代谢组学方法在食品安全中的应用研究进展

代谢组学方法作为一个新兴的重要研究工具,在药物研发、疾病诊断、植物生理、食品营养学及环境科学等很多领域中得以广泛应用。本文主要介绍代谢组学的研究方法在食品安全分析应用中的最新进展,以推动我国在快速检测检验方面的技术进步和突破,从而达到保障食品安全的目的。

蛋白质芯片在食品安全方面的应用

近年来,食品安全问题越来越引起人们的重视。由于蛋白质芯片能够在一次实验中对大量样本中的目的蛋白质同时进行检测,这一技术已引起人们的很大兴趣。蛋白质芯片在食品安全的检测方面有着很大的潜在价值,本文中作者就蛋白质芯片的基本原理、技术特点以及其在食品安全中的应用近况进行综述。

中国对虾过敏原基因特征的生物信息学分析

为了研究过敏原基因的基本性质、探讨过敏的机理,对中国对虾过敏原基因的部分序列进行克隆、测序,并分析该基因的有效密码子,碱基组成、密码子的偏好性,以及过敏原蛋白的氨基酸组成等性质。结果表明:中国对虾过敏原的部分基因序列长为1034,共编码264个氨基酸,密码子的偏好性强,不同海产动物过敏原基因的有效密码子及碱基含量有很大的相似性。从基因序列和氨基酸序列的角度看,中国对虾的过敏原蛋白与其他种类海产甲壳动物的过敏原蛋白具有很强的相似性,这可能是导致海产品过敏原蛋白活性交叉反应的重要原因之一。

水产品中创伤弧菌的快速检测与分离

目的:对水产品中创伤弧菌的快速检测与分离技术进行研究。方法:蛤蜊肉经高速匀浆处理后,在含有多粘菌数B的碱性蛋白胨水中增菌培养(35～37℃,12～16h),然后用PCR技术检测样品。PCR检测的目的基因是创伤弧菌的溶细胞毒素(hemolysin/cytolysin)基因,扩增产物为222bp。对PCR结果呈阳性的样品做原位杂交实验,用碱磷酶标记的寡核苷酸探针VVAP来分离创伤弧菌。通过对购买于青岛丹东路小市场的蛤蜊进行检验,分离出了2株创伤弧菌。结果表明:应用PCR、原位杂交技术能快速检测和分离水产品中存在的创伤弧菌。

高效液相色谱氢化物发生原子荧光(HPLC-HG-AFS)联用技术检测海藻食品中无机砷

海藻食品中无机砷的含量是水产品质量检验中主要的安全卫生指标。实验采用高效液相色谱氢化物发生原子荧光联用技术(HPLC-HG-AFS)对海藻食品中无机砷的检测进行了研究。通过实验优化了提取剂、提取时间及其仪器条件,建立了HPLC-HG-AFS联用技术检测海藻食品中无机砷含量的方法。用1.2mol/LHCl在70℃水浴下提取1h,用过氧化氢(H2O2)氧化;pH6.0的15mmol/L(NH4)2HPO4溶液为流动相,HPLC-HG-AFS上机分析。样品加标量在0.10mg/kg和1.00mg/kg时的平均回收率均在92%以上,相对标准偏差均低于4%,方法精密度较高。研究结果表明,该方法测定海藻中的无机砷较为准确、可靠,为制定农业行业标准海藻食品中无机砷的测定,提供技术支持。

冷藏牙鲆中主要腐败菌卵黄抗体的抑菌性能

根据菌落形态、生理生化特征,利用细菌鉴定系统,对4℃冷藏养殖牙鲆货架期终点时的主要腐败菌进行定性和定量研究。最终确定4℃冷藏货架期终点时养殖牙鲆的优势腐败菌为腐败希瓦氏菌,占细菌总数的比例约为58.4%。水产品中常见的腐败菌假单胞菌属细菌主要包括荧光假单胞菌、腐臭假单胞菌和边缘假单胞菌,它们在假单胞菌属中所占的比列依次是63.2%、29.2%、7.6%。以3种主要的腐败菌腐败希瓦氏菌、荧光假单胞菌和腐臭假单胞菌作为混合抗原,以两种不同方式免疫产蛋母鸡,制备两种卵黄抗体,并对其液体和固体培养条件下的抑菌效果进行研究。结果表明:液体培养8h,质量浓度为100mg/mL的两种混合抗体对抗原菌的抑制率能达到61%～78%;固体培养24h后,同样质量浓度的两种混合抗体对抗原菌的抑制率能达到27%～40%。这表明卵黄抗体有望作为一种新型的天然抑菌剂应用于水产食品的抑菌防腐。

舌鳎营养风味鱼面加工工艺的研究

以优质鲆鲽鱼——舌鳎为原料,研究了营养风味鱼面的加工工艺。通过单因素和正交实验等,确定原料最优配比为:65g面粉,35g鱼糜,1·5g精制加碘盐,3g蛋清,0·25g海藻酸钠。结果表明,研制的舌鳎营养风味鱼面具有营养丰富,口感良好,食用和保藏都较为简便等优点,具有良好的发展前景。

