以子房为材料制备烟草染色体标本的方法

为使烟草染色体标本制备过程中取材更方便,本研究以异源五倍体烟草(2n=5x=58)为材料,观察了不同大小子房、不同预处理方法对烟草染色体制片效果的影响。首先,子房大小按花冠与花萼长度比例分为6类;其次,预处理方法分为2类,即:(1)室温下于0.002mol/L的8-羟基喹啉中预处理2、4和6h;(2)7℃下于0.002mol/L的8-羟基喹啉中预处理12、24和36h。结果显示,当花冠长度小于或等于花萼长度的1/2时,子房中分裂期细胞的比例最大,为97.00±17.82个/1000个。该时期子房于7℃经24h预处理后,染色体数目与形态清晰可辨。利用上述方法制作云烟87(2n=4x=48)和N.plumbaginifolia(2n=2x=20)的染色体标本,均获得较好的结果。此外,将上述方法制作的五倍体烟草染色体经5SrDNA-FISH,获得了清晰可辨的5个不同信号,与预期一致。可见,幼嫩子房可用于烟草染色体标本的制作,且用改良的预处理方法制备的染色体标本可用于染色体计数和核型分析,也可用于原位杂交分析。