基因枪介导的高羊茅基因转化体系的建立

用高羊茅 (FestucaarundinaceaSchreb .)种胚离体诱导的胚性愈伤组织作受体进行了基因枪的轰击试验 ,确定了以轰击 2枪 ,子弹距可裂圆片 6cm ,子弹距轰击受体 6cm为最佳轰击参数 ,建立了基因枪优化转化方案 ,获得了遗传稳定的抗除草剂PPT的转化植株。随机抽取的转化植株的Bar基因PCR检测、总DNA点杂交 ,皆成阳性 ,除草剂PPT抗性试验表明 ,转化植株比对照有了更强的抗性。

木薯新品种华南8号的选育

木薯新品种华南8号(Manihot esculenta Crantz.cv.M.SC8)是由中国热带农业科学院热带作物品种资源研究所通过CIAT从泰国引进的CMR38-120的自然杂交种F1无性系后代中选育而成的。该品种具有良好的丰产性和广泛的适应性,并有很强的抗风能力和出苗率。其鲜薯产量约36.79t/hm2,比现大面积种植的当家品种华南20(5SC205)增产40.90%,其块根干物率和淀粉含量分别为质量分数40.86%和32.69%,分别比SC205高2.70个百分点和2.16个百分点。因此,华南8号是一个高产、优质的饲用和工业应用型木薯新品种。为了保护新品种及便于产权鉴定,对新品种华南8号建立分子指纹。

木薯新品种华南7号的选育

华南7号是中国热带农业科学院热带作物品种资源研究所于1986年利用华南205的自然杂交种选育而成的。该品种有良好的丰产性和广泛的适应性,其块根产量约为42.61t/hm2,与现大面积种植的SC205当家品种(下称对照品种)相比,历年平均增产44.28%;其块根干物率和淀粉含量分别为34.15%和27.32%,分别比对照品种高1.45个百分点和1.16个百分点。因此,华南7号是一个高产、优质的饲用和工业应用型木薯品种。同时本文重点对新品种华南7号建立分子指纹,实用于新品种保护与产权鉴定。

高羊茅抗真菌病基因转化的研究

通过农杆菌介导法将双价载体(含抗真菌病的几丁质酶基因Chi和β-1,3-葡聚糖酶基因Glu)导入高羊茅愈伤组织细胞内,建立了高羊茅的农杆菌转化体系,获得了抗真菌病的转基因高羊茅植株。在转化过程中,确定了卡那霉素(Kan)筛选剂的浓度以200～300mg/L为宜,联合运用羧苄青霉素(Carb)与头孢霉素(Cef)作为抗菌素能得到好的脱菌效果;农杆菌的几种共培养方式对转化频率的影响表明,共培养基上垫一层滤纸,愈伤周围滴加浸染液,恢复培养1周后用甘露醇和抗生素液洗涤,是一种好的转化方式。对转化植株进行PCR分析和分子杂交及禾谷镰刀菌挑战接种,发现转化植株有高阳性率及抗真菌能力。