海洋弧菌QY105中褐藻胶寡糖酶OalA的基因克隆、重组表达与性质研究

目的褐藻胶寡糖酶可将褐藻胶多糖和寡糖降解为单糖,但现有的褐藻胶寡糖酶数量极少且活力较差。本文旨在从海洋弧菌QY105中克隆寡糖酶OalA的编码基因,重组表达并研究其酶学性质。方法利用简并PCR和SiteFinding-PCR从海洋弧菌QY105中克隆得到褐藻胶寡糖酶OalA的编码基因,在大肠杆菌中进行重组表达,对重组酶进行分离纯化及酶学性质研究。结果褐藻胶寡糖酶OalA基因全长2082bp,编码1条含有693个氨基酸残基的多肽链,理论分子量为79.17kDa,理论等电点为4.98,属于多糖裂解酶第15家族(PL^(-1)5)。重组OalA比活力为9.2U·mg^(-1),最适温度30℃,在10℃的酶活力达到最高酶活的45%,最适pH7.6,在低于30℃和pH6~10范围内稳定,偏好降解polyM。结论OalA具有低温酶的特点,且对polyM具有偏好性,可用于褐藻胶单糖制备、PL^(-1)5家族结构与功能相互关系研究等领域。

福建省沿海独立岛屿(东山岛)大气颗粒物中多氯联苯的区域背景

为了研究海洋背景区域大气中多氯联苯(PCBs)的污染状况,于冬、春和夏季在福建省沿海岛屿东山岛连续采集大气颗粒物样品.结果显示,东山岛大气颗粒物中PCBs浓度范围为0.11—16.95 pg·m^(-3),平均值5.53±4.31 pg·m^(-3).通过对比其他区域发现,东山岛大气颗粒物中PCBs处于较低水平,其含量与海洋背景区域相当.PCBs浓度季节变化明显,表现为冬春季高而夏季低.冬季,PCBs以高氯取代化合物为主,而春、夏季以低氯取代化合物为主.气团来源的季节性变化、气象条件参数(如降雨量、温度、大气压、风速、相对湿度、水气压)是影响PCBs浓度变化的主要因素.东山岛大气颗粒物中PCBs的干沉降通量为1.34 ng·m^(-2)·d^(-1),冬春季沉降通量明显高于夏季,按照东山岛海域覆盖面积(36200 km^2)估算,每年PCBs以干沉降入海通量约为12.84 kg.

被动源成像中透射与反射响应关系研究

从地下传播到地表的透射响应(噪声)包含丰富的有效信息,从中提取地球的反射响应是地震处理中的一项新技术,称为被动源地震干涉法。本文从一维分析的角度直观展示了如何从透射响应中提取反射响应,利用逆时不变原理给出干涉法的物理解释,并基于相关型单程波互易理论推导了透射与反射响应关系的理论公式。通过有限差分法实现了高效的噪声波场模拟,证实了从透射响应中提取反射响应的有效性。分析得出,噪声记录时间越长提取出的反射响应信噪比越高。

东海海水和大气中挥发性卤代烃的分布

运用吹扫-捕集气相色谱法于2016年6月对东海海水和大气中5种短寿命挥发性卤代烃的浓度含量、分布来源特征及海-气通量进行了研究.结果表明,表层海水中CH_3I、CH_2Br_2、CHBr Cl_2、CHBr_2Cl和CHBr_3浓度平均值及范围分别为8.93(0.39~23.49)pmol/L、15.02(4.77~32.75)pmol/L、0.97(0.30~2.16)pmol/L、9.35(6.8~18.46)pmol/L和12.24(2.60~50.04)pmol/L.受陆源输入、水团和生物活动释放的影响,表层海水中CH_3I、CH2Br_2和CHBrCl_2的浓度分布呈现近岸高远海低的趋势,CHBr_2Cl和CHBr_3浓度呈现点状分布.相关性分析发现CHBr_3和Chl-a存在显著相关性,推断浮游植物生物量可能影响CHBr_3的浓度分布.大气中CH_3I、CH_2Br_2、CHBr Cl_2、CHBr_2Cl和CHBr_3浓度平均值及范围分别为3.52×10^(-12)(1.72×10^(-12)~10.00×10^(-12))、3.82×10^(-12)(0.20×10^(-12)~34.95×10^(-12))、1.40×10^(-12)(0.46×10^(-12)~6.18×10^(-12))、1.55×10^(-12)(0.16×10^(-12)~4.66×10^(-12))和6.63×10^(-12)(2.20×10^(-12)~11.61×10^(-12)).受陆源气团输送、生物生产和气象条件的共同影响,春季大气中5种短寿命挥发性卤代烃浓度分布较为复杂.海-气通量的估算结果表明春季东海是大气中CH_3I、CH2Br_2、CHBr Cl_2、CHBr_2Cl和CHBr_3的源.

铜绿假单胞菌中乙酰化褐藻胶的生物合成和功能研究进展

铜绿假单胞菌(Pseudomonas aeruginosa)是临床上三大机会致病菌之一,可导致多种急慢性感染。铜绿假单胞菌感染人体后,往往会转变成过量产生乙酰化褐藻胶的黏液型细菌,并形成生物被膜(biofilm)。一旦形成生物被膜,细菌将具有极强的抗生素耐药性和逃避机体免疫系统攻击的能力,造成临床上难治性、持续性感染。乙酰化褐藻胶是P.aeruginosa生物被膜的主要成分,决定了生物被膜的结构与功能。因此,本文从乙酰化褐藻胶的生物合成途径及调控机制、在细菌中的生物学功能及作为抗菌药物开发靶点等几个方面进行了综述。

基于荧光共振能量转移技术的STAT3二聚化抑制剂筛选模型的建立

目的构建信号传导与转录激活因子3(signal transducer and activator of transcription factor 3,STAT3)二聚化抑制剂筛选模型,为STAT3抑制剂筛选提供实验方法。方法分别构建pECFP-N1-STAT3和pEYFP-N1-STAT3的荧光报告载体,利用脂质体转染技术将二者共转入HEK-293T细胞,利用ECFP和EYFP 2种荧光蛋白之间能量共振转移,检测磷酸化STAT3分子的二聚化水平,并检测Stattic对二聚化的影响。结果成功构建了pECFP-N1-STAT3和pEYFP-N1-STAT3的荧光报告载体。将2种荧光报告载体共转染HEK-293T细胞后,Western Blot检测结果显示STAT3以及p-STAT3的表达水平明显增加。以458nm波长激发ECFP,其发射波长可激发EYFP。加入STAT3二聚化抑制剂Stattic后,荧光强度降低,且呈现一定的剂量依赖性。结论基于荧光共振能量转移技术的STAT3二聚化抑制剂筛选模型构建成功。