青岛近海琼胶降解细菌的筛选和多样性分析

对青岛近海海水中琼胶降解细菌进行系统的分离,筛选得到87株海洋琼胶降解细菌。从中选出15株有代表性的菌株,克隆其16SrDNA序列,进行分子鉴定。结果表明,这些细菌主要分布在Cellulophaga,Cytophaga,Microbulbifer,Glaciecola,Pseudoalteromonas,Pseudomonas,Alteromonas和Agarivorans共8个属中。其中QM5,QM21,QM36鉴定为Cellulophaga lytica,QM15和QM28鉴定为Glaciecola mesophila,QM11,QM35,QM47,QM65分别鉴定为Cytophaga fuci-cola,Pseudoalteromonas atlantica,Pseudoalteromonas haloplanktis,Alteromonas addita。其余5株菌能够鉴定到属的水平。其中1株细菌QM42还不能确立分类地位。

大菱鲆红体病虹彩病毒体外增殖条件的研究

探讨大菱鲆病毒疫苗的研制,以牙鲆鳃细胞(FG细胞)为增殖体系,利用细胞病变效应(CPE)为判断指标,对大菱鲆红体病虹彩病毒(Turbot reddish body iridovirus,TRBIV)的体外最适增殖条件等进行了研究。结果表明,病毒接种量、病毒吸附时间、细胞培养条件对TRBIV的体外增殖均有明显的影响,以0.2 mL病毒液接种FG细胞、吸附2 h、用含10%胎牛血清的MEM培养液于22℃培养时,病毒的增殖速度最快。研究还发现,病毒的收获时间和病毒液冻融次数对所得病毒的感染力均有显著影响,在最佳增殖条件下,病毒在FG细胞中增殖至第4天时进行收获,且只冻融1次,其感染活性最强,反复冻融后病毒的感染活性会显著降低。

偶氮染料脱色优势细菌的初步研究

从黄河泥土、小清河淤泥样品中分离、筛选到了5株对偶氮染料具有脱色优势的细菌.5株细菌初步鉴定结果分别为:DRBD-6属于奈瑟氏球菌科中的不动杆菌属,DRGD-3属于芽孢杆菌科芽孢杆菌属,DBGD-3属于弧菌科气单胞菌属,DOⅡD-1属于弧菌科邻单胞菌属,DYGD-4属于假单胞菌科假单胞菌属.以温度、pH值、时间设计的正交实验优化了DRBD-6菌和DYGD-4菌的脱色条件,结果表明,它们的最佳脱色条件分别是pH值为7,温度为42℃,时间为24 h和pH值为7,温度为37℃,时间为12 h.

岩虫的性腺发育和生殖周期

根据性腺发育的组织切片观察,岩虫(Marphysa sanguinea)性腺发育可分为增生期、成熟期、排放期和休止期4个阶段.通过连续两年每月对岩虫性腺组织切片观察可以确定,在山东省乳山海区的岩虫性腺发育为1年1个周期.12月至翌年6月为增生期;7～8月为成熟期;7月下旬至8月为排放期;9～11月为休止期,其中7月下旬至8月中旬为繁殖盛期.岩虫的性腺起源于体腔腹面生殖上皮.生殖细胞发生时不出现滋养细胞.除休止期外,生殖细胞持续发生,成熟时多次排放.雄性生殖细胞形成合胞体(syncytium),精子为原始类型.雌性生殖细胞不形成合胞体,卵母细胞在发育的早期阶段,卵黄发生期间从卵巢(生殖上皮)排入体腔中,并在体腔中发育.卵细胞成熟时,有卵外膜,结构复杂.

仙客来(Cyclamen persicum Mill)体细胞胚的发生及组织细胞学的研究

以仙客来开花植株新生叶片为外植体，成功诱导、筛选出体细胞胚发生的胚性愈伤组织，胚性愈伤组织的形态有两种：微棕红色松软愈伤和松脆愈伤．显微镜下观察松软胚性愈伤多为含有数十个胚性细胞的胚性细胞团，而松脆胚性愈伤的胚性细胞团的胚性细胞数目只有几个或十几个．细胞学观察二者均包含前胚性细胞团、二细胞、四细胞、八细胞，进一步继代培养2周可观察到多细胞原胚、球形胚、梨形胚、心形胚、鱼雷胚的出现，大多数体胚60～90d可发育成完整的小植株．

家兔(Oryctolagus curiculus)角膜内皮细胞系的建立

为了建立兔角膜内皮(RCE)细胞系,以家兔角膜为实验材料对RCE细胞的体外培养及其细胞系的建立进行了研究.取活家兔角膜,采用内皮面朝下进行贴板培养,并利用时间梯度连续揭膜法筛选出仅含有纯净RCE细胞的培养孔,收集纯一的RCE细胞悬浮于含有硫酸软骨素氧化降解物、牛眼生素、表皮细胞生长因子、碱性成纤维细胞生长因子、家兔角膜基质细胞培养液、羧甲基壳多糖、N-乙酰葡萄糖盐酸盐和氨基葡萄糖盐酸盐的DMEM/F12培养液(20%胎牛血清)中,置CO2培养箱中启动原代培养.启动培养的RCE细胞呈四角形或多角形,3周后即可长成单层.在随后的继代培养中,RCE细胞的形状逐渐由多角形变为成纤维样.RCE细胞生长状态稳定,现已被传至67代,已经建成了一个新的连续性RCE细胞系.经鉴定,该细胞系细胞的群体倍增时间约为53.8h;第67代培养细胞的特征性染色体数目为44条,但出现了染色体的非整倍性.综合特征性染色体数目、抗神经元特异性烯醇化酶(NSE)抗体的免疫细胞化学染色、血管内皮生长因子(VEGF165)实验和形态回复实验的研究结果,证明该细胞系确为家兔角膜内皮细胞系,为哺乳动物角膜内皮细胞的理论研究及人造角膜内皮的研制奠定了基础.