动物源性食品中氨基糖苷类抗生素检测技术的研究进展

氨基糖苷类抗生素在畜牧业中被普遍应用,但其在动物组织中的残留给人类带来很大的危害。人们开始越来越重视氨基糖苷类抗生素在动物源性食品中的残留问题。一些发达国家和国际食品法典委员会,对氨基糖苷类抗生素的限量,都作了很严格的规定,并且该抗生素的检测技术已成为研究的热点。笔者对目前氨基糖苷类抗生素的检测技术作了综述,并对以后的发展方向进行了展望。

海产鱼类中异尖线虫酶消化检测技术的研究与应用

以3种海鱼(牙鲆、狭鳕、鲱鱼)为样本,针对海产品中主要的致病性寄生虫-异尖线虫,开展了酶消化检测技术的研究。根据鱼肉消化前后干物质的质量变化设计了胃蛋白酶消化效率的计算方法,并按照鱼肉∶消化液=1∶10(g/mL)的反应比例,分别确定了酶水解鱼肉的最佳条件为:初始pH值为1.1,温度为37℃,酶活力为8 U/mL左右;消化后所得的虫体采用多重PCR方法替代传统的形态学观察进行种属鉴定,从而初步建立了基于酶水解-多重PCR的异尖线虫的酶消化检测体系。实际样本检测表明,该技术可以较为准确、快速地用于海产鱼类中简单异尖线虫(Anisakis simplex)和伪地新线虫(Pseudoterranova decipiens)的确证性检测。

刀额新对虾主要过敏原蛋白的肽指纹图谱鉴定与分析

以我国常见的刀额新对虾为研究对象,旨在获得其主要过敏原的氨基酸序列等基础数据,增加对虾类过敏原的认识和理解。分离和纯化了分子量为36 kD的虾主要过敏原蛋白,利用激光辅助解析/飞行时间质谱对其进行肽质量指纹图谱鉴定,并对鉴定的结果采用Mascot搜索引擎在NCBInr数据库上进行搜索。结果表明刀额新对虾主要过敏原蛋白与斑节对虾原肌球蛋白匹配分值最高为268,吻合肽段27条,序列覆盖率为65%;与其它无脊椎动物如腐食酪螨、衣鱼等的原肌球蛋白的序列覆盖率也很高,分别达到了51%和53%。这一结果不仅表明了刀额新对虾与其它甲壳类海产品过敏原存在着高度同源性,而且为其与甲壳类及其它无脊椎动物主要过敏原之间存在严重交叉反应的现象提供了理论依据。

低过敏性海产食品的研究

综述了引起海产品过敏主要的过敏原及其特征,阐述了海产食品过敏原性的研究进展以及面临的困难和存在的问题,对低过敏性海产食品的开发途径进行了展望,为我国海产食品的深加工提供一定的参考。

菲律宾蛤仔过敏原可视化抗体微阵列玻片的检测方法

采用辣根过氧化物酶(HRP)与3,3′,5,5′—四甲基联苯胺(TMB)—H2O2作为信号示踪系统,建立了一种可视化抗体微阵列检测菲律宾蛤仔过敏原的方法。对孵育时间、抗体浓度等免疫条件进行了优化。采用改良双抗体夹心法,将菲律宾蛤仔过敏原的兔多克隆抗体固定于琼脂糖三维芯片上,依次加入待检样品、菲律宾蛤仔鼠多克隆抗体和HRP-羊抗鼠IgG,孵育后加TMB显色,肉眼观察后,用平板扫描仪获取扫描图象,采用GenePixPro6.0软件分析灰度值。试验结果表明,该方法最低可检出10ng/mL的菲律宾蛤仔过敏原,片内平均变异系数(CV)为5.99%,片间为10.3%;香肠及蟹棒中3个不同浓度的加标回收率为73.54%～95.44%;4℃存放4个月内抗体微阵列玻片活性保持稳定。该方法不需要大型精密仪器,结果直观可见,可以发展为对多种过敏原进行同时检测,具有良好的实用和推广价值。

青岛进口海鱼中异尖线虫感染情况调查

为了研究我国青岛海产品加工企业进口海鱼原料中鱼肉内异尖线虫的感染情况,试验在青岛3个海产品加工企业中随机抽取8个鱼种共365份海鱼鱼片,使用胃蛋白酶对其进行完全消化,将检出的线虫进行形态鉴定,对线虫残段运用多重PCR方法进行分子鉴定。结果表明:有7个鱼种共159份海产品中感染有异尖线虫,感染率为43.56%;其中检出异尖属线虫Ⅰ型幼虫共373条,残段54个;伪地新属线虫幼虫共1条,残段1条。说明进口海鱼鱼肉内异尖属线虫Ⅰ型幼虫感染情况较为严重,提示企业应慎重选择进口海鱼原料,且生产时要加大对异尖线虫的检测力度。