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菲律宾蛤仔雌激素相关受体基因克隆及互作蛋白筛选
被引量:
1
1
作者
刘佩佩
苗晶晶
+2 位作者
刘力铷
姚琳琳
潘鲁青
《中国海洋大学学报(自然科学版)》
CAS
CSCD
北大核心
2019年第S1期9-15,共7页
采用RACE技术克隆鉴定了菲律宾蛤仔(Ruditapes philippinarum)雌激素相关受体(rpERR)基因的cDNA序列。rpERR基因全长序列为2 340 bp,开放阅读框ORF为1 453 bp,编码484个氨基酸,理论分子量为54.5 kDa。氨基酸序列同源性分析表明菲律宾蛤...
采用RACE技术克隆鉴定了菲律宾蛤仔(Ruditapes philippinarum)雌激素相关受体(rpERR)基因的cDNA序列。rpERR基因全长序列为2 340 bp,开放阅读框ORF为1 453 bp,编码484个氨基酸,理论分子量为54.5 kDa。氨基酸序列同源性分析表明菲律宾蛤仔ERR与脊椎动物ERRγ同源性相近,与其他无脊椎动物聚为一个分支,与虾夷扇贝的ERR同源性最高。rpERR含有核受体超家族通常的6个结构域。通过qRT-PCR技术检测发现ERR在菲律宾蛤仔的鳃、消化盲囊、性腺、闭壳肌和外套膜组织中各组织中均有表达,在性腺中的表达量最高。运用酵母双杂交技术对菲律宾蛤仔酵母cDNA文库进行互作蛋白筛选、测序及生物信息学分析,获得了菲律宾蛤仔ERR互作蛋白为cAMP应答元件结合蛋白。根据rpERR的生物信息学分析、各组织中表达特征以及互作蛋白推测其功能可能涉及性腺发育与物质能量代谢等重要生物学过程的调节。
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关键词
菲律宾蛤仔
雌激素相关受体基因
酵母双杂交
互作蛋白
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职称材料
菲律宾蛤仔GnRH基因沉默对其性激素合成酶基因表达的影响
2
作者
姜珊珊
苗晶晶
+1 位作者
刘力铷
潘鲁青
《中国海洋大学学报(自然科学版)》
CAS
CSCD
北大核心
2020年第5期46-52,共7页
为了探究菲律宾蛤仔(Ruditopes philippinarum)GnRH基因沉默对其性激素合成酶表达的调控作用,本研究首先根据菲律宾蛤仔GnRH cDNA序列,优化设计并合成了2条dsRNA,进行了作用时间、作用浓度的筛选。研究显示,30μg/50μL的GnRH-ds1干扰...
为了探究菲律宾蛤仔(Ruditopes philippinarum)GnRH基因沉默对其性激素合成酶表达的调控作用,本研究首先根据菲律宾蛤仔GnRH cDNA序列,优化设计并合成了2条dsRNA,进行了作用时间、作用浓度的筛选。研究显示,30μg/50μL的GnRH-ds1干扰链注射到实验动物血腔后48 h,菲律宾蛤仔脏神经节中GnRH基因表达量较PBS组下降了73.3%,较阴性对照组下降了71.4%,达到了对菲律宾蛤仔体内GnRH基因表达的抑制作用。对性腺发育增殖期的菲律宾蛤仔进行dsRNA注射后48 h,采用荧光定量PCR测定了对照组和GnRH表达沉默组菲律宾蛤仔性腺中性激素合成相关基因CYP17、3β-羟基类固醇脱氢酶(3β-HSD)和17β-HSD的mRNA表达量,发现在GnRH沉默组的菲律宾蛤仔性腺中3β-HSD的表达量与对照组相比无显著变化,而CYP17和17β-HSD的表达量与空白对照组和阴性对照组相比分别下降了86.3%和84.9%(p<0.05)。实验结果初步说明菲律宾蛤仔体内GnRH可能通过调控其性腺中CYP17、17β-HSD的基因表达而影响性激素的合成并调控生殖发育。
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关键词
促性腺激素释放激素
基因沉默
菲律宾蛤仔
性激素合成
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职称材料
题名
菲律宾蛤仔雌激素相关受体基因克隆及互作蛋白筛选
被引量:
1
1
作者
刘佩佩
苗晶晶
刘力铷
姚琳琳
潘鲁青
机构
中国海洋大学水产学院水产动物环境生理学研究室
