海洋活性多肽的研究进展

根据海洋活性多肽是近年来新药研究热点的现状 ,本文对天然存在的海洋活性多肽和海洋蛋白酶解活性肽的研究进展进行了综述。为进一步开展海洋活性多肽的研究提供参考。

超临界CO_2萃取甲鱼油的研究

用超临界CO2 萃取技术从甲鱼中提取分离甲鱼油 ,着重探讨了影响萃取率的主要因素 ,并同传统的溶剂萃取法进行比较 ,分析了两种萃取方法得到甲鱼油的脂肪酸组成。结果表明 :超临界CO2 萃取甲鱼油的适宜工艺条件为 :2 0MPa ,4 5℃ ,CO2 流量为 1.8kg/ (h·g)原料 ,萃取时间为 6h ;超临界CO2 萃取法萃取率 (98.1% )明显高于乙酸乙酯萃取法 (85 .2 % ) ,两种方法所得到的甲鱼油主要脂肪酸组成基本一致 ,甲鱼油中含有的不饱和脂肪酸高达 70 %以上 ,其中多不饱和脂肪酸含量大于 2 6 %。

牡蛎活性肽的制备及其理化性质的初步研究

目的从牡蛎蛋白质的酶解物中分离制备活性肽并对其理化性质进行初步研究。方法采用胰蛋白酶对牡蛎蛋白质进行酶解,使其释放出具备特殊活性的活性肽,将含有活性肽的粗提物分别用Sephadex G25凝胶柱层析,DEAE-Sepharose FF离子交换柱层析和C18反相柱进行分离和纯化。结果牡蛎活性肽粗提物经过分离纯化制备出3个组分F31,F32,F41。组分F32,F41的等电点分别是7.12和7.08;组分F31,F32,F41的相对分子质量分别为885,810及409;其蛋白含量分别为51.9%,80.2%及99.8%;其糖含量分别为19.2%,4.3%及0%。结论以胰蛋白酶作用的最佳条件采用一步酶解的工艺,牡蛎蛋白质可以得到良好的酶解,同时得到的牡蛎活性肽粗提物活性较高。

超临界CO_2萃取蜂胶有效成分的研究

采用四因素三水平的正交设计,研究了超临界CO2萃取蜂胶有效成分的萃取工艺,并用色质联用法分析了蜂胶提取物的成分组成。结果表明,超临界CO2萃取蜂胶有效成分最佳工艺条件为:萃取温度55℃、萃取压力30MPa、CO2循环量0 6kg/g、w(携带剂)=5%。通过GC-MS分析,共鉴定出其中24个组分。

番茄红素稳定性的研究

本文从温度、光照、氧化剂、还原剂、抗氧化剂、酸碱及金属离子 7个方面对番茄红素油树脂的稳定性进行了考察。结果表明 :日光与紫外光、氧化剂 H2 O2 与还原剂 Na2 SO3 对番茄红素的破坏作用较大 ;常温下番茄红素比较稳定 ,但较高的温度 (>6 0℃ )对番茄红素破坏较强 ;酸对番茄红素有一定的破坏作用 ,碱对番茄红素稳定性影响较小 ;金属离子中 Fe3 + ,Cu2 + ,Fe2 + ,Al3 +对番茄红素有破坏作用。

鱼油多膜微胶囊制备工艺的研究

研究以变性淀粉为主要壁材,以超临界CO2萃取无腥鱼油为芯材,采用糊精、甲壳素等壁材进行连续多次包埋,经喷雾干燥得到鱼油多膜微胶囊。着重探讨了壁材组合、配比等对鱼油多膜微胶囊效率的影响,并通过正交实验确定了鱼油多膜微胶囊喷雾干燥的最佳工艺条件。

高DHA含量营养保健鸡蛋的研究

本文通过对产蛋鸡的日粮中添加不同DHA、α-亚麻酸组成和含量的强化多不饱和脂肪酸的饲料,考察了对鸡蛋蛋黄、鸡肉、鸡肝及鸡心中多不饱和脂肪酸组成和含量的影响,同时研究了不同饲料配方对产蛋鸡体重、产蛋率及采食量的影响。结果表明:对产蛋鸡喂养强化多不饱和脂肪酸的饲料15d后,鸡蛋蛋黄、鸡肉、鸡肝及鸡心中DHA、α-亚麻酸的含量达到稳定,而且强化饲料对产蛋鸡的体重、产蛋率及采食量无不良影响。

