海洋脂肪酶YS2071的固定化及酶学性质研究

为提高脂肪酶的利用效率,更好应用于工业化生产,研究了脂肪酶YS2071的固定化技术,筛选最优载体,通过单因素实验法对脂肪酶固定化的条件进行优化,并对其性质进行了研究。采用MI-BSI伯胺功能基吸附树脂为载体,京尼平为交联剂,吸附-交联的方法,分析了加酶量、吸附时间、吸附温度、初始pH、交联剂的浓度、交联时间等因素对脂肪酶固定化效果的影响,并通过PB实验和响应面实验,确定了最佳固定化条件:加酶量为8 mg,吸附时间8 h,吸附温度为20℃,初始pH 8.6,交联剂质量浓度为0.48 g/L,交联时间为1 h时,固定化效率最高,酶活回收率达到60%以上。

海洋金属蛋白酶MP仿生亲和材料纯化条件的优化

目的:建立一种高效的海洋金属蛋白酶MP仿生亲和纯化方法。方法:采用硼酸仿生亲和材料,利用单因素实验,Plackett-Burman实验设计、Box-Behnken实验等响应面优化法,对纯化条件进行优化,利用SDS-PAGE及HPLC分析纯化后样品纯度。结果:利用单因素法和响应面法对纯化条件进行优化和分析,获得硼酸琼脂糖凝胶亲和柱的最佳纯化条件为:粗酶液浓度在100 mg/m L,上样缓冲液为p H8.6的甘氨酸-氢氧化钠,上样速度1 m L/min,洗脱缓冲液为p H5.2的磷酸氢二钠-柠檬酸,洗脱速度2 m L/min,洗脱缓冲液加入75 mmol/L的甘露醇时纯化效果最好,纯化效率提高了11倍,纯化后的样品纯度达到98.8%。

荣成鲜海带及其干、盐制品的营养成分分析

目的对荣成鲜海带及其干、盐制品的营养成分进行全面分析与评价。方法采用常规方法测定荣成干海带、荣成盐渍海带的营养成分,并与荣成鲜海带进行对比。结果荣成盐渍海带中粗纤维、膳食纤维、总糖、褐藻胶含量较高,荣成干海带中甘露醇含量较高;3种海带共检测出16种氨基酸,其中7种为必需氨基酸,蛋白质组成均符合FAO/WHO推荐的理想蛋白质模式,且荣成盐渍海带的必需氨基酸/总氨基酸(essential amino acid/total amino acids,EAA/TAA)和必需氨基酸/非必需氨基酸(essential amino acid/non-essential amino acid,EAA/NEAA)值最高;荣成鲜海带的必需氨基酸指数(essential amino acid index,EAAI)最高,为74,荣成干海带的EAAI最低,为59;以氨基酸评分(amino acid score,AAS)为标准时,3种海带的第一限制性氨基酸都为赖氨酸,而以化学评分(chemical score,CS)为标准时,荣成干海带的第一限制性氨基酸是赖氨酸,荣成盐渍海带和荣成鲜海带的第一限制性氨基酸是赖氨酸和异亮氨酸。3种海带中矿物质元素含量丰富,其中盐渍海带中钠的含量最高,为8.24×10~4(干重计)。重金属分析表明3种海带重金属含量都符合食品安全国家标准。结论本研究中采集的荣成鲜海带及其干、盐制品具有较好的营养价值。

基于主成分分析的鲜海带营养品质评价

为科学地对鲜海带的营养品质差异进行评价,采用主成分分析法对大连、霞浦、荣成地区的13个鲜海带的19种主要营养成分(膳食纤维、褐藻胶、甘露醇、碘、谷氨酸、天冬氨酸、甘氨酸、丙氨酸、丝氨酸、脯氨酸、蛋氨酸、镁、钾、钙、铁、锌、锰、磷、钠)进行分析,建立了鲜海带的营养品质评价方法,并对13种鲜海带的营养品质进行排序。结果表明,13种鲜海带的营养品质存在明显差异,铁、锌、锰、碘元素的变异系数较大,分别为97%、66%、66%、58%,其余指标的变异系数均超过15%,部分营养成分之间存在一定的相关性;通过主成分分析法提取出5个主成分,累计贡献率为87.428%,第1主成分主要由甘露醇、甘氨酸和丝氨酸决定,第2主成分主要由碘、锌和锰元素决定,第3主成分主要由镁元素和天冬氨酸决定,第4主成分主要由膳食纤维和褐藻胶决定,第5主成分主要由钾和磷元素决定,表明甘露醇、海带多糖、甜味氨基酸、鲜味氨基酸和矿物质元素对海带营养品质评价的贡献率较高,可作为衡量海带营养品质评价的重要指标。主成分分析可以较好地用于鲜海带营养品质评价。综合得分结果表明,采集自霞浦地区的样品6号海带品质较优,采集自荣成地区的样品13号、样品12号、样品11号海带次之。

不同冷冻温度对鲅鱼理化指标及新鲜度的影响

以pH、挥发性盐基氮(total volatile basic nitrogen,TVB-N)含量、硫代巴比妥酸值(thiobarbituric acid,TBA)和肌原纤维蛋白含量等理化指标,结合感官评价,分析了-50、-30和-18℃3种冻结温度下鲅鱼新鲜度差异。采用电子鼻技术,获取了不同冻结温度处理后鲅鱼的气味信息,利用主成分分析(principal component analysis,PCA)法处理了电子鼻气味信息数据,建立一种快速区分鲅鱼新鲜度的方法。结果表明,不同冻结温度处理后鲅鱼的新鲜度存在显著差异(p <0.05),-50℃冻结组综合新鲜度显著优于另两组,其中TVB-N和TBA值显著低于另外两组(p <0.05),而pH和肌原纤维蛋白含量显著高于另外两组(p <0.05),同时,-50℃冻结组感官评分也优于其他两组。电子鼻结果显示,电子鼻对各个温度下冻结的鲅鱼肉响应灵敏,区分结果同理化和感官评价结果相一致,能有效区分出不同冻结温度下鲅鱼肉气味差异,表明电子鼻技术可以作为一种区分冻结鲅鱼新鲜度的快速检测手段。