出处
《中国海洋大学学报(自然科学版)》
CAS
CSCD
北大核心
2019年第S1期9-15,共7页
基金
国家自然科学基金青年项目(31602164)资助~~
文摘
采用RACE技术克隆鉴定了菲律宾蛤仔(Ruditapes philippinarum)雌激素相关受体(rpERR)基因的cDNA序列。rpERR基因全长序列为2 340 bp,开放阅读框ORF为1 453 bp,编码484个氨基酸,理论分子量为54.5 kDa。氨基酸序列同源性分析表明菲律宾蛤仔ERR与脊椎动物ERRγ同源性相近,与其他无脊椎动物聚为一个分支,与虾夷扇贝的ERR同源性最高。rpERR含有核受体超家族通常的6个结构域。通过qRT-PCR技术检测发现ERR在菲律宾蛤仔的鳃、消化盲囊、性腺、闭壳肌和外套膜组织中各组织中均有表达,在性腺中的表达量最高。运用酵母双杂交技术对菲律宾蛤仔酵母cDNA文库进行互作蛋白筛选、测序及生物信息学分析,获得了菲律宾蛤仔ERR互作蛋白为cAMP应答元件结合蛋白。根据rpERR的生物信息学分析、各组织中表达特征以及互作蛋白推测其功能可能涉及性腺发育与物质能量代谢等重要生物学过程的调节。
关键词
菲律宾蛤仔
雌激素相关受体基因
酵母双杂交
互作蛋白
Keywords
Ruditapes philippinarum
estrogen-related receptor gene
yeast two-hybrid
interaction protein
分类号
S917.4 [农业科学—水产科学]
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职称材料
题名
菲律宾蛤仔GnRH基因沉默对其性激素合成酶基因表达的影响
2
作者
姜珊珊
苗晶晶
刘力铷
潘鲁青
机构
中国海洋大学水产学院水产动物环境生理学研究室
出处
《中国海洋大学学报(自然科学版)》
CAS
CSCD
北大核心
2020年第5期46-52,共7页
基金
山东省自然科学基金面上项目(ZR2016CM31)资助。
文摘
为了探究菲律宾蛤仔(Ruditopes philippinarum)GnRH基因沉默对其性激素合成酶表达的调控作用,本研究首先根据菲律宾蛤仔GnRH cDNA序列,优化设计并合成了2条dsRNA,进行了作用时间、作用浓度的筛选。研究显示,30μg/50μL的GnRH-ds1干扰链注射到实验动物血腔后48 h,菲律宾蛤仔脏神经节中GnRH基因表达量较PBS组下降了73.3%,较阴性对照组下降了71.4%,达到了对菲律宾蛤仔体内GnRH基因表达的抑制作用。对性腺发育增殖期的菲律宾蛤仔进行dsRNA注射后48 h,采用荧光定量PCR测定了对照组和GnRH表达沉默组菲律宾蛤仔性腺中性激素合成相关基因CYP17、3β-羟基类固醇脱氢酶(3β-HSD)和17β-HSD的mRNA表达量,发现在GnRH沉默组的菲律宾蛤仔性腺中3β-HSD的表达量与对照组相比无显著变化,而CYP17和17β-HSD的表达量与空白对照组和阴性对照组相比分别下降了86.3%和84.9%(p<0.05)。实验结果初步说明菲律宾蛤仔体内GnRH可能通过调控其性腺中CYP17、17β-HSD的基因表达而影响性激素的合成并调控生殖发育。
关键词
促性腺激素释放激素
基因沉默
菲律宾蛤仔
性激素合成
Keywords
gonadotropin releasing hormone
gene silencing
Ruditapes philippinarum
steroidogenesis
分类号
Q71 [生物学—分子生物学]
S917.4 [农业科学—水产科学]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
菲律宾蛤仔雌激素相关受体基因克隆及互作蛋白筛选
刘佩佩
苗晶晶
刘力铷
姚琳琳
潘鲁青
《中国海洋大学学报(自然科学版)》
CAS
CSCD
北大核心
2019
1
下载PDF
职称材料
2
菲律宾蛤仔GnRH基因沉默对其性激素合成酶基因表达的影响
姜珊珊
苗晶晶
刘力铷
潘鲁青
《中国海洋大学学报(自然科学版)》
CAS
CSCD
北大核心
2020
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