华贵栉孔扇贝MSTN基因启动子的功能分析

为了解肌肉生长抑制素myostatin (MSTN)在华贵栉孔扇贝(Chalmys nobilis)闭壳肌肌肉生长和发育过程中所起的负调控作用,对华贵栉孔扇贝的MSTN启动子序列进行了生物信息学分析。结果显示,MSTN启动子序列长1 358 bp,有4个转录起始位点。核心启动子区为–100～–51 bp。有1个TATA-box (–92～–86 bp)和2个Ebox等顺式作用元件;潜在的转录因子结合位点有MEF2、MEF3、FoxO、MTBF和MyoD等;启动子区域无CpG岛。成功构建了6个MSTN启动子不同长度片段的荧光素酶表达载体,瞬时转染到293T细胞并进行双荧光素酶报告基因活性检测,表明6个启动子片段均有转录活性,PGL-534的活性最高,其次为PGL-274、PGL-22和PGL-102,最低的为PGL-995。–216～–364区域可能存在负调控基因表达的转录因子结合位点,–364～–825区域可能存在正调控基因表达的转录因子结合位点。

气相色谱-三重四极杆串联质谱法测定池塘养殖水中3种丁香酚类麻醉剂

建立了池塘养殖水中丁香酚、甲基丁香酚和异丁香酚等3种丁香酚类麻醉剂的残留测定方法。采用正己烷提取,苯基固相萃取柱净化,气相色谱-三重四极杆串联质谱仪进行测定。结果显示,丁香酚、甲基丁香酚和异丁香酚检测限分别为0.05,0.03,0.13μg/L,定量限分别为0.17,0.10,0.43μg/L;在1~200μg/L质量浓度范围内,3种化合物线性良好,相关系数r>0.9996;丁香酚、甲基丁香酚和异丁香酚回收率范围分别为98.5%~101.6%,98.5%~104.6%和98.4%~101.3%,相对标准偏差范围分别为2.3%~5.3%,3.2%~4.1%和2.4%~3.6%。方法能够满足养殖水中丁香酚、甲基丁香酚和异丁香酚同时测定的需要。