PCR焦磷酸测序方法和OIE推荐的PCR方法对牡蛎样品进行检测。结果表明,所建立的检测方法可从基因序列水平上准确鉴定牡蛎样品中的单孢子虫,且检测结果与OIE方法的检测结果一致。

枣疯病植原体实时荧光定量PCR检测方法的研究

目的:建立枣疯病植原体拷贝数检测实时荧光定量PCR方法,为枣疯病植原体定量检测提供技术支持。方法:构建质粒标准品,设计实时荧光PCR探针引物,优化体系,建立标准曲线,并进行重复性验证。结果:制备了枣疯病植原体标准质粒,建立了稳定的质粒标准品检测体系(R2=0.998,检测限10拷贝,定量限100拷贝)。结论:实时荧光定量PCR检测方法重复性好,可用于枣疯病植原体的拷贝数检测,为枣疯病植原体检验检测和病害防治提供了技术支持。

栎树猝死病菌检疫鉴定方法

根据栎树猝死病菌的形态学、生物学培养性状和分子生物学等方面的特征,确立了检疫鉴定栎树猝死病菌的各项技术要求。