牡蛎中糖蛋白成分的分离纯化及其性质研究

本文以青岛产牡蛎为原料,通过低温水提取工艺得到牡蛎糖蛋白粗提物,然后用凝胶柱层析(Sephacryls-100 HR)进行纯化,最后用高效液相色谱制备得到纯度较高的物质F22。由SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳证实F22是纯度较高的单一组分;分子量为34.2 kDa;等电聚焦的结果显示等电点为5.5;红外色谱呈现出典型的糖的特征吸收峰;气相色谱分析结果显示F22的中性单糖是由葡萄糖这一种单糖组成的同多糖;β-消去反应表明F22的糖肽键应为N-型糖苷键。

海参皂甙的研究进展

海洋活性物质是近年来新药原型化合物研究的热点。本文综述了海参皂甙(sea cucumber glycosides)的研究进展,着重列举了近20年来新发现的40多种海参皂甙,并介绍了这些海参皂甙的主要药理活性和结构特征。

盐藻多糖提取工艺的研究

探讨盐藻D.peircei多糖的提取工艺。采用正交实验确定了提取盐藻粗多糖的最佳工艺条件,通过酶解方法脱除其蛋白。实验结果表明,提取盐藻粗多糖的最佳工艺条件为100℃,提取10h,固液比1∶16,pH=9,通过中性蛋白酶对其酶解,可脱除其部分蛋白,使糖含量达到29.01%,初步确定此多糖为含有硫酸基和己糖醛酸的蛋白多糖。

海参活素抗疲劳作用的初步研究

目的研究海参活素的抗疲劳作用。方法采用动物抗疲劳作用实验方法 ,设低、中、高 3个剂量组30 0、6 0 0、1 2 0 0mg·kg·d- 1,另设空白对照组 (生理盐水 ) ,按剂量设计连续给小鼠受试物 1 5d。结果低剂量海参活素可明显延长小鼠爬杆时间 ,降低小鼠运动后血清尿素氮和血乳酸含量 ,升高血糖和肝糖原含量。结论初步研究表明 。

补骨制剂Ⅱ对摘除卵巢大鼠骨质疏松的防治作用

目的研究补骨制剂Ⅱ经灌胃给药后对摘除卵巢大鼠骨质疏松模型的影响。方法雌性6月龄SD大鼠分为假去势组,模型组,阳性对照组,补骨制剂Ⅱ高、中、低剂量组(n=12),除假去势组进行假手术外,其余均手术彻底摘除卵巢法,术后进行模型筛选,9 d后假去势组、去势组均给予生理盐水,阳性对照组灌胃给予己烯雌酚0.02 mg/kg、鱼肝油450 U/kg、多种钙片0.5 g/kg,补骨制剂Ⅱ高、中、低剂量组分别灌胃给予补骨制剂Ⅱ稠浸膏(剂量以生药量计)12、6、3 g生药/kg,连续给药3个月。末次给药后,检测血清钙(Ca2+)、血清磷(P),超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)、血清雌二醇(E2)含量,并测定骨密度、骨生物力学和骨组织形态。结果与去势组相比,低、中、高剂量补骨制剂Ⅱ组在鼠血清中各项检测指标均有显著差异(P<0.05),增加腰椎骨密度,提高模型大鼠的股骨最大载荷和刚度,改善骨小梁数量和连续性。结论补骨制剂Ⅱ可明显改善去卵巢大鼠的骨生物力学性能,提高去势大鼠血清中雌激素水平,能防治去卵巢诱导的大鼠骨质疏松,是值得开发的一种中药复方制剂。

自盐藻藻渣中提取及纯化盐藻多糖

目的从萃取过β-胡萝卜素后的盐藻藻渣中提取纯化盐藻多糖。方法采用热碱水提取,DEAE-纤维素和Sepharose-4B柱层析等方法分离纯化盐藻多糖。结果通过DEAE-纤维素柱层析分离得到3个组分,每个组分经过Sepdex-4B柱层析分别得到2个组分。结论这6个组分为均一组分,均为含有硫酸基和已糖醛酸的糖蛋白。

卤虫卵氨基酸饮料的研制

本文以卤虫卵为原料,使用复合酶(木瓜蛋白酶:胰蛋白酶1:1)进行水解,得到复合氨基酸水解液,通过正交实验确定的最佳酶解条件是底物浓度7.5%,加酶量35000U/g底物,温度50℃,pH为7,水解时间7h。在此条件下,水解率达到45.18%。复合氨基酸水解液可以加工成营养丰富的氨基酸饮料。氨基酸饮料的最佳配方是水解液6%,白砂糖10%,柠檬酸0.25%,β-环糊精0.2%。饮料中含有17种氨基酸,其中必需氨基酸含量为300mg/100ml。

牡蛎酶解产物中多肽的分离纯化及其结构研究

目的从牡蛎蛋白质的酶解产物中分离制备具有活性的多肽并对其结构进行研究。方法采用胰蛋白酶对牡蛎蛋白质进行酶解,使其释放出具备特殊活性的肽,将含有活性肽的粗提物分别用Sephadex G25凝胶柱层析,DEAE-Sepharose FF离子交换柱层析和C18反相柱进行分离和纯化。结果牡蛎酶解产物经过分离纯化制备得到纯度较高的多肽F32,红外光谱的测定表明该肽的肽链是以α-螺旋的构型存在。电喷雾串联质谱法分析多肽F32完整的氨基酸序列为:Arg-Gln-Ile或Leu-Gly-Ala-Thr-Asn-Ala。结论本研究将为牡蛎酶解多肽F32构效关系的研究提供基础。

桂枝甘草龙骨牡蛎汤HPLC-DAD指纹图谱研究

目的:研究桂枝甘草龙骨牡蛎汤汤剂的HPLC-DAD指纹图谱,建立该方汤剂质量评价方法。方法:采用HPLC-DAD方法,色谱柱为Thermo Fisher Hypersil GOLD C18(250 mm×4.6μm,5μm),流动相为乙腈-0.1%磷酸水梯度洗脱,流速为0.8 m L·min-1,检测波长为254 nm,柱温为25℃;以肉桂酸为参照峰,测定10批桂枝甘草龙骨牡蛎汤剂及各缺味药材阴性对照色谱图;采用《中药色谱指纹图谱相似度评价系统》2004 A版对10批桂枝甘草龙骨牡蛎汤HPLC指纹图谱进行评价。结果:建立了该方汤剂指纹图谱;确定了9个共有峰,指认其中4个共有峰分别为:甘草苷、肉桂酸、桂皮醛、甘草酸铵;10批桂枝甘草龙骨牡蛎汤HPLC指纹图谱相似度均大于0.95。结论:该方法灵敏度高、稳定性和准确性良好,体现了桂枝甘草龙骨牡蛎汤组分的整体特征,为桂枝甘草龙骨牡蛎汤制剂质量标准的建立提供了可靠的科学依据。

柴胡龙骨牡蛎汤高效液相色谱指纹图谱的建立

目的:建立柴胡龙骨牡蛎汤水煎液和正丁醇萃取液的反相高效液相指纹图谱的检测方法。方法:采用高效液相色谱法,Thermo Fisher Hypersil GOLD C18色谱柱,流动相乙腈-0.1%磷酸水溶液,梯度洗脱,柱温35℃,流速1 m L·min-1,检测波长276,210 nm。结果:分别建立了柴胡龙骨牡蛎汤水煎液和正丁醇萃取液指纹图谱共有模式,并指认其中的共有色谱峰。通过与对照品的保留时间和紫外光谱图比较,水煎液指纹图谱中8,12,14,15号峰分别归属为黄芩苷、肉桂酸、桂皮醛、大黄酸。正丁醇萃取液指纹图谱中16,17,28,29号峰分别归属为人参皂苷Rg1,人参皂苷Re,柴胡皂苷a,柴胡皂苷b2。10批柴胡龙骨牡蛎汤水煎液和正丁醇萃取液的HPLC指纹图谱相似度,均>0.88。结论:该方法灵敏度高、稳定性和准确性良好,为柴胡龙骨牡蛎汤质量标准建立提供了可靠的科学依据。

牡蛎中糖蛋白成分的分离纯化与理化性质的初步分析

目的从牡蛎蛋白质中分离糖蛋白并对其理化性质进行初步研究。方法以青岛牡蛎为原料,通过低温水提取工艺得到牡蛎糖蛋白粗提物,用凝胶柱层析(Sephacryl s-100 HR)进行纯化,最后用高效液相色谱制备得到3个组分F22,F33,F42。结果理化性质的研究表明组分F22等电点分别是5.5,其相对分子质量为34230Da,F22,F33,F42的蛋白含量分别为34.1%、19.7%及12.5%,其糖含量分别为35.9%、28.8%及40%。结论本研究将为牡蛎中活性物质的研究提供参考。

芍药汤高效液相色谱指纹图谱的建立

目的:建立芍药汤水煎液的RP-HPLC指纹图谱检测方法。方法:使用Agilent ZORBAX SB-C18色谱柱(4.6 mm×250 mm,5μm),柱温25℃,流速1.0 m L·min-1,波长230 nm,流动相乙腈-0.05%磷酸水溶液,以芍药苷为参照峰,评价10批芍药汤HPLC指纹图谱。结果:确定了其中13个共有峰,并对其中的3个峰进行指认,分别为芍药苷、黄芩苷、小檗碱,建立了芍药汤水煎液指纹图谱;10批芍药汤HPLC指纹图谱相似度均>0.96。结论:该法灵敏度高、稳定性和准确性良好,体现了芍药汤组分的整体特征,为芍药汤制剂质量标准的建立提供了可靠的科学